本发明专利技术公开了一种具有靶向抗血栓活性的多肽YIGSKYIGSK，还公开了它的制备方法以及它作为抗血栓剂的应用，属于生物医药领域。本发明专利技术通过YIGSK与YIGSK缀合，制备得到具有靶向抗血栓活性的多肽。动物模型试验证明，YIGSKYIGSK具有较强的抗血栓活性。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及具有靶向抗血栓活性的多肽HGSKYIGSK。本专利技术还涉及它的制备方法以及它作为抗血栓剂的应用，属于生物医药领域。
技术介绍
细胞黏附在细胞黏附性疾病(癌转移、血栓形成、化学致炎和骨质疏松)的发展过程中起关键作用。YIGSK可参与细胞黏附过程。YIGSK可选择性地黏附到活化的血小板上，即含YIGSK序列的化合物可以向血小板活化的部位富集，使纤维蛋白与活化血小板结合受阻，因而具有靶向抗血栓作用。在这样一个前提下，把YIGSK和YIGSK缀合，便可以进一步增强它的靶向抗血栓作用。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是把YIGSK和YIGSK缀合，形成具有靶向抗血栓活性的多肽YIGSKYIGSK。本专利技术的目的之二是提供一种制备抗血栓活性的HGSKYIGSK的方法。该方法包括I.采用液相合成方法，通过逐步接肽合成YIGSK的保护中间体；2.脱去YIGSK的保护中间体的N端保护基；3.脱去YIGSK的保护中间体的C端保护基；4.把N端游离的YIGSK保护中间体和C端游离的YIGSK保护中间体缀合得到YIGSKYIGSK的保护中间体；5.把HGSKYIGSK的保护中间体脱去保护基，得到HGSKYIGSK。其中，所述的N端保护基是对多肽的N端进行保护时所常用的保护基团，例如可以是叔丁氧羰基(Boc);所述的C端保护基是对多肽的C端进行保护时所常用的保护基团，例如可以是苄氧基(OBzl)，甲氧基(OMe)等。以上所述的液相合成中间体并加以保护的方法是本领域的常规并公知的技术。动物模型试验证明，本专利技术的HGSKYIGSK具有较强的抗血栓活性。为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。本专利技术中所出现的缩略语的说明THF四氢呋喃 DCC二环己基酰亚胺DCU二环己基脲OBzl苄氧基Boc叔丁氧羰基OMe甲氧基HOBtN-羟基苯并三唑NMMN-甲基吗啉具体实施例方式实施例I HGSKYIGSK的制备I) Boc-Ser (Bzl)-Lys (Z)-OBzl 的制备 将O. 59g(2. Ommol)Boc-Ser (Bzl)溶解在 6ml 无水 THF 中，O °C 下加入O. 27g(2. Ommol) N-羟基苯并三唑(HOBt)和 O. 45g(2. 2mmol) 二环己基羰二亚胺(DCC)。搅拌10分钟后加入I. 084g(2. OmmoDTos · Lys(Z)-OBzl的无水THF溶液。反应混合物用N-甲基吗啉(NMM)调节pH 8-9，(TC搅拌24小时。停止反应，过滤除去沉淀出的二环己基脲(DCU)。滤液减压浓缩，残留物溶于乙酸乙酯中，得到的溶液依次用饱和NaHCO3水溶液、5%KHSO4水溶液和饱和NaCl水溶液洗。乙酸乙酯层用无水NaSO4干燥3小时。滤除NaSO4,滤液减压浓缩除去乙酸乙酯。残留物用柱层析分离(CHCl3 CH3OH, 30 I)，得到I. 216g(94% )目标化合物。ESI-MS (m/z) 648 [M+H] +。2) HCl · Ser (Bzl)-Lys(Z) -OBzl 的制备将O. 648g (I. Ommol) Boc-Ser (Bzl) -Lys (Z) -OBzl 溶解在 IOml 氯化氢-乙酸乙酯(6mol/l)溶液中，室温搅拌2小时，TLC检测原料点消失，减压抽去乙酸乙酯，反复加少量乙醚进行减压抽气以除去产品中的酸气。最后加少量乙醚将产品研磨成固体粉末，直接用于下一步反应。ESI-MS (m/z) 548 [M+H] +。3) Boc-Ile-Gly-OMe 的制备将O. 498g(2. Ommol)Boc-Ile · H2O 溶解在 5mL 无水 THF 中，O °C 下力卩入O. 27g(2. OmmoDHOBt 和 O. 45g(2. 18mmol)DCC。搅拌 10 分钟后加入 O. 251g(2. Ommol)HCl -Gly-OMe的无水THF溶液。反应混合物用NMM调节pH 8_9，0°C搅拌24小时。停止反应，过滤除去沉淀出的DCU。滤液减压浓缩，残留物溶于乙酸乙酯中，得到的溶液依次用饱和NaHCO3水溶液、5% KHSO4水溶液和饱和NaCl水溶液洗。乙酸乙酯层用无水NaSO4干燥3小时。滤除NaSO4，滤液减压浓缩除去乙酸乙酯。残留物用柱层析分离(CHCl3 CH3OH,60 I)。得到 O. 567g(94% )目标化合物。ESI-MS (m/z) 303 [M+H]+。4) HCl · Ile-Gly-OMe 的制备将O. 567g(l. 87mmol)Boc-Ile-Gly-OMe 溶解在 15ml 氯化氢 _ 乙酸乙酯溶液(6mo I/1)中，室温搅拌2小时，TLC检测原料点消失，减压抽去乙酸乙酯，反复加少量乙醚进行减压抽气以除去产品中的酸气。最后加少量乙醚将产品研磨成固体粉末，直接用于下一步反应。ESI-MS (m/z) 203 [M+H]+。5) Boc-Tyr-Ile-Gly-OMe 的制备将O. 525g(l. 87mmol)Boc-Tyr 溶解在 5ml 无水 THF 中，O °C 下加入O. 270g(2. OmmoDHOBt 和 O. 45g(2. 18mmol)DCC。搅拌 10 分钟后，加入 O. 377g(l. 87mmol)HCl · Ile-Gly-OMe的无水THF溶液。反应混合物用NMM调节pH 8-9，(TC搅拌24小时。停止反应，过滤除去沉淀出的DCU。滤液减压浓缩，残留物溶于乙酸乙酯中，得到的溶液依次用饱和NaHCO3水溶液、5 % KHSO4水溶液和饱和NaCl水溶液洗。乙酸乙酯层用无水NaSO4干燥3小时。滤除NaSO4，滤液减压浓缩除去乙酸乙酯。残留物用柱层析分离(CHCl3 CH3OH,60 I)。得到 O. 808g(93% )目标化合物。ESI-MS (m/z) 466 [M+H]+。6)Boc-Tyr-Ile-Gly 的制备将O. 808g(l. 87mmol)Boc-Tyr-Ile-Gly-OMe 溶解在 IOml 甲醇中，(TC下加入 NaOH水溶液(1.5mol/l)，调节pH值到11，搅拌反应O. 5h，TLC检测反应结束。加饱和KHS04调节pH值到6 7，滤除析出的盐，滤液减压蒸馏除去全部甲醇，残留水溶液继续用KHSO4调节PH值到2，用乙酸乙酯萃取三次，乙酸乙酯层合并，用饱和NaCl萃洗三次，无水NaSO4干燥3小时，过滤，滤液减压浓缩除去乙酸乙酯，得到0.834g(99% )目标化合物。ESI-MS(m/ζ)450[Μ-ΗΓ。 7) Boc-Tyr-Ile-Gly-Ser (Bzl) -Lys (Z) -OBzl 的制备将O. 857g(l. 9mmol)Boc-Tyr-Ile-Gly 溶解在 5ml 无水 THF 中，O °C 下加入O.257g(l. 9mmol)H0Bt 和 O. 45g(2. 18mmol)DCC。搅拌 10 分钟后，加入 I. 039g(l. 9mmol)HCl · Ser (Bzl)-Lys(Z) -OBzl的无水THF溶液。反应混本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.具有靶向抗血栓活性的多肽HGSKYIGSK。2.一种制备权利要求I的HGSKYIGSK的方法，包括 (1)采用液相合成方法，通过逐步接肽合成HGSK的保护中间体； (2)脱去HGSK的保护中间体的N端保护基； (3)脱去HGSK的保护中间体的C端保...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，赵明，王超，赵婧华，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：
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