植物硒形态的检测方法技术

技术编号:7837086 阅读:303 留言:0更新日期:2012-10-12 01:11
一种植物硒形态的检测方法,按如下四个步骤进行:一是检测前期的准备,确定检测用的仪器和试剂。二是建立高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱即HPLC-ICP-MS联用技术。三是建立五种硒形态标准溶液的色谱图。四是植物样品的预处理及硒形态的提取与检测,用超纯水洗净待测植物材料,冷冻干燥、粉碎过滤和测得含水量,密封放在4℃保存备用;或立即用酶在37℃条件下超声提取30min,离心后取上清液,按照HPLC-ICP-MS联用技术进行硒形态的检测,以采集图谱中所示样品各硒形态对应峰面积计算植物中硒形态的含量。采用本方法检测植物硒形态,形态分离完全,样品前处理简便快捷,流动相成分单一、配制简单,重复性和精确度良好,定量结果准确可靠。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
硒是人体必需的微量元素,具有防癌抗癌、清除体内自由基和抗衰老等作用。植物是天然有机硒合成的生化工厂,植物有机硒具有较高的生物利用度和生物活性,衡量硒的生物功能水平不仅与总硒量有关,更与硒的化学形态有关,因此检测出硒的不同化学形态有其重要的现实意义。植物作为富硒载体可以将无机硒转化为有机硒,但硒在代谢过程中所需的酶极其复杂,硒的不稳定性等特性又影响着人们对硒形态的进一步认识,目前硒的检测方法研究从痕量检测向硒形态检测的方向发展,因此检测分析方法实用化、仪器简单化、标准化是硒形态研究的一个重要方向。近年来,电喷雾质谱(ES-MS)在分析富硒植物(大蒜、洋葱、坚果)的硒形态检测应用较多,但其灵敏度和精确度不高;随着电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)中碰撞反应池技术的发展,高效液相与电感耦合等离子体质谱HPLC-ICP-MS联用技术以其较高的分离效率和较低的检测限,将成为植物硒形态分析的一种新的技术手段,对此经检索尚未发现有关的资料报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种解决上述技术问题采用的技术方案是本按照如下步骤进行(I)检测前期的准备①本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物硒形态的检测方法,其特征是按照如下步骤进行 (1)检测前期的准备 ①选用的设备美国waters公司1525型高效液相色谱仪HPLC,美国ThermoFisherScientific公司XSeries2电感稱合等离子体质谱仪ICP-MS,离心机,超声波仪,冻干机; ②HPLC与ICP-MS采用0.25mm聚醚醚酮PEEK管连接; ③选用的试剂盐酸为分析纯,柠檬酸为色谱纯,4°C保存的链霉蛋白酶E,以上试剂均采购于上海生物工程有限公司;硒代胱氨酸(SeCys2)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)、亚硒酸钠(Na2SeO3)和硒酸钠(Na2SeO4),以上五个硒标准品的纯度彡98%,均采购于Sigma公司; ④五个硒标准品均用0.lmol/L HCl稀释为IOOii g/L的混标溶液,4°C保存;试验中所有试剂的配制均采用MQ为18. 2超纯水; (2)建立高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱即HPLC-ICP-MS联用技术 ①HPLC的操作参数采用HamiltonPRP-X100、250mmX 4. ImmX 10 y m的阴离子柱为色谱柱,流动相为PH4. 72 5m mo I/L的柠檬酸,进样量为50 u L,流速为I. OmL/min ; ②ICP-MS的...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨萍汤鋆桂仁意程建中吴雅莹
申请(专利权)人:浙江农林大学
类型:发明
国别省市:

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