一种斯氏木碱的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种斯氏木碱的提取方法，其提取方法是：（1）取威廉斯氏木药材粗粉，80-95%的乙醇溶液连续逆流超声提取，得到提取液；（2）将提取液浓缩，再经氧化铝柱层析；（3）制备型液相色谱分离；（4）氯仿-甲醇重结晶，得到高纯度的斯氏木碱结晶产品。本发明专利技术方法简单、得率高，可得到高纯度产品，具有较高的经济价值和学术价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然植物提取领域，具体涉及。
技术介绍
斯氏木碱(Sickingine)，分子式C2tlH22N3,分子量304. 42。斯氏木碱是从茜草科植物染料斯氏木tine tori a (HBK)Schum.及威廉斯氏木wi I IiamsiiStandi.植物中分离得到的一种吲哚类生物碱。实验研究表明，斯氏木碱具有抑制回肠收缩作用，可抑制豚鼠离体回肠由点刺激引起的收缩，ED50为100 μ M0现有提取斯氏木碱的报道并不多见，市场上也尚未有斯氏木碱对照品的出售，因此提供则很有必要，可以为其后续研究提供支持。目前，国内尚未见斯氏木碱的提取纯化方法方面的专利报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，该方法操作简单、得率高、安全环保，可快速大量分离高纯度斯氏木碱。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下 (1)提取取威廉斯氏木药材粉碎成粗粉，用5-10倍量85-95%的乙醇溶液，25-55°C下进行连续逆流超声提取30-100min，得到乙醇提取液； (2)氧化铝柱层析上述提取液浓缩至浸膏，加氧化铝拌匀、干燥后装柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集斯氏木碱流分，浓缩干燥得到斯氏木碱粗品； (3)制备型液相色谱分离上述粗品采用制备型液相色谱分离，紫外检测器在线监测，收集斯氏木碱组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，得斯氏木碱粗晶；(4)重结晶将斯氏木碱粗晶用氯仿-甲醇重结晶，冷冻干燥得到高纯度斯氏木碱晶体。步骤(I)所述超声频率为50-80KHZ。步骤(2)所述氧化铝为80-120目，氯仿-丙酮体积比为1:1，用量为柱体积的4_8倍。步骤(3)所述制备型液相色谱的流动相为乙腈-O. 2%乙二胺水溶液，体积比为35:65，紫外检测波长为220nm。步骤(4)所述氯仿-甲醇的体积比为2. 5-3:1。本专利技术的优点在于 1)操作简单、耗时短，易于产业化放大； 2)提取、柱层析、制备液相分离等步骤中的溶剂用量少，并可回收再利用； 3)具有较高的经济效益和学术价值，本专利技术所得产品纯度高，可为斯氏木碱的进一步开发提供药理原料和实践支持。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术进一步说明 实施例I: 取威廉斯氏木药材Ikg,粉碎成粗粉,从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入10倍95%乙醇溶液，55°C下进行连续逆流超声提取30min，超声频率为80KHz，得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，向浸膏中加氧化铝(120目)拌匀、干燥后装柱，用7倍柱体积的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集斯氏木碱流分，浓缩干燥得到斯氏木碱粗品。以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液为流动相，体积比为35:65，色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10 μ m，柱长为15cm、直径为4cm，将粗品加入流动相至刚好溶解，溶解后的溶液经O. 45 μ m微滤膜过滤，得到样品溶液，六通阀进样，进样体积为25ml,控制流速为50ml/min,紫外在线检测,检测波长为220nm,收集目标成分，减压回收试剂得斯氏木碱粗晶，用氯仿-甲醇(2. 5:1)重结晶，冷冻干燥得到高纯度斯氏木 碱晶体，经HPLC检测，纯度96. 9%。实施例2: 取威廉斯氏木药材Ikg,粉碎成粗粉,从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入10倍85%乙醇溶液，45°C下进行连续逆流超声提取lOOmin，超声频率为60KHz，得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，加氧化铝(80目)拌匀、干燥后装柱，用4倍柱体积的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集斯氏木碱流分，浓缩干燥得到斯氏木碱粗品。以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液为流动相，体积比为35:65，色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10 μ m，柱长为10cm、直径为1cm，将粗品加入流动相至刚好溶解，溶解后的溶液经O. 45 μ m微滤膜过滤，得到样品溶液，六通阀进样，进样体积为5ml,控制流速为10ml/min,紫外在线检测,检测波长为220nm,收集目标成分,减压回收试剂得斯氏木碱粗晶，用氯仿-甲醇(3:1)重结晶，冷冻干燥得到高纯度斯氏木碱晶体，经HPLC检测，纯度97. 9%。实施例3 取威廉斯氏木药材IOkg,粉碎成粗粉,从连续逆流超声提取设备头部进料口进料,从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入6倍90%乙醇溶液，35°C下进行连续逆流超声提取50min，超声频率为50KHz，得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，加氧化铝(100目)拌匀、干燥后装柱，用6倍柱体积的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集斯氏木碱流分，浓缩干燥得到斯氏木碱粗品。以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液为流动相，体积比为35:65，色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10 μ m,柱长为25cm、直径为4cm，将粗品加入流动相至刚好溶解，溶解后的溶液经O. 45 μ m微滤膜过滤，得到样品溶液，六通阀进样，进样体积为20ml，控制流速为20ml/min，紫外在线检测，检测波长为220nm，收集目标成分，减压回收试剂得斯氏木碱粗晶，用氯仿-甲醇(3:1)重结晶，冷冻干燥得到高纯度斯氏木碱晶体，经HPLC检测，纯度97. 5%。实施例4: 取威廉斯氏木药材IOkg,粉碎成粗粉,从连续逆流超声提取设备头部进料口进料,从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入5倍85%乙醇溶液，25°C下进行连续逆流超声提取80min，超声频率为60KHz，得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，加氧化铝(100目)拌匀、干燥后装柱，用8倍柱体积的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集斯氏木碱流分，浓缩干燥得到斯氏木碱粗品。以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液为流动相，体积比为35:65，色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10 μ m，柱长为50cm、直径为5cm，将粗品加入流动相至刚好溶解，溶解后的溶液经O. 45 μ m微滤膜过滤，得到样品溶液，六通阀进样，进 样体积为50ml，控制流速为120ml/min，紫外在线检测，检测波长为220nm，收集目标成分，减压回收试剂得斯氏木碱粗晶，用氯仿-甲醇(3:1)重结晶，冷冻干燥得到高纯度斯氏木碱晶体，经HPLC检测，纯度98. 2%。权利要求1.，其特征在于它包括以下步骤 (1)提取取威廉斯氏木药材粉碎成粗粉，用5-10倍量85-95%的乙醇溶液，25-55°C下进行连续逆流超声提取30-100min，得到乙醇提取液； (2)氧化铝柱层析上述提取液浓缩至浸膏，加氧化铝拌匀、干燥后装柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集斯氏木碱流分，浓缩干燥得到斯氏木碱粗品； (3)制备型液相色谱分离上述粗品采用制备型液相色谱分离，紫外检测器在线监测，收集斯氏木碱组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，得斯氏木碱粗晶； (4)重结晶将斯氏木碱粗晶用氯仿-甲醇重结晶，冷冻干燥得到高纯度斯氏木碱晶体。2.根据权利要求I所述的斯氏木碱的提取方法，其特征在于步骤(I)所述超声频率为50-80KHz。3.根据权利要求I所述的斯氏木碱的提取方法，其特征在于步骤(2)所述氧化铝为80-120目，氯仿-丙酮体积比为I:本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种斯氏木碱的提取方法，其特征在于它包括以下步骤：（1）提取：取威廉斯氏木药材粉碎成粗粉，用5？10倍量85？95%的乙醇溶液，25？55℃下进行连续逆流超声提取30？100min，得到乙醇提取液；（2）氧化铝柱层析：上述提取液浓缩至浸膏，加氧化铝拌匀、干燥后装柱，用氯仿？丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集斯氏木碱流分，浓缩干燥得到斯氏木碱粗品；（3）制备型液相色谱分离：上述粗品采用制备型液相色谱分离，紫外检测器在线监测，收集斯氏木碱组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，得斯氏木碱粗晶；（4）重结晶：将斯氏木碱粗晶用氯仿？甲醇重结晶，冷冻干燥得到高纯度斯氏木碱晶体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，万冬梅，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：