中药小茴香的新用途制造技术

本发明专利技术涉及一种中药小茴香的新用途。小茴香能促进口服海藻酸钠微球中溶菌酶蛋白的肠道吸收，提高溶菌酶血药浓度，大幅度提高溶菌酶的生物利用度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中药小茴香的新用途，特别是一种中药小茴香作为肠道吸收促进剂在提高ロ服溶菌酶肠道吸收效率中的应用。
技术介绍
溶菌酶(Lysozyme)是ー种蛋白质类的生物酶，具有抗菌、抗病毒、免疫调节以及止血、消肿、加快组织修复等功能，是ー种重要的非特异性免疫因子，在医药领域中有着广泛的应用。现有ロ服溶菌酶药物主要以含片、粉剂和肠溶胶囊为主，其药靶主要为直接作用于胃肠道致病菌，或者是作为体外用药，体内吸收入血的效率非常低，药理用途十分有限。 静脉注射可有效提高溶菌酶的血药浓度，对肺炎、肾炎、膀胱炎、咽喉炎等多种病症的有效率非常高(张华、安米、安献禄，基因重组人溶菌酶针对抗耐药菌在制药中的新用途，专利申请号03110824. 5)，但注射给药方式的主要缺点是病人的顺应性差。ロ服给药作为安全、方便的给药途径历来受到人们的重视。但ロ服蛋白类药物由于稳定性差，经受整个消化系统对其分解和降解，使其体内吸收效率低下，生物利用度极低。为提高蛋白类药物在胃肠道的稳定性，现已发展出多种微球作为蛋白类药物载体，这些载药微球具有良好的负载、保护、控释等作用，其中海藻酸钠微球因其天然高分子多糖的特点，具有良好的生物相容性和可生物降解性，特别适用于蛋白类药物的载药系统。虽然提高了蛋白类药物的稳定性，但仍然不能有效克服肠道的天然屏障作用，蛋白类药物吸收入血的效率非常低，生物利用度通常不会超过1%，海藻酸钠载药微球单独使用仍然缺乏实用价值。提高蛋白类药物的生物利用度，不仅需要保持蛋白类药物的稳定性，也需要增强肠道对蛋白类药物的吸收，这ニ个环节缺ー不可。对于后ー环节，研究中的肠道吸收促进剂包括小分子化合物和聚合物两种，如中链脂肪酸钠盐、胆酸盐类、一氧化氮供体等为小分子类吸收促进剂，而聚合物类吸收促进剂有壳聚糖、交联聚丙烯酸酯等。其中多数肠道吸收促进剂的作用与其细胞毒性高度相关，所以寻找无毒而有效的肠道吸收促进剂是研究人员关注的焦点。中药是我国中医药的宝库，根据中医方剂学的组方理论以及中药材特点，可望从丰富的中草药中筛选获得安全有效的新型肠道吸收促进剂，以此促进海藻酸钠微球中溶菌酶蛋白的肠道吸收，可望提高溶菌酶血药浓度，大幅度提高溶菌酶的生物利用度，切实赋予ロ服溶菌酶药物实际临床应用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种中药小茴香作为肠道吸收促进剂在提高溶菌酶蛋白的肠道吸收率中的应用，以期提高溶菌酶的血药浓度。中药材-小茴香为伞形科植物茴香 (FoenicululnVulgareMill)的干燥成熟果实，味辛，性温，具有散寒止痛、理气和胃的功能。现代药理研究证明，小茵香具有显著的抑菌、调节胃肠机能、利尿等作用，同时还具有利胆、保肝、促肾、抗癌、抗突变、抗氧化、清除活性氧或自由基等作用。小茴香肠道吸收促进剂汤剂的制备 中药小茴香按常规方法煎制得O. l-l.og/ml (干重/药液)的汤剂，灌胃剂量为O. 1-1. Oml汤剤/只小鼠。溶菌酶海藻酸钠微球的制备按文献參考采用W/0乳化-离子交联法制备。制备主要參数为海藻酸钠浓度1-6% (W/V)，溶菌酶浓度O. 1-2. 0%(W/V)，果糖浓度1-3% (W/V)。 制备所得载药微球具有良好的分散性和稳定性，其平均粒径为1-20 μ m,包封率为50-80%，载药量为5-15%，酶活为初始溶菌酶活性的70%以上。灌胃剂量为10-20mg /只小鼠。实验结果小茴香汤剂和海藻酸钠微球同时灌胃小鼠，I次/天。定时測定溶菌酶血药浓度并计算生物利用度。结果表明，对照组小鼠仅ロ服溶菌酶及中药或溶菌酶海藻酸钠微球，生物利用度为1%左右；同时ロ服中药和载药微球4天，血药浓度可提高6. 2倍，生物利用度可达8%。小茴香能促进ロ服海藻酸钠微球中溶菌酶蛋白的肠道吸收，提高溶菌酶血药浓度，大幅度提高溶菌酶的生物利用度。附图说明图I为血药溶菌酶间接竞争ELISA法测定标准曲线。图2为溶菌酶的血药浓度(4天灌胃)。具体实施例方式下面通过具体的实施例进ー步说明本专利技术是如何实现的 实施例I :小茴香肠道吸收促进剂汤剂的制备中药小茴香按常规方法煎制得O. 3g/ml (干重/药液)的汤剂，灌胃剂量为O. 5ml汤剂/只小鼠。实施例2 :溶菌酶海藻酸钠微球的制备按文献參考采用W/0乳化-离子交联法制备。制备主要參数为海藻酸钠浓度5% (W/V)，溶菌酶浓度1% (W/V)，果糖浓度2% (W/V)。载药微球的性能圆球形，表面光滑圆整，粘连少，不破损，具有良好的分散性和稳定性，平均粒径为(9. 45±3. I) μ m，包封率57. 6%，载药量为7. 2%，酶活为初始溶菌酶活性的76. 1%。实施例3 : ロ服方式及剂量小茴香汤剂和载药海藻酸钠微球同时灌胃小鼠，I次/天，小茴香汤剂剂量为0.5ml /只小鼠。载药海藻酸钠微球剂量为14mg /只小鼠。实施例4 :溶菌酶的血药浓度的測定采用常规间接竞争ELISA法定量測定。①包被0. 5 μ g/ml的溶菌酶包被酶标板，每孔加入100 μ 1，置4°C冰箱过夜。②封闭每孔加入300 μ I封闭液，37°C温育2小吋。③竞争每孔加入不同浓度的溶菌酶标准液50 μ I和溶菌酶抗血清溶液50 μ 1，充分混合后37°C温育I小吋。④ニ抗每孔加入HRP-羊抗兔IgGlOOy 1，37°C温育I小时。⑤显色每孔加入底物显色液100 μ 1，37°C温育20min。⑥终止每孔加入50 μ I终止液。⑦检测使用酶标仪在490nm处检测其吸光度。间接竞争ELISA法的线性范围为O. I μ g/m广30 μ g/ml之间，回归方程为y =-O. 0702x + O. 716，线性相关度为O. 99，标准曲线參见图I。实施例5 :小茴香对载药海藻酸钠微球中溶菌酶蛋白的肠道吸收促进作用实验组小鼠同时ロ服小茴香汤剂(O. 5ml /只小鼠)和载药海藻酸钠微球(14mg /只小鼠);微球对照组仅ロ服载药海藻酸钠微球(14mg /只小鼠);实验对照组仅ロ服小茴香汤剂(0.5ml /只小鼠)和溶菌酶(O. 8mg/只小鼠)。连续ロ服4天后測定溶菌酶血药浓度(图2)。连续ロ服4天后实验组的溶菌酶血药浓度为(16. 03±2. 83) μ g/ml，是实验对照组的6. 2倍。按小鼠总血量5ml计，经肠道吸收的溶菌酶总量为80. 15 μ g，生物利用度达8. 02%,较实验对照组仅为1%左右的生物利用度，有了明显的提高。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种中药小茴香作为肠道吸收促进剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈宇光，何佳，郭敏，苏洁，戴小峰，
申请(专利权)人：上海大学，
类型：发明
国别省市：