本发明专利技术涉及一种灵芝异黑色素的提取与制备方法，从灵芝中提取异黑色素，异黑色素的形状为黑色粉末状，元素组成为C54.4%、H4.2%、N2.9%、S1.9%，为邻苯二酚型植物源异黑色素。灵芝异黑色素是多酚物质在多酚氧化酶和酚羟基酶的作用下转化为羟基醌，进而聚合形成邻苯二酚型植物源异黑色素。其制备方法包括：将灵芝用乙醇脱脂，得脱脂干品；将脱脂干品用酸溶液提取，过滤弃去酸提液，取酸提后滤渣；再用碱溶液提取、过滤，得到碱提液；将碱提液微滤除不溶物，纳滤脱盐，干燥得异黑色素粗提物；然后置于酸溶液中水解，分离得到异黑色素。本发明专利技术的方法简单易行，适合工业化生产，且无环境污染，制取的成品异黑色素可用于治疗或预防糖尿病，从而带来良好的经济效益。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药品或保健品领域，涉及异黑色素的生产
，具体涉及从灵芝中提取异黑色素的提取方法，以及从灵芝中提取异黑色素的制备方法及灵芝异黑色素的用途。
技术介绍
灵芝为担子菌纲灵芝，属真菌，自古就有“仙草”、“瑞草”之称，是中医扶正固本、滋补强壮的珍贵中药，在我国有着悠久的药用历史，药用价值极高，被视为珍贵的中药材，是中医药宝库中的珍品。东汉《神农本草经》将灵芝列为上品，认为能“益心气”、“安精魂”、 “补肝益气”、“坚筋骨”。《本草纲目》认为灵芝有“滋补强壮”、“延年益寿”、“利关节”、“治耳聋”等功效。现代医学证明灵芝含有多种生理活性物质，能够调节和增强人体免疫力。黑色素(Melanin)是生物的保护性色素，广泛存在于动物、植物和微生物中，是一类结构复杂多样的酚类或吲哚类生物大分子色素的总称。按黑色素的结构组成，可分为三种型式，即真黑色素(eumelanin)、棕黑色素(phaeomelanin)和异黑色素(allpmelanin)。 真黑色素颜色为深棕色或黑色，由酪氨酸经多巴(Dopa)途径转化而生成，这种黑色素主要分布于动物表皮和毛发细胞中，以及内脏膜或组织中，可称为动物型黑色素。棕黑色素是真黑色素的胱氨酸衍生物，含硫原子，颜色为略带红色的棕色或黄色，常见于动物的毛发中。 异黑色素主要分布于植物中，属植物型黑色素，类似于真黑色素，为棕色或黑色，它主要是由儿茶酚等二元酚、三元酚经由多聚羟基萘途径生成的。黑色素可为生物体提供结构性强度或保护生物免受紫外线、电离辐射、重金属污染、低温和高温等环境胁迫的伤害。黑色素不仅是一种光保护剂、抗辐射剂、螯合剂、生物抗氧化剂和免疫促进剂，而且是一类生物半导体材料和广电传递材料。近年来的研究还发现， 黑色素具有抗蛇毒、抑制艾滋病病毒复制、治疗帕金森症等作用。由此可见，黑色素在医药、 化妆品、食品、电子等方面有着广泛的应用前景。黑色素的制备方法很多，可以通过化学方法合成黑色素，如专利申请号为 96117642. 3、名称为《食用合成黑色素的制造方法》的中国专利文献，公开了一种食用合成黑色素的制造方法，它以食用合成色素单色亮兰、柠檬黄或/和日落黄、胭脂红或/和苋菜红组成，以染料含量100%计，各原料配比为单色亮兰17% 37%、柠檬黄或/和日落黄 25%飞0%、胭脂红或/和苋菜红20% 43%，然后加入上述原料总质量广5倍的水搅拌混合均勻，再经干燥可制得膏状、粒状或粉状产品。由该方法制成的黑色素具有耐光性强、热稳定性好的特点，但长期食用以化学原料合成的黑色素对身体会有一定的影响。此外，黑色素也可以从动物毛发、植物等材料中提取，如专利申请号为 200710017344. 3、名称为《一种从杏仁皮中提取和纯化黑色素的方法》的中国专利文献，公开了一种从杏仁皮中提取和纯化异黑色素的方法，该方法以杏仁皮为原料，采用碱性水溶液提取，酸水解杂质，反复有机溶剂洗涤和反复碱溶解后酸化使之沉淀进行纯化，冻结-解冻后去离子水反复洗涤除去Cl—1，最后真空干燥得到杏仁皮异黑色素成品。由该方法制备的异黑色素，溶于碱性水溶液，不溶于水和常见的有机溶剂，氧化程度低，纯度较高。在众多制备黑色素的方法中，从植物中提取的异黑色素以安全性高、应用范围广等特点备受消费者青睐。糖尿病(diabetes mellitus)是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合症，因胰岛素分泌绝对或相对不足以及靶组织细胞对胰岛素敏感性降低，引起糖、蛋白、 脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱。临床以高血糖为主要共同标志，久病可引起多个系统损害，病情严重和应激时可发生急性代谢紊乱如酮症酸中毒等。在糖尿病人中发生冠心病、 缺铁性或出血性脑血管病、失明、肢端坏疽等严重并发症均明显高于非糖尿病人群。因此， 糖尿病及其并发症已成为严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题。目前还没有关于异黑色素治疗糖尿病的报导，也未见到从灵芝中提取异黑色素用于治疗糖尿病的相关报导。有鉴于此，本
的技术人员有必要研发一种从灵芝中提取异黑色素的提取方法，一种从灵芝中提取异黑色素的制备方法，以及此种灵芝异黑色素的用途。
技术实现思路
本专利技术的一个目的在于提供一种从灵芝中提取异黑色素的提取方法，能从灵芝中有选择地提取异黑色素，解决了至今未见有从灵芝中提取异黑色素的问题。本专利技术的第二个目的在于提供一种从灵芝中提取异黑色素的制备方法，通过一系列的制备步骤得到成品异黑色素，解决了至今未能从灵芝中提取异黑色素制备成品的问题。本专利技术的第三个目的在于提供该种灵芝异黑色素作为活性成分在制备药物中的应用，解决了从灵芝中提取异黑色素用于治疗糖尿病或与糖尿病有关的疾病等问题。本专利技术的技术解决方案如下一种灵芝异黑色素的提取方法，从灵芝中提取异黑色素，异黑色素的形状为黑色粉末状，元素组成为C54. 4%、H4. 2%、N2. 9%、Si. 9%，为邻苯二酚型植物源异黑色素；所述灵芝异黑色素是多酚物质在多酚氧化酶和酚羟基酶的作用下转化为羟基醌，进而聚合形成邻苯二酚型植物源异黑色素；所述灵芝异黑色素的紫外光谱(UV):用0. OlM NaOH溶解，20(T800nm全波段扫描，灵芝异黑色素在紫外波长下的最大吸收峰在221nm处，并随波长增加，其吸收值下降；所述灵芝异黑色素的红外光谱(IR)用KBr压片40(T4000 cm—1扫描，具有经典的异黑色素红外吸收特征，其中3450 cnT1附近的吸收峰是由-O-H的伸缩振动产生的，1710 cnT1处的弱吸收峰是羰基伸缩振动引起的，1620 cm-1强吸收峰是芳环骨架、酰胺I键振动产生的， 1510 cm—1附近弱吸收峰为酰胺II键的振动峰，在86(T650 cm—1范围内的吸收带很弱，表明芳环被取代，形成了共轭体系；所述灵芝异黑色素的氢核磁共振(1H NMR):在以δ 0. 95 ppm为中心的吸收峰是脂肪烃末端甲基的质子吸收峰；在以δ 1.4 ppm为中心的吸收峰是直链或支链烷烃基团中的亚甲基峰；在以δ 2.0 ppm为中心和δ 2.6 ppm为中心的两组峰是烷氢受弱吸电子基团作用产生位移的峰；在δ 3.3-3.8 ppm区域内的组峰，应是与电负性较强的基团相连的氢；在δ 4. 0-5. 0 ppm区域无吸收峰，说明分子中不存在>C=CH2结构；在δ 6. 0-8. 1 ppm5区域内的宽峰，归结于芳氢的吸收峰。一种灵芝异黑色素的制备方法，灵芝异黑色素由以下步骤制得(1)将灵芝用乙醇脱脂，得脱脂干品；(2)将脱脂干品用酸溶液提取，然后过滤弃去酸提液，取酸提后滤渣；(3)将酸提后滤渣用碱溶液提取、过滤，得到碱提液；(4)将碱提液微滤除不溶物，纳滤脱盐，然后干燥得异黑色素粗提物，异黑色素粗提物可另外用于药效学的试验；(5)将异黑色素粗提物置于酸溶液中水解，分离得到异黑色素；(6)将异黑色素依次用乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯洗涤，每种溶剂反复洗涤至离心后上清液无色为止；(7)将有机溶剂洗涤后异黑色素用碱溶液溶解，得到异黑色素溶液，加入酸溶液静置沉淀，并反复碱溶酸沉至酸化后离心至上清液无色，沉淀后的溶液再经分离得到异黑色素沉淀；(8)将异黑色素沉淀用水清洗，至Cl—1定性检测为阴性为止，干燥后得到成品灵芝异黑所述步骤(1)中使本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种灵芝异黑色素的提取方法，其特征在于从灵芝中提取异黑色素，异黑色素的形状为黑色粉末状，元素组成为C54. 4%、H4. 2%、N2. 9%、Si. 9%，为邻苯二酚型植物源异黑色素；所述灵芝异黑色素是多酚物质在多酚氧化酶和酚羟基酶的作用下转化为羟基醌，进而聚合形成邻苯二酚型植物源异黑色素；所述灵芝异黑色素的紫外光谱(UV):用0. OlM NaOH溶解，20(T800nm全波段扫描，灵芝异黑色素在紫外波长下的最大吸收峰在221nm处，并随波长增加，其吸收值下降；所述灵芝异黑色素的红外光谱(IR):用KBr压片40(T4000 cm—1扫描，具有经典的异黑色素红外吸收特征，其中3450 cnT1附近的吸收峰是由-O-H的伸缩振动产生的，1710 cnT1处的弱吸收峰是羰基伸缩振动引起的，1620 cm-1强吸收峰是芳环骨架、酰胺I键振动产生的， 1510 cm—1附近弱吸收峰为酰胺II键的振动峰，在86(T650 cm—1范围内的吸收带很弱，表明芳环被取代，形成了共轭体系；所述灵芝异黑色素的氢核磁共振(1H NMR):在以δ 0. 95 ppm为中心的吸收峰是脂肪烃末端甲基的质子吸收峰；在以δ 1.4 ppm为中心的吸收峰是直链或支链烷烃基团中的亚甲基峰；在以δ 2.0 ppm为中心和δ 2.6 ppm为中心的两组峰是烷氢受弱吸电子基团作用产生位移的峰；在δ 3.3-3.8 ppm区域内的组峰，应是与电负性较强的基团相连的氢；在δ 4. 0-5. 0 ppm区域无吸收峰，说明分子中不存在>C=CH2结构；在δ 6. 0-8. 1 ppm 区域内的宽峰，归结于芳氢的吸收峰。2.一种灵芝异黑色素的制备方法，其特征在于，灵芝异黑色素由以下步骤制得(1)将灵芝用乙醇脱脂，得脱脂干品；(2)将脱脂干品用酸溶液提取，然后过滤弃去酸提液，取酸提后滤渣；(3)将酸提后滤渣用碱溶液提取、过滤，得到碱提液；(4)将碱提液微滤除不溶物，纳滤脱盐，然后干燥得异黑色素粗提物，异黑色素粗提物可另外用于药效学的试验；(5)将异黑色素粗提物置于酸溶液中水解，分离得到异黑色素；(6)将异黑色素依次用乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯洗涤，每种溶剂反复洗涤至离心后上清液无色为止；(7)将有机溶剂洗涤后异黑色素用碱溶液溶解，得到异黑色素溶液，加入酸溶液静置沉淀，并反复碱溶酸沉至酸化后离心至上清液无色，沉淀后的溶液再经分离得到异黑色素沉淀；(8)将异黑色素沉淀用水清洗，至Cl—1定性检测为阴性为止，干燥后得到成品灵芝异黑^J. ο3.根据权利要求2所述的灵芝异黑色素的制备方法，其特征在于所述步骤(1...
【专利技术属性】
技术研发人员：曹洪庆，
申请(专利权)人：曹洪庆，
类型：发明
国别省市：
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