药用植物玛咖离体快速繁育的方法技术

本发明专利技术公开了一种药用植物玛咖离体快速繁育的方法，主要通过培养基的配制、无菌苗制备、芽簇诱导和生根培养过程实现的。本发明专利技术以实生苗的带芽茎段作为培养材料，具有变异率低、遗传稳定等特点，并且增殖倍数最高可达10倍以上，且幼苗生长旺盛，能够保持原来株系性状。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
玛咖(L印idium meyenii )为十字花科独行菜属一年或两年生草本植物，原产于南美洲，生长在海拔3500 5000m秘鲁安第斯山区，其肉质根可药食兼用，具有很高的营养价值和药用价值。研究发现，玛咖中富含大量人体必需的氨基酸、多种不饱和脂肪酸、维生素和矿物质，主要化学成分是玛卡烯、玛卡酰胺、硫配糖体等，具有增强人体免疫力，快速恢复体力，消除焦虑、疲劳等功效。目前，玛咖开发的各类保健品畅销国内外。我国在新疆、云南等地已成功引种，受其生物学特性和繁衍材料的限制，玛咖种植中，由于繁育瓶颈问题，难以实现产业化，不能满足市场需要。因此，一种离体快速繁殖玛咖的方法就被提出。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用玛咖无菌苗为培养材料，进而离体快速繁育药用植物玛咖的方法。本专利技术的目的主要通过培养基的配制、无菌苗制备、芽簇诱导和生根培养过程实现的，其特征在于所述培养基的配制为a.基本MS培养基取MS培养基，添加蔗糖20 40mg/L和琼脂5 10g/L，同时调节 pH=6 6. 4 ；b.1/2MS培养基取1/2MS培养基(1/2大量元素浓度的MS培养基)，添加蔗糖20 40mg/L和琼脂5 10g/L,同时调节pH=6 6. 4。所述无菌苗制备为取饱满的玛咖种子，用水冲洗干净，在超净工作台中经65 80%酒精浸泡0. 5 1. 5min,再转入0. 5 1. 5%的升汞中浸泡消毒8 12min，用无菌水冲洗3-5遍，浙干水，接种在上述V2MS培养基中，在18 25°C下，10 14h光照培养/10 14h黑暗培养10 20天，待实生苗2片子叶展开，真叶未展出，即得无菌苗。所述芽簇诱导为在基本MS培养基按以下比例加入NAA(萘乙酸)0. 25 0. 5mg/ L，6-BA(6-苄基腺嘌呤)1. 0 4. Omg/L作为芽簇诱导培养基作为生根培养基，将上述无菌苗去除子叶及根，剩余部分即带芽茎段(苗高1. 5 2. Ocm)作为培养组织接种到芽簇诱导培养基中，接种时将茎段下端扦插入培养基，深度为0. 5-0. 8cm，芽端外露，置于20 25°C 培养箱中培养21 观天。所述生根培养为在1/2MS培养基中加入ΝΑΑ0. 3 2. 0 mg/L,或者在1/2MS培养基中加入IBA (吲哚丁酸)0. 5 2.0 mg/L作为生根培养基，将诱导出的再生芽簇切分成单株，接种到生根培养基中进行生根培养15-25天；接种时将切分的单株的基部植入培养基，深度 0. 3-0. 5cm。上述的生根培养最好为按14 1 光照培养/6 IOh暗培养交替下进行，光照培养时强度在1800 2200Lx。所述生根培养中，在V2MS培养基中加入的NAA最好为0. 5 1. 0 mg/L，在1/2MS 培养基中加入的IBA最好为0. 8 1. 5 mg/L。本专利技术以实生苗的带芽茎段作为培养材料，具有变异率低、遗传稳定等特点，并且增殖倍数最高可达10倍以上，且幼苗生长旺盛，能够保持原来株系性状。具体实施例方式实施例1 取MS培养基，按每L添加蔗糖20mg和琼脂10g，同时调节pH=6，作为基本MS培养基，取V2MS培养基，按每L添加蔗糖20mg和琼脂10g，同时调节pH=6，作为 1/2MS培养基；取饱满的玛咖种子，用水冲洗干净，在超净工作台中经70%酒精浸泡lmin， 再转入1. 0%的升汞中浸泡消毒lOmin，用无菌水冲洗3遍，浙干水至无滴现象，接种在上述 1/2MS培养基中，在20°C下，12h光照培养/1 黑暗培养14天，光照培养时强度在2000Lx， 实生苗2片子叶展开，真叶未展出，得无菌苗；在基本MS培养基按每L加入NAA 0. 25mg, 6-BA 1. Omg，在超净工作台中，剪去2片真叶及幼根，将剩余部分(约1. 5-2. Ocm的带芽茎段)接种到芽簇诱导培养基中，接种时将茎段下端扦插入培养基，深度为0. 5-0. 8cm，芽端外露，置于20°C培养箱中培养21天，其中前7天为暗培养，其后在1 光照培养/9h暗培养交替进行培养14天，光照培养时强度在2000LX，即再生出芽簇；在1/2MS培养基中按每L加入 NAAO. 5mg作为生根培养基，将诱导出的再生芽簇切分成单株，接种到生根培养基中进行生根培养15天；按1 光照培养/ 暗培养交替下进行，光照培养时强度在2000LX，接种时将切分的单株的基部植入培养基，深度0. 3-0. 5cm。实施例2 取MS培养基，按每L添加蔗糖30mg和琼脂5g，同时调节pH=6. 2，作为基本MS培养基，取V2MS培养基，按每L添加蔗糖30mg和琼脂5g，同时调节pH=6. 2，作为 1/2MS培养基；取饱满的玛咖种子，用水冲洗干净，在超净工作台中经80%酒精浸泡0. 5min, 再转入1. 5%的升汞中浸泡消毒12min，用无菌水冲洗5遍，浙干水至无滴水，接种在上述 1/2MS培养基中，在22°C下，14h光照培养/IOh黑暗培养20天，光照培养时强度在1900Lx， 待实生苗2片子叶展开，真叶未展出，即得无菌苗；在基本MS培养基按每L加入NAAO. 5mg, 6-BA 1. Omg，在超净工作台中，剪去2片真叶及幼根，将剩余部分(约1. 5-2. Ocm的带芽茎段)接种到芽簇诱导培养基中，接种时将茎段下端扦插入培养基，深度为0. 5-0. 8cm，芽端外露，置于22°C培养箱中培养M天，其中前10天为暗培养，其后在14h光照培养/IOh暗培养交替进行培养14天，即再生出芽簇；在1/2MS培养基中按每L加入NAA1. 0 mg作为生根培养基，将诱导出的再生芽簇切分成单株，接种到生根培养基中进行生根培养21天，并且按 1 光照培养/ 暗培养交替下进行，光照培养时强度在1800LX，接种时将切分的单株的基部植入培养基，深度0. 3-0. 5cm。实施例3 取MS培养基，按每L添加蔗糖40mg和琼脂8g，同时调节pH=6. 4，作为基本MS培养基，取V2MS培养基，按每L添加蔗糖40mg和琼脂8g，同时调节pH=6. 4，作为 1/2MS培养基，取饱满的玛咖种子，用水冲洗干净，在超净工作台中经75%酒精浸泡lmin， 再转入1%的升汞中浸泡消毒8min，用无菌水冲洗4遍，浙至无滴水，接种在上述1/2MS培养基中，在下，IOh光照培养/14h黑暗培养20天，光照培养时强度在2000Lx，实生苗 2片子叶展开，真叶未展出，即得无菌苗；在基本MS培养基按每L加入NAA 0. 35mg, 6_BA 3. Omg，在超净工作台中，剪去2片真叶及幼根，将剩余部分(约1. 5-2. Ocm的带芽茎段)接种到芽簇诱导培养基中，接种时将茎段下端扦插入培养基，深度为0. 5-0. 8cm，芽端外露，置于22°C培养箱中培养观天，其中诱导前8天为暗培养，其后20天在14h光照培养IOh暗培养交替进行培养，光照培养时强度在1900LX，即再生出芽簇；在1/2MS培养基中按每L加入NAA1. 8mg作为生根培养基，将诱导出的再生芽簇切分成单株，接种到生根培养基中进行生根培养18天，并且按Hh光照培养Ah暗培养交替下进行，光照培养时强度在1900LX，接种时将切分的单株的基部植本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：朱军，李晓瑾，朱胜龙，贾晓光，王果平，阿依别克·热合木都拉，樊丛照，
申请(专利权)人：新疆维吾尔自治区中药民族药研究所，
类型：发明
国别省市：