【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般地涉及分子生物学领域,涉及通过调节植物中编码BETl样多肽的核酸的表达来增强产量相关性状的方法。本专利技术还涉及具有经调节的BETl样多肽编码核酸表达的植物,所述植物相对于相应的野生型植物或其他对照植物具有增强的产量相关性状。本专利技术还提供了可以用于实施本专利技术方法的构建体。本专利技术一般地涉及分子生物学领域,涉及通过调节植物中编码CRT(钙网蛋白)的核酸的表达来改善多种植物生长特征的方法。本专利技术还涉及具有经调节的钙网蛋白编码核酸表达的植物,所述植物相对于相应的野生型植物或其他对照植物具有改善的生长特征。 本专利技术还提供了迄今未知的钙网蛋白核酸、多肽和可以用于本专利技术方法的构建体。本专利技术一般地涉及分子生物学领域,涉及通过增加植物中编码tRNA 二氢尿苷合酶1样(DUSlL)多肽的核酸序列的表达来增强多种植物产量相关性状的方法。本专利技术还涉及具有增加的DUSlL多肽编码核酸序列表达的植物,所述植物相对于对照植物具有增强的产量相关性状。本专利技术此外还涉及核酸序列、包含所述核酸序列的核酸构建体、载体和植物。本专利技术一般地涉及分子生物学领域,涉及通过调节植物中编码ES43样多肽的核酸的表达来增强产量相关性状的方法。本专利技术还涉及具有经调节的ES43样多肽编码核酸表达的植物,所述植物相对于对应的野生型植物或其他对照植物具有改善的生长特征。本专利技术还提供供迄今未知的ES43样核酸和多肽和可以用于本专利技术方法的构建体。本专利技术一般地涉及分子生物学领域,涉及用于增强植物中多种经济学重要的产量相关性状的方法。更具体地,本专利 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.02.25 EP 09100147.9;2009.02.25 EP 09100151.1;1.相对于对照植物增强植物的产量相关性状的方法,其包括在植物中调节编码钙网蛋白多肽的核酸的表达。2.权利要求1的方法,其中所述钙网蛋白多肽包含一个或多个下列基序⑴基序 3 :PXXIXDPXXKKPEXWDD (SEQ ID NO :246),(ii)基序4 :GXWXXXXIXNPXYK(SEQ ID NO :247),(iii)基序5 :E[VL]WQVK(SEQ ID NO :248),(iv)基6:TLV[FL]QFSVKHEQKLDCGGGY[MV]KLLSGDV DQKKFGG[DE]TPYSIMF GPDICGY (SEQ ID NO :249),其代表CRT1/2组的典型CRT植物多肽;(ν)基序 7 =TPYS [LF] MFGPD [ IL] CGTQTKKLH [VL] ILSYQGQNYPIKKDL [QE] CETDKL TH [FV] YTFI (SEQ ID NO :250),其代表CRT3组的典型CRT植物多肽;(vi)基!Ψ8 :N[HY][LP]IKK[DE][VL]PCETD[QK]LTH[VF]YTFI[Li]RPDA[TS] YSILIDN[VR]E[KR] [QE] [TS]GS [LM] Y[TS]DffD[IL]L(SEQID NO :251),其代表植物界的典型 CRT多肽;(vii)基序9:QKKFG⑶TPYSIMFGPDICGY[S ]TKK[VL]H[AV]I(SEQID N0:252),其代表真核生物来源的典型CRT多肽,(viii)与基序(i)至(vii)的任一个具有至少50%、51%、52%、53%、讨%、55%、 56%,57%,58%,59%,60%,61 %,62%,63%,64%,65%,66%,67%,68%,69%,70%, 71 72%,73%,74%,75%,76%,77%,78%,79%,80%,81 82%,83%,84%,85%, 86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或 99% 的全序列同一性的基序;其中“X”表示任何氨基酸并且其中括号“[]”之间指示的氨基酸表示在该位置上的可选氨基酸。3.权利要求1或2的方法,其中所述经调节的表达通过在植物中引入和表达编码钙网蛋白多肽的核酸来实现。4.权利要求1至3的任一项的方法,其中所述编码钙网蛋白多肽的核酸编码表A2中所列的任一蛋白质、或为这样的核酸的部分、或为能够与这样的核酸杂交的核酸。5.权利要求1至4的任一项的方法,其中所述核酸序列编码表A2所给出的任何蛋白质的直向同源物或旁系同源物。6.任何前述权利要求的方法,其中所述增强的产量相关性状包括相对于对照植物增加的产量、增加的种子产量。7.权利要求1至6的任一项的方法,其中在非胁迫条件下获得所述增强的产量相关性状。8.权利要求1至6的任一项的方法,其中在干旱胁迫、盐胁迫或氮缺乏条件下获得所述增强的产量相关性状。9.权利要求3至8的任一的方法,其中所述核酸有效地连接至组成型启动子,优选连接至G0S2启动子,最优选连接至来自稻的G0S2启动子。10.权利要求1至9的任一项的方法,其中所述编码钙网蛋白多肽的核酸是植物来源的,优选来自双子叶植物,更优选来自茄科,更优选来自茄属,最优选来自番茄。11.可通过权利要求1至10的任一项的方法获得的植物或其部分,包括种子,其中所述植物或其部分包含编码钙网蛋白多肽的重组核酸。12.构建体,其包含(i)编码如权利要求1或2中定义的钙网蛋白多肽的核酸;( )能够驱动(a)的核酸序列表达的一个或多个控制序列;和任选地(iii)转录终止序列。13.权利要求12的构建体,其中所述控制序列之一是组成型启动子,优选G0S2启动子, 最优选来自稻的G0S2启动子。14.权利要求12或13的构建体在用于制备相对于对照植物具有增加的产量,特别是增加的种子产量的植物的方法中的用途。15.利用权利要求12或13的构建体转化的植物、植物部分或植物细胞。16.用于产生相对于对照植物具有增加的产量,优选增加的种子产量的转基因植物的方法,其包括(i)向植物中引入和表达编码如权利要求1或2中定义的钙网蛋白多肽的核酸;和( )促进植物生长和发育的条件下培养所述植物细胞。17.相对于对照植物具有增加的产量,特别是增加的种子产量的转基因植物,或源自所述转基因植物的转基因植物细胞,所述增加的产量因编码权利要求1或2中定义的钙网蛋白多肽的核酸的被调节的表达而产生。18.权利要求11、15或17的转基因植物或源自其的转基因植物细胞,其中所述植物是作物植物例如甜菜、或单子叶植物或谷类植物例如稻、玉米、小麦、甘蔗、大麦、粟、黑麦 (rye)、黑小麦、高粱、二粒小麦、斯佩耳特小麦、黑麦(secale)、单粒小麦、埃塞俄比亚画眉草、买罗高梁和燕麦。19.权利要求18的植物的可收获部分,其中所述可收获部分优选是枝条生物质和/或种子。20.从权利要求18的植物和/或从权利要求19的植物的可收获部分得到的产品。21.编码钙网蛋白多肽的核酸在相对于对照植物增加植物的产量,特别是在增加种子产量和/或枝条生物量中的用途。22.分离的钙网蛋白核酸分子,其选自(i)SEQID NO :116、130、140、198 和 2 的任一个所示的核酸;(ii)SEQID NO :116、130、140、198和228的任一个所示的核酸的互补序列;(iii)编码SEQID NO 117、131、141、199和229的任一个所示的多肽的核酸,优选地作为遗传密码简并性的结果,所述分离的核酸可从SEQID NO 117、131、141、199和2 的任一个所示的多肽序列推导而来,并且还优选地,赋予相对于对照植物增强的产量相关性状;(iv)核酸,其按照递增的优选次序与表A2的任何核酸序列具有至少30^^31^^32%, 33%,34%,35%,36%,37%,38%,39%,40%,41 %,42%,43%,44%,45%,46%,47%, 48%,49%,50%,51 %,52%,53%,54%,55%,56%,57%,58%,59%,60%,61 63%,64%,65%,66%,67%,68%,69%,70%,71 %,72%,73%,74%,75%,76%,77%, 78%,79%,80%,81 %,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91 93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的序列同一性,并且还优选地,赋予相对于对照植物增强的产量相关性状;(ν)与(i)至(iv)的核酸分子在严格杂交条件下杂交并且优选地赋予相对于对照植物增强的产量相关性状的核酸分子;(Vi)编码钙网蛋白多肽的核酸,所述多肽按照递增的优选次序与SEQID NO :117,131, 141,199和229的任一个所示的氨基酸序列以及表A2中任何其他氨基酸序列具有至少 50%,51 %,52%,53%,54%,55%,56%,57%,58%,59%,60%,61 %,62%,63%,64%, 65%,66%,67%,68%,69%,70%,71 %,72%,73%,74%,75%,76%,77%,78%,79%, 80%,81 %,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91 %,92%,93%,94%, 95 %、96 %、97 %、98 %、或99 %的序列同一性,并且优选赋予相对于对照植物增强的产量相关性状。23.分离的钙网蛋白多肽,其选自(i)SEQID NO 117、131、141、199和229的任一个所示的氨基酸序列;(ii)氨基酸序列,其按照递增的优选次序与SEQID N0:117、131、141、199和229的任一个所示的氨基酸序列以及表A2中任何其他氨基酸序列具有至少50 %、51 %、52 %、53 %、 54%,55%,56%,57%,58%,59%,60%,61 %,62%,63%,64%,65%,66%,67%,68%, 69%,70%,71 %,72%,73%,74%,75%,76%,77%,78%,79%,80%,81 %,82%,83%, 84%、855%、86%、87%、88%、89%、0%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或 99%的序列同一性,并且优选赋予相对于对照植物增强的产量相关性状。(iii)上述(i)或(ii)所给出的任何氨基酸序列的衍生物。24.相对于对照植物增强植物的产量相关性状的方法,其包括在植物中调节编码BETl 样多肽的核酸的表达,其中所述BETl样多肽包含CC结构域,所述CC结构域为⑴如SEQ. ID NO 97所示的;禾口 /或(ii)优选与由SEQ ID NO 98所示的CC结构域具有至少50%、51 %、52%、53%、54%、 55%,56%,57%,58%,59%,60%,61 %,62%,63%,64%,65%,66%,67%,68%,69%,85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或 99% 的序列同一性。25.权利要求M的方法,其中所述CC结构域包含下列基序的一个或多个⑴基序 1 :G (ff/Y) CD (E/K) (SEQ ID NO :99);(ii)基序 2 :EGF(SEQ ID NO :100)。26.权利要求对或25的方法,其中所述调节的表达通过向植物中引入和表达编码 BETl样多肽的核酸来实现。27.权利要求对至沈的任一项的方法,其中所述编码BETl-样多肽的核酸编码表Al 所列的任一蛋白质,或是这样的核酸的部分或能够与这样的核酸杂交的核酸。28.权利要求M至27的任一项的方法,其中所述核酸序列编码表Al中所给出的任何蛋白质的直向同源物或旁系同源物。29.权利要求对至观的任一项的方法,其中所述增强的产量相关性状包括相对于对照植物增加的产量,例如增加的生物量和/或增加的种子产量。30.权利要求对至四的任一项的方法,其中在非胁迫条件下获得所述增强的产量相关性状。31.权利要求对至四的任一项的方法,其中在干旱胁迫和/或氮缺乏条件下获得所述增强的产量相关性状。32.权利要求沈至31的任一项的方法,其中所述核酸有效地连接至组成型启动子,优选连接至G0S2启动子,最优选连接至来自稻的G0S2启动子。33.权利要求M至32的任一项的方法,其中所述编码BETl样多肽的核酸是植物来源的,优选来自双子叶植物,更优选来自禾本科,更优选来自玉蜀黍属,最优选来自玉蜀黍。34.可通过权利要求M至33的任一项的方法获得的植物或其部分,包括种子,其中所述植物或其部分包含编码BETl样多肽的重组核酸。35.构建体,其包含(a)编码如权利要求1或2中定义的BETl样多肽的核酸;(b)能够驱动(a)的核酸序列表达的一个或多个控制序列;和任选地(c)转录终止序列。36.权利要求35的构建体,其中所述控制序列之一是组成型启动子,优选G0S2启动子, 最优选来自稻的G0S2启动子。37.权利要求35或36的构建体在用于制备相对于对照植物具有增加的产量,特别是增加的生物量和/或增加的种子产量的植物的方法中的用途。38.利用权利要求35或36的构建体转化的植物、植物部分或植物细胞。39.用于产生相对于对照植物具有增加的产量,特别是增加的生物量和/或增加的种子产量的转基因植物的方法,其包括(i)向植物中引入和表达编码如权利要求M或25中定义的BETl样多肽的核酸;和( )在促进植物生长和发育的条件下培养所述植物细胞。40.相对于对照植物具有增加的产量,特别是增加的生物量和/或增加的种子产量的转基因植物,或源自所述转基因植物的转基因植物细胞,所述增加的产量因编码权利要求 24或25中定义的BETl样多肽的核酸的被调节的表达而产生。41.权利要求34、38或40的转基因植物或源自其的转基因植物细胞,其中所述植物是作物植物例如甜菜、或单子叶植物或谷类植物例如稻、玉米、小麦、甘蔗、大麦、粟、黑麦 (rye)、黑小麦、高粱、二粒小麦、斯佩耳特小麦、黑麦(secale)、单粒小麦、埃塞俄比亚画眉草、买罗高粱和燕麦。42.权利要求41的植物的可收获部分,其中所述可收获部分优选是枝条生物质和/或种子。43.从权利要求41的植物和/或从权利要求42的植物的可收获部分得到的产品。44.编码BETl样多肽的核酸在相对于对照植物增加植物的产量,特别是在增加种子产量和/或枝条生物量中的用途。45.分离的核酸分子,其选自(i)SEQID NO :11和95的任一个所示的核酸;(ii)SEQID NOs :11和95的任一个所示的核酸的互补序列;(iii)编码SEQID NO 12和96的任一个所示的多肽的核酸,优选地作为遗传密码简并性的结果,所述分离的核酸可从SEQ ID NO :12和96的任一个所示的多肽序列推导而来, 并且还优选地,赋予相对于对照植物增强的产量相关性状;(iv)核酸,其按照递增的优选次序与表Al的任何核酸序列具有至少30^^31^^32%, 33%,34%,35%,36%,37%,38%,39%,40%,41 %,42%,43%,44%,45%,46%,47%, 48%,49%,50%,51 %,52%,53%,54%,55%,56%,57%,58%,59%,60%,61 63%,64%,65%,66%,67%,68%,69%,70%,71 %,72%,73%,74%,75%,76%,77%, 78%,79%,80%,81 %,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91 93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的序列同一性,并且还优选地,赋予相对于对照植物增强的产量相关性状;(ν)核酸分子,其在严格杂交条件下与(i)至(iv)的核酸分子杂交并且优选地赋予相对于对照植物增强的产量相关性状;(vi)编码BETl样多肽的核酸,所述多肽按照递增的优选次序与SEQID NO 12和96 的任一个所示的氨基酸序列以及表Al中任何其他氨基酸序列具有至少50^^51^^52%, 53%,54%,55%,56%,57%,58%,59%,60%,61 %,62%,63%,64%,65%,66%,67%, 68%,69%,70%,71 %,72%,73%,74%,75%,76%,77%,78%,79%,80%,81 83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91 %,92%,93%,94%,95%,96%,97%, 98%或99%的序列同一性,并且优选赋予相对于对照植物增强的产量相关性状。46.分离的多肽,其选自(i)SEQ ID NO 12和96的任一个所示的氨基酸序列;( )氨基酸序列,其按照递增的优选次序与SEQ ID NO 12和96的任一个所示的氨基酸序列以及表Al中任何其他氨基酸序列具有至少50%、51%、52%、53%、讨%、55%、 56%,57%,58%,59%,60%,61 %,62%,63%,64%,65%,66%,67%,68%,69%,70%, 71 72%,73%,74%,75%,76%,77%,78%,79%,80%,81 82%,83%,84%,85%, 86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98% 或 99% 的序列同一性,并且优选赋予相对于对照植物增强的产量相关性状。(iii)上述(i)或(ii)所给出的任何氨基酸序列的衍生物。47.用于相对于对照植物增强植物的产量相关性状的方法,其包括增加编码tRNA二氢尿苷合酶1样(DUSlL)多肽的核酸序列在植物中的表达,所述DUSlL多肽包含(i)具有 InterPro登录号IPR00U69的tRNA- 二氢尿苷合酶结构域;(ii)具有hterPro登录号 IPR013785的酸缩酶型TIM桶结构域;和(iii)具有hterPro登录号IPR018517的tRNA 二氢尿苷合酶保守位点,和任选地选择具有增强的产量相关性状的植物。48.权利要求47的方法,其中所述DUSlL多肽包含(i)按照递增的优选次序与SEQID NO 294 所示的 tRNA-二氢尿苷合酶结构域至少 50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、 85%、90%、95%、98%、99%或更高的氨基酸序列同一性。49.权利要求48的方法,其中所述DUSlL多肽还包含按照递增的优选次序与SEQID NO 259 所示的多Jft至少 30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、 85%、90%、95%、98%、99%或更高的氨基酸序列同一性。50.权利要求47至49的任一项的方法,其中所述DUSlL多肽按照递增的优选次序与本文中表A3所给出的任何多肽序列具有至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、 70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、99%或更高的氨基酸序列同一性。51.权利要求47至50的任一项的方法,其中所述DUSlL多肽能够在功能上补充在tRNA二氢尿苷合酶活性上有缺陷的大肠杆菌菌株,从而增加tRNA 二氢尿苷含量。52.权利要求47至51的任一项的方法,其中所述编码DUSlL多肽的核酸序列由表A3 所给出的任一 SEQ ID NO核酸序列所示,或为其部分、或为能够与表A3所给出的任一 SEQ ID NO核酸序列或其互补序列杂交的序列。53.权利要求47至52的任一项的方法,其中所述核酸序列编码表A3所给出的任何SEQ ID NO多肽序列的直向同源物或旁系同源物。54.权利要求47至53的任一项的方法,其中所述增加的表达通过=T-DNA激活标记、 TILLING或同源重组的任一个或多个实现。55.权利要求47至讨的任一项的方法,其中所述增加的表达通过在植物中引入和表达编码DUSlL多肽的核酸序列来实现。56.权利要求47至55的任一项的方法,其中所述增加的产量相关性状是如下的一个或多个增加的地上生物量、增加的每株植物的种子产量、增加的饱满种子数和增加的种子总数。57.权利要求47至56的任一项的方法,其中所述产量相关性状在养分可利用率减小的条件下,特别是氮可利用率减小的条件下生长的植物中相对于对照植物增加。58.权利要求47至57的任一项的方法,其中所述核酸序列有效地连接至组成型启动子。59.权利要求的方法58,其中所述组成型启动子是G0S2启动子,优选来自稻的G0S2启动子,最优选如SEQ ID NO :295所示的G0S2序列。60.权利要求47至59的任一项的方法,其中所述编码DUSlL多肽的核酸序列来自植物,更优选来自单子叶植物,更优选来自禾本科,最优选所述核酸序列来自甘蔗。61.可通过权利要求47至60的任一项的方法获得的植物、其部分(包括种子)或植物细胞,其中所述植物、其部分或细胞包含编码DUSlL多肽的分离的核酸转基因。62.分离的核酸分子,其选自(i)SEQID NO 264 或 SEQ ID NO :292 所示的核酸序列;(ii)如SEQID NO :264或SEQ ID NO :292所示的核酸序列的互补序列;(iii)编码DUSlL多肽的核酸序列,所述多肽按照递增的优选次序与如SEQID NO 265 或 SEQ ID NO :293 所示的多肽序列具有至少 30%、;35%、40%、45%、50%、55%、60%、 65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或更高的氨基酸序列同一性。63.分离的多肽,其选自⑴如SEQ ID NO 265或SEQ ID NO :293所示的多肽序列;(ii)多肽序列,所述多肽序列按照递增的优选次序与如SEQID NO :265或SEQ ID NO 293 所示的多肽序列具有至少 30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或更高的氨基酸序列同一性;(iii)上文(i)或(ii)所给出的任何多肽序列的衍生物。64.结构域,其包含(a)权利要求47至53或62的任一项中定义的编码DUSlL多肽的核酸序列;(b)能够驱动(a)的核酸序列的表达的一个或多个控制序列;和任选地(c)转录终止序列。65.权利要求64的构建体,其中所述控制序列是组成型启动子。66.权利要求64的构建体,其中所述组成型启动子是G0S2启动子,优选来...
【专利技术属性】
技术研发人员:Y·海茨费尔德,A·I·桑兹莫林纳罗,V·弗兰卡德,C·勒佐,
申请(专利权)人:Y·海茨费尔德,A·I·桑兹莫林纳罗,V·弗兰卡德,C·勒佐,
类型:发明
国别省市:
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