一种含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系及方法技术

本发明专利技术提供一种含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系及方法；所述的转化体系中，含有外源DNA和穿膜肽；所述的外源DNA和穿膜肽的质量比为1:1-3。该转化方法的步骤为选取自交授粉后的玉米的果穗的苞叶和花丝，将所述的转化体系滴在切口凹陷处。本发明专利技术在线性DNA或质粒DNA溶液中添加的穿膜肽，利用穿膜肽的特性将提高外源DNA片段整合到受体玉米基因组中的效率；本发明专利技术操作简便，无需昂贵仪器，生产成本低廉。本发明专利技术不受玉米基因型（自交系品种）和转化基因种类的限制，所以适用范围广泛；本发明专利技术采用线性DNA方法直接将外源基因导入玉米基因组，可去除质粒DNA骨架系列、特别是抗生素基因进入植物基因组，培育的转基因植物更安全，具有更好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物转基因领域，具体涉及；所述的转化 体系中，含有外源DNA和穿膜肽；所述的外源DNA和穿膜肽的质量比为1:1-3。该转化方法的步骤为选取自交授粉后的玉米的果穗的苞叶和花丝，将所述的转化体系滴在切口凹陷处。
技术介绍
在玉米的转基因方法研究中，已经报道了多种可行方法可以将外源基因导入玉米中并得以稳定遗传，这些方法包括基因枪法，PEG介导法，电激法，农杆菌介导法和花粉管通道法。在这些转化方法中大多依赖于玉米的组织培养技术，玉米的组织培养受基因型和受体范围的限制比较大，而花粉管通道转化法不依赖于植物的组织培养技术，无需昂贵的仪器设备，不受自交系品种和转化基因类型的限制，以及可进行规模化转化等优点，因此备受人们的青睐。花粉管通道转化法的主要原理是授粉后使外源DNA能沿着花粉管渗入，经过珠心通道进入胚囊，转化尚不具备正常细胞壁的卵、合子或早期胚胎细胞。周光宇(1979)认为可以利用植物授粉后所形成的天然花粉管通道(花粉管引导组织)，经珠心通道将外源DNA携带进入胚囊，转化受体为受精卵或其前后的生殖细胞(精子或卵子)，由于它们仍处于未形成细胞壁的类似“原生质体”状态，并且正进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系，其特征在于：所述的转化体系中，含有外源DNA和穿膜肽；所述的外源DNA和穿膜肽的质量比为1:1？3。

【技术特征摘要】
1.一种含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系，其特征在于所述的转化体系中，含有外源DNA和穿膜肽；所述的外源DNA和穿膜肽的质量比为1:1-3。2.根据权利要求I所述的含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系，其特征在于所述的穿膜肽的氨基酸序如序列表中SEQ ID No 1所示。3.根据权利要求I或2所述的含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系，其特征在于所述的外源DNA为线性DNA、质粒DNA中的一种。4.根据权利要求3所述的含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系，其特征在于所述的线性DNA的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No :2所示，所述的质粒DNA为质粒载体 PGM-35SBar。5.根据权利要求4所述的含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系，其特征在于所述的质粒载体PGM-35SBar的构建方法包括以下步骤 A、将基因35Sbar连接到PGreen0229质粒载体，得到35Sbar_PGreen0229质粒载体； B、将基因Nos连接到所述的35Sbar-PGreen0229质粒载体，得到Nos-35Sbar-PGreen0229 质粒载体； C、将基因UBQI连接到所述的Nos-35Sbar-PGreen0229质粒载体，得到UBQI...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴忠义，黄丛林，张秀海，罗昌，程曦，梁宏霞，李春华，翟亦倩，
申请(专利权)人：北京农业生物技术研究中心，
类型：发明
国别省市：