洋葱提取物的制备方法及在延长线虫寿命中的应用以及包括洋葱提取的食品技术

本发明专利技术涉及一种洋葱提取物的制备方法及在延长线虫寿命中的应用，制备方法为提取物制备，经多次提取、纯化、浓缩，得到洋葱提取物。本发明专利技术制备的洋葱提取物对延长线虫寿命效果明显，发现30μg/mL洋葱提取物(含槲皮素80％以上)能显著延长秀丽线虫的寿命和最大寿命，优于维生素E的作用效果，能显著提高线虫SOD、CAT表达量和热激实验的存活率。

Process for the preparation of onion extracts and their use in prolonging the life of nematodes and food comprising onions

The invention relates to a preparation method of onion extract and its application in prolonging the life of a nematode. The preparation method is that the extract is prepared, and the onion extract is obtained by repeated extraction, purification and concentration. Onion extract prepared by the invention was to prolong the lifespan of C.elegans, found 30 g/mL (more than 80% onion extract containing quercetin) could significantly prolong the life of nematodes and the maximum lifetime effect is better than vitamin E, can significantly improve the survival rate of nematode SOD and expression of CAT and heat shock experiment.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食品、医药
，尤其是一种洋葱提取物的制备方法及在延长线 虫寿命中的应用以及包括洋葱提取的食品。
技术介绍
洋葱是一种集营养、医疗和保健于一身的特色蔬菜，在欧美被誉为“蔬菜皇后”。 洋葱中含有挥发油、黄酮等众多活性物质，具有消炎抑菌、预防慢性支气管炎、治疗浮肿、腹 泻、祛痰、利尿、降血糖和预防心血管疾病等生理功能。对洋葱的深入研究将会为延缓衰老、 抗氧化、降血糖、降血脂、抗血栓、抗癌等天然药物的开发利用提供新的材料，为人类健康做贝献。长期以来，科学家们对衰老机理众说纷纭；在众多衰老学说中，以自由基学说最受 重视，目前人们普遍认为衰老主要是由于身体的正常防卫及修复机能衰退导致的。根据衰 老的自由基理论，在正常生物体新陈代谢过程中产生的活性氧自由基(R0Q，尤其是超氧阴 离子自由基(02_)是引起衰老以及与衰老相关疾病的主要原因之一。秀丽线虫(Caenorhabditis elegans, C. elegans,简称线虫)，作为研究体内抗衰 老作用的模式动物有许多优点，如易培养、繁殖快；以整体为对象，实验规模容易放大、线虫 身体透明；与其寿命相关的遗传和环境背景较清晰等特点，适合进行衰老干预效果的评价 和机制研究，将其与我国的中药、传统食品及天然产物进行结合，使其成为功能/保健食品 开发的工具是当务之急。中草药成分极其复杂，各种生物碱类、甙类、酮类等天然小分子化 合物，其生物活性鉴定完全可以利用低成本高效率的线虫作为评价模型。目前，在有关洋葱的专利报道中多集中于洋葱精油及洋葱食谱研究上，尚未发现 关于洋葱黄酮类提取物对线虫寿命影响方面的专利。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种纯度高、制备方法简单的 洋葱提取物的制备方法及在其延长线虫寿命中的应用以及包括洋葱提取的食品。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的一种洋葱提取物的制备方法，其特征在于步骤如下(1)取洋葱、切碎、烘干、粉碎、过60-80目筛，得洋葱干燥粉末；(2)按洋葱粉末与萃取剂比为1 15-20g/mL回流提取2-3次，浸提温度65-75°C， 浸提2-4h，在浸提过程中，每隔0. 5h间歇搅拌原料2-3次，每次3-5min，提取后滤出提取液 并合并；(3)将提取液浓缩至总体积的5% --15%，活性炭脱色，过滤；先用2-3倍体积的 石油醚萃取，再用2-3倍体积乙酸乙酯萃取2-5次，合并滤液，浓缩，干燥至粉末；(4)用60-70倍粉末体积的硫酸水溶液进行回流水解1. 5__2h，浓缩，将得到的浓缩料液泵入聚酰胺吸附柱上，以lmL/min上样流速，吸附30min，用3_5倍体积的蒸馏水洗涤 去除杂质；用75%-85%乙醇洗脱，洗脱流速lmL/min，收集乙醇洗脱液；减压浓缩，得到洋 葱提取物。而且，所述萃取剂为乙醇。而且，所述硫酸水溶液的浓度为3% (ν/ν)。而且，所述洋葱提取物中槲皮素的纯度为80% -95%。洋葱提取物在延长线虫寿命中的应用。一种食品，其特征在于食品包括洋葱提取物。而且，所述食品包括食品、保健品、饮品和食品添加剂。本专利技术的优点和积极效果 如下1.本专利技术制备的洋葱提取物对线虫寿命有较大影响，其中30μ g/mL洋葱提取物 (含槲皮素80%以上)能显著延长秀丽线虫寿命和最大寿命，能显著提高线虫SOD、CAT表 达量和热激实验的存活率，优于维生素E的作用效果。2.本专利技术提供一种纯度高、制备方法简单的洋葱提取物的制备方法，提取物经冻 干形成洋葱提取物冻干粉，经HPLC检测，主要成分为槲皮素且纯度达到80% -95%。3.本专利技术制备的洋葱提取物可以制备成延缓衰老药物、保健品或食品添加剂，可 制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂等多种形式，制成的产品包括药物、食品或保健 品及其配料等，用途广泛。附图说明图1为本专利技术不同浓度的洋葱提取物对线虫平均寿命影响的柱形图；图2为本专利技术实施例1制备的线虫生存曲线图；图3为本专利技术洋葱提取物对线虫SOD表达量的影响；图4为本专利技术洋葱提取物对线虫CAT表达量的影响；图5为本专利技术洋葱提取物对线虫存活率的影响。具体实施例方式下面结合实施例，对本专利技术做进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性 的，不能以下述实施例来限定本专利技术的保护范围。一、洋葱提取物的制备方法，步骤如下(1)准确称取新鲜洋葱并洗净，切成丝状，在烘箱中烘干(55_65°C )，用粉碎机粉 碎，过60-80目筛，得干燥粉末；(2)将洋葱按原料与萃取剂(乙醇)之比为1 15-20 (g/ml)进行混合，回流提取 2-3次，浸提温度65-75°C，浸提时间2-4h，在浸提过程中，每隔0. 5h间歇搅拌原料2_3次， 每次3-5min，提取过程结束后滤出料液并合并；(3)将提取液放入旋转蒸发仪中减压浓缩，浓缩至总体积的10%，萃取剂回收再 利用，活性炭脱色，过滤；先用石油醚萃取，除去脂溶性物质，再用乙酸乙酯萃取3次，合并 滤液，浓缩后干燥至粉末；(4)用60-70倍体积的3% (ν/ν)硫酸水溶液进行回流水解1. 5-2h,再旋转蒸发，将得到的料液泵入聚酰胺吸附柱上，以lmL/min上样流速，吸附30min，用3_5倍体积的蒸馏 水洗涤去除杂质；用80%乙醇洗脱，洗脱流速lmL/min，收集乙醇洗脱液；用旋转蒸发仪减 压浓缩收集乙醇洗脱液，回收溶剂，得到洋葱提取物，将浓缩液冷冻干燥的洋葱提取物冻干 粉；(5)冷冻干燥后得到洋葱提取物冻干粉，经HPLC检测，主要成分为槲皮素，纯度达 到 80% -95% ο二、洋葱提取物在延长线虫寿命的应用实验方法参照文献(LakowskiB, Hekimi S. The genetics of caloric restriction inCaenorhabditis elegans, 1998,95 :13091-13096)等方法测定洋葱提取物 对线虫寿命的影响。寿命实验将同期化后的线虫置于含或不含受试物的NGM板内，发育为L4期后的 线虫转入相应浓度实验板中，此时记为寿命实验day 0 ；隔天观察线虫，并记录线虫生存、 死亡及剔除出实验的条数。对线虫死亡判断标准无移动及吞咽动作，轻触后仍无任何反 应。剔除标准①逃离至平皿壁或盖上而干死；②虫卵在体内孵化而成袋样虫；③钻入琼脂 中。实验板中含12. Syg/mL 5_Fu及不同浓度受试物。DMSO在实验中终浓度< 1 %。全部 实验板置于20°C下培养。实验浓度分别为10 μ g/mL, 30 μ g/mL, 50 μ g/mL ；对照组为维生素 E0统计学分析实验均重复2-3次以上，采用SPSS16. 0软件进行单因素方差分析实验结果。表1为20°C时不同浓度洋葱提取物对野生型秀丽线虫寿命延长统计表。表1不同浓度洋葱提取物对野生型秀丽线虫寿命延长统计表(20°C )权利要求1.一种洋葱提取物的制备方法，其特征在于步骤如下(1)取洋葱、切碎、烘干、粉碎、过60-80目筛，得洋葱干燥粉末；(2)按洋葱粉末与萃取剂比为1 15-20g/mL回流提取2-3次，浸提温度65-75°C，浸 提2-4h，在浸提过程中，每隔0. 5h间歇搅拌原料2-3次，每次3-5min，提取后滤出提取液并 合并；(3)将提取液本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种洋葱提取物的制备方法，其特征在于：步骤如下：（１）取洋葱、切碎、烘干、粉碎、过６０－８０目筛，得洋葱干燥粉末；（２）按洋葱粉末与萃取剂比为１∶１５－２０ｇ／ｍＬ回流提取２－３次，浸提温度６５－７５℃，浸提２－４ｈ，在浸提过程中，每隔０．５ｈ间歇搅拌原料２－３次，每次３－５ｍｉｎ，提取后滤出提取液并合并；（３）将提取液浓缩至总体积的５％－－１５％，活性炭脱色，过滤；先用２－３倍体积的石油醚萃取，再用２－３倍体积乙酸乙酯萃取２－５次，合并滤液，浓缩，干燥至粉末；（４）用６０－７０倍粉末体积的硫酸水溶液进行回流水解１．５－－２ｈ，浓缩，将得到的浓缩料液泵入聚酰胺吸附柱上，以１ｍＬ／ｍｉｎ上样流速，吸附３０ｍｉｎ，用３－５倍体积的蒸馏水洗涤去除杂质；用７５％－－８５％乙醇洗脱，洗脱流速１ｍＬ／ｍｉｎ，收集乙醇洗脱液；减压浓缩，得到洋葱提取物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王昌禄，韩洪杰，陈勉华，李风娟，王玉荣，李贞景，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：12