双液相萃取的生物法制备天然手性γ-癸内酯的方法技术

双液相萃取的生物转化制备天然手性γ-癸内酯的方法，采用解脂耶氏酵母Yarrowia?lipolytica?As2.1405，经过扩大培养的种子液，接种于转化培养基，以蓖麻油为底物，生物转化生产天然γ-癸内酯，在转化过程中采用添加有机溶剂的原位产物分离技术，将γ-癸内酯的生物转化合成与分离提取耦合起来，减小产物毒性、提高γ-癸内酯产量。有机溶剂相中γ-癸内酯产量比不添加溶剂的单水相转化制备提高了444％。所得产品纯度(GC)≥98.3％，旋光度+38.12～+45.5度，对映体过量率(e.e.％)为93.42％。本发明专利技术的方法降低了产物对菌株催化活性的影响，避免产物被继续氧化，方便产物的提取，产品具有光学活性，可大规模工业化应用，具有反应条件温和、绿色天然、成本较低、环境友好等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种微生物转化法生产天然Y-癸内酯的方法，属于生物
即采用双液相萃取的原位(in site)产物分离技术，生物转化天然原料---蓖麻油制备天 然手性Y-癸内酯的方法。
技术介绍
γ-癸内酯(gamma decalactone)，又名丙位癸内酯，是一种含有五元内酯环的十 碳化合物。内酯可以看作是羟基酸分子内脱去一分子水的产物，由于生成酯的羟基和羧基 处于同一分子内，故称为内酯，见下列反应式。权利要求1.一种制备天然手性Y -癸内酯的方法，其特征在于使用解脂耶氏酵母 Yarrowialipolytica As2. 1405经过扩大培养的种子液，接种于转化培养基，以蓖麻油为底 物进行生物转化制备天然Y-癸内酯，在转化过程中采用添加有机溶剂的双液相萃取原位 产物分离技术，使生物转化合成与产物分离提取过程相耦合，以提高了 Y-癸内酯产量。2.如权利要求1所述制备天然手性Y-癸内酯的方法，其特征在于所述种子液按如下 步骤制备得到将菌种接种于斜面培养基，经活化培养得到新鲜菌种，该菌种再接种于液体 种子培养基，经过培养得到成熟的酵母种子液，所述斜面培养基配方为葡萄糖10克/升， 钠盐5克/升，蛋白胨10克/升，牛肉膏5克/升，琼脂20克/升，pH 7. O。液体种子培养 基的配方为葡萄糖30克/升，酵母粉10克/升，钾盐1. 2克/升，钠盐0. 35克/升，pH 6. 5o3.如权利要求1所述制备天然手性Y-癸内酯的方法，其特征在于该生物转化过程以 蓖麻油为底物，在有机溶剂存在的条件下进行摇床振荡培养，转速为100 200转/分钟， 温度为20 40°C，转化时间为18 72小时，获得高浓度Y-癸内酯的转化液。4.如权利要求1所述制备天然手性Y-癸内酯的方法，其特征在于所用的转化培养基 配方为蓖麻油10 60克/升，蛋白胨5 20克/升，酵母粉5 20克/升，钾盐1 10 克/升，钠盐5 20克/升，乳化剂吐温-800 10克/升，pH 5 9。5.如权利要求1所述制备天然手性Y-癸内酯的方法，其特征在于转化过程中添加的 有机溶剂为十四酸异丙酯或十六酸异丙酯。6.如权利要求1所述制备天然手性Y-癸内酯的方法，其特征在于所述有机溶剂的添 加时间为细胞培养开始后0 30小时。7.如权利要求1或5或6所述制备天然手性Y-癸内酯的方法，其特征在于所述有机 溶剂的体积用量与转化培养基体积比为1 1 5。8.用权利要求1所述的方法得到天然Y-癸内酯产品，该产品具有如下特征纯度 (GC)彡 98. 3%，旋光度( ° :+38. 12 +45. 5 度，对映体过量率(e. e. % ) :93. 42%。全文摘要双液相萃取的生物转化制备天然手性γ-癸内酯的方法，采用解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica As2.1405，经过扩大培养的种子液，接种于转化培养基，以蓖麻油为底物，生物转化生产天然γ-癸内酯，在转化过程中采用添加有机溶剂的原位产物分离技术，将γ-癸内酯的生物转化合成与分离提取耦合起来，减小产物毒性、提高γ-癸内酯产量。有机溶剂相中γ-癸内酯产量比不添加溶剂的单水相转化制备提高了444％。所得产品纯度(GC)≥98.3％，旋光度+38.12～+45.5度，对映体过量率(e.e.％)为93.42％。本专利技术的方法降低了产物对菌株催化活性的影响，避免产物被继续氧化，方便产物的提取，产品具有光学活性，可大规模工业化应用，具有反应条件温和、绿色天然、成本较低、环境友好等优点。文档编号C12R1/645GK102080109SQ20091019959公开日2011年6月1日 申请日期2009年11月27日 优先权日2009年11月27日专利技术者张兆斌, 李元芳, 杜毅, 许平, 陈洪, 魏中浩 申请人:爱普香料集团股份有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备天然手性γ－癸内酯的方法，其特征在于使用解脂耶氏酵母Ｙａｒｒｏｗｉａｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ　Ａｓ２．１４０５经过扩大培养的种子液，接种于转化培养基，以蓖麻油为底物进行生物转化制备天然γ－癸内酯，在转化过程中采用添加有机溶剂的双液相萃取原位产物分离技术，使生物转化合成与产物分离提取过程相耦合，以提高了γ－癸内酯产量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李元芳，张兆斌，陈洪，杜毅，许平，魏中浩，
申请(专利权)人：爱普香料集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：31