一种金叶水杉组培快繁方法技术

本发明专利技术公开了一种金叶水杉组培快繁方法，由于金叶水杉嫁接繁殖的繁殖系数低，扦插和压条繁殖的苗木易老化，现有组培方法存在污染率高、繁殖系数低，方法不稳定等问题，为了解决以上问题，金叶水杉组培快繁方法包括如下步骤：外植体消毒、初代培养、继代培养、生根壮苗培养、炼苗移栽，在不同培养阶段使用不同的培养基组成，并采用合理的炼苗措施，从而建立金叶水杉组培快繁技术体系。采用本方法得到的再生植株，植物学性状稳定，重复性良好，增殖系数达到4-6，生根率达72%，移栽成活率达96%，能进行大规模商品化育苗生产。

【技术实现步骤摘要】
一种金叶水杉组培快繁方法
本专利技术属于植物组织培养研究领域，具体涉及一种金叶水杉组培快繁方法。
技术介绍
金叶水杉（Metasequoiaglyptostroboides‘GoldRush’）别名黄金杉，为杉科水杉属植物，原产于日本，是近几年发展起来的一个水杉栽培变种。金叶水杉树形端庄、生长迅速，树冠常年呈金色，叶片在春、夏、秋三季始终保持鲜艳亮丽的黄色。金叶水杉对环境小气候及空气湿度的要求不高，抗逆性强，耐寒耐热，耐水湿，管理容易，是城市绿化不可多得的彩叶类大型乔木，在辽宁、浙江、四川等地均有引种，具有广阔的发展前景。目前，金叶水杉生产中一般采用扦插、嫁接和压条的繁殖方法培育种苗，扦插繁殖易受扦插基质、温湿度和植物生长调节剂的影响，扦插苗和压条苗根系均为不定根，吸收能力差，形成的树体直立性差，顶端优势不明显，生长缓慢；嫁接繁殖是现在金叶水杉主要的繁殖方法，但嫁接方法易受季节和地域限制，只能在春、秋两季进行，操作复杂，繁殖系数低，小苗生长速度不一，管理繁杂，不适宜批量、规模化繁殖。因此，在生产中如果能筛选出金叶水杉组培快繁方法，既可简化繁殖过程，又可迅速扩大苗木数量，满足市场需求，国内外有关金叶水杉组培研究鲜有报道，龚维红等研究发现初代培养在春、秋两季污染率达60%以上，夏季达85%以上，增殖系数只有1.8，远低于组培增殖系数3.5的常规要求。
技术实现思路
本专利技术提供一种金叶水杉组培快繁方法，目的在于解决现有技术存在的问题，降低污染率，使增殖系数达到常规要求，其特征在于包括以下步骤：1.一种金叶水杉组培快繁方法的步骤为：（1）外植体采集及消毒：选取金叶水杉春季萌发的新稍幼茎，剪成4～5cm茎段用清水冲洗1～2h，转入超净工作台中，用75%乙醇溶液消毒40s，无菌水冲洗5～6次，用2%次氯酸钠溶液消毒12min，用无菌水冲洗5～6次；（2）初代培养：将经步骤（1）消毒后的茎段剪成长约1cm茎段，接种至初代培养基进行丛生芽诱导培养，温度25±1℃，光照12～14h/d，光照强度1500～2000Lx，空气相对湿度70%～75%；（3）继代培养：将步骤（2）初代培养得到的丛生芽接种至继代培养基进行增殖培养，温度25±1℃，光照12～14h/d，光照强度1500～2000Lx，空气相对湿度70%～75%；（4）生根壮苗培养：将步骤（3）继代培养中获得的植株，选取2～3cm嫩梢从基部切下接种至生根壮苗培养基进行诱导生根，温度25±1℃，光照12～14h/d，光照强度2500～3000Lx，空气相对湿度70%～75%；（5）驯化移栽：将苗高6～8cm的壮苗带瓶移至温度20～30℃、空气相对湿度75～85%、光照强度3500～4000Lx、通风良好的环境下，逐渐打开瓶盖，炼苗2～3天，取出组培苗，洗净培养基后栽至苗床中，苗床基质由腐殖土、蛭石、珍珠岩按体积比2：1：1混合而成；2.前述的一种金叶水杉组培快繁方法，其中所述的初代培养基组成为：GD+1.0～2.0mg/L2，4-D+0.5～0.8mg/LNAA+4.0～7.0mg/L6-BA+20～25g/L蔗糖+1.0～1.5g/LAC+5.5～7.0g/L琼脂，pH为5.6～5.8；3.前述的一种金叶水杉组培快繁方法，其中所述的继代培养基组成为：GD+0.8～1.0mg/LNAA+6.0～8.0mg/L6-BA+20～25g/L蔗糖+1.0～1.5g/LAC+5.5～7.0g/L琼脂，pH为5.6～5.8；4.前述的一种金叶水杉组培快繁方法，其中所述的生根壮苗培养基组成为：GD+0.8～1.0mg/LNAA+1.0～3.0mg/LIBA+20～25g/L蔗糖+1.0～1.5g/LAC+5.5～7.0g/L琼脂，pH为5.6～5.8。有益效果本专利技术以春天萌发的嫩枝为外植体，经过初代培养、继代培养、生根培养、炼苗移栽，可得到完整的再生植株。采用本方法得到的再生植株，植物学性状稳定，增殖系数达到4～6，生根率达72%，移栽成活率达96%，快繁方法稳定性好，可用来快速、批量繁殖金叶水杉种苗。具体实施方式实施例11.外植体采集及消毒：选择金叶水杉外植体时，早春材料比夏季和秋季材料褐变的程度弱，冬季的芽进入深休眠状态，不容易生长，所以最好选用早春的材料作为外植体，将春季选取的新稍幼茎剪成4～5cm茎段用清水冲洗1～2h，转入超净工作台中，用75%乙醇溶液消毒40s，无菌水冲洗5～6次，用2%次氯酸钠溶液消毒12min，用无菌水冲洗5～6次；2.初代培养：为了阻止褐变对外植体的影响，将经步骤（1）消毒后的茎段剪成长约1cm茎段，放到空白琼脂培养基中培养5-7天，使组织中的酚类物质部分渗入培养基中，切口愈合后再转移至初代培养基进行丛生芽诱导培养，初代培养基组成为：GD+1.0～2.0mg/L2，4-D+0.5～0.8mg/LNAA+4.0～7.0mg/L6-BA+20～25g/L蔗糖+1.0～1.5g/LAC+5.5～7.0g/L琼脂，pH为5.6～5.8，环境条件为：温度25±1℃，光照12～14h/d，光照强度1500～2000Lx，空气相对湿度70%～75%；3.继代培养：将步骤（2）初代培养得到的丛生芽接种至继代培养基进行增殖培养，继代培养基组成为：GD+0.8～1.0mg/LNAA+6.0～8.0mg/L6-BA+20～25g/L蔗糖+1.0～1.5g/LAC+5.5～7.0g/L琼脂，pH为5.6～5.8，环境条件为：温度25±1℃，光照12～14h/d，光照强度1500～2000Lx，空气相对湿度70%～75%；4.生根壮苗培养：将步骤（3）继代培养中获得的植株，选取2～3cm嫩梢从基部切下接种至生根壮苗培养基进行诱导生根，生根壮苗培养基组成为：GD+0.8～1.0mg/LNAA+1.0～3.0mg/LIBA+20～25g/L蔗糖+1.0～1.5g/LAC+5.5～7.0g/L琼脂，pH为5.6～5.8，环境条件为：温度25±1℃，光照12～14h/d，光照强度2500～3000Lx，空气相对湿度70%～75%，采用此方法增殖系数可达4～6，幼苗生根率可达72%；5.驯化移栽：将苗高6～8cm的壮苗带瓶移至温度20～30℃、空气相对湿度75～85%、光照强度3500～4000Lx、通风良好的移栽环境下，逐渐打开瓶盖，炼苗2～3天，取出组培苗，洗净培养基后栽至苗床中，苗床基质由腐殖土、蛭石、珍珠岩按体积比2：1：1混合而成，最终幼苗移栽成活率达可达96%。实施例2方法及步骤与实施例1相同，不同的是：所述的初代培养基组成为：GD+1.0mg/L2，4-D+0.5mg/LNAA+4.0mg/L6-BA+20g/L蔗糖+1.0g/LAC+5.5g/L琼脂，pH为5.8；所述继代培养基组成为：GD+0.8mg/LNAA+6.0mg/L6-BA+20g/L蔗糖+1.0g/LAC+5.5g/L琼脂，pH为5.8；所述生根培养基组成为：GD+0.8mg/LNAA+1.0mg/LIBA+20g/L蔗糖+1.0g/LAC+5.5g/L琼脂，pH为5.8。实施例3方法及步骤与实施例1相同，不同的是：所述的初代培养基组成为：GD+2.0mg/L2，4-D+0.8mg/LNAA+7本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种金叶水杉组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：（1）外植体采集及消毒：选取金叶水杉春季萌发的新稍幼茎，剪成4～5cm茎段用清水冲洗1～2h，转入超净工作台中，用75%乙醇溶液消毒40s，无菌水冲洗5～6次，用2%次氯酸钠溶液消毒12min，用无菌水冲洗5～6次；（2）初代培养：将经步骤（1）消毒后的茎段剪成长约1cm茎段，接种至初代培养基进行丛生芽诱导培养，温度25±1℃，光照12～14 h/d，光照强度1500～2000Lx，空气相对湿度70%～75%；（3）继代培养：将步骤（2）初代培养得到的丛生芽接种至继代培养基进行增殖培养，温度25±1℃，光照12～14 h/d，光照强度1500～2000Lx，空气相对湿度70%～75%；（4）生根壮苗培养：将步骤（3）继代培养中获得的植株，选取2～3cm嫩梢从基部切下接种至生根壮苗培养基进行诱导生根，温度25±1℃，光照12～14 h/d，光照强度2500～3000Lx，空气相对湿度70%～75%；（5）驯化移栽：将苗高6～8cm的壮苗带瓶移至温度20～30℃、空气相对湿度75～85%、光照强度3500～4000Lx、通风良好的环境下，逐渐打开瓶盖，炼苗2～3天，取出组培苗，洗净培养基后栽至苗床中，苗床基质由腐殖土、蛭石、珍珠岩按体积比2：1：1混合而成。...

【技术特征摘要】
1.一种金叶水杉组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：(1)外植体采集及消毒：选取金叶水杉春季萌发的新稍幼茎，剪成4～5cm茎段用清水冲洗1～2h，转入超净工作台中，用75％乙醇溶液消毒40s，无菌水冲洗5～6次，用2％次氯酸钠溶液消毒12min，用无菌水冲洗5～6次；(2)初代培养：将经步骤(1)消毒后的茎段剪成长约1cm茎段，接种至初代培养基进行丛生芽诱导培养，温度25±1℃，光照12～14h/d，光照强度1500～2000Lx，空气相对湿度70％～75％；(3)继代培养：将步骤(2)初代培养得到的丛生芽接种至继代培养基进行增殖培养，温度25±1℃，光照12～14h/d，光照强度1500～2000Lx，空气相对湿度70％～75％；(4)生根壮苗培养：将步骤(3)继代培养中获得的植株，选取2～3cm嫩梢从基部切下接种至生根壮苗培养基进行诱导生根，温度25±1℃，光照12～14h/d，光照强度2500～3000Lx，空气相对湿度70％～75％；(5)驯化移栽：将...

【专利技术属性】
技术研发人员：张桂玲，温四民，
申请(专利权)人：临沂大学，
类型：发明
国别省市：山东;37