枳椇的不溶于低级醇的提取物和从中分离的多糖制造技术

一种药物组合物和保健食品，其包含一种不溶于低级醇的枳椇提取物或者是一种从中分离的多糖，具有有效的保护肝脏和消除宿醉活性。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种具有保护肝脏和消除宿醉活性的不溶于低级醇的枳椇(Hovenia dulcis Thunb)的提取物，从其中分离的多糖，和包含其的药物组合物或保健食品。
技术介绍
肝炎折磨着世界上越来越多的人，且因为缺乏有效的治疗药物，经常可发展为慢性肝炎，肝硬化，或癌症。当病人受到多种因素，比如压力，过量消费乙醇和/或肝毒性物质的影响时，可能发展各种类型的肝炎。被认为是典型的肝毒性物质的有CCl4，D-半乳糖胺，脂多糖(LPS)，溴苯，和醛类如被认为是乙醇代谢途径中间体的乙醛。因此，寻找新的可以保护肝脏免受肝毒性物质伤害或者在受到此类伤害后可恢复肝脏功能的药物的尝试很多。例如，从枳椇的种子和果实中分离的三萜糖苷被认为抑制人体组胺的释放和乙醇的吸收(Yoshikawa，K.T.等，(1995)Chem.Pharm.Bull.Tokyo，43(3)，第532-534页)；枳椇的果实被发现可抑制由四氯化碳或D-半乳糖胺/脂多糖引起的对肝脏的伤害(Hase K.等，(1997)Chem.Pharm.Bull.Tokyo，20(4)，第381-385页)。上述和其它现有技术文献描述了毛枳椇(日本品种)和枳椇(中国品种)的果实或种子的多种提取物的药理学活性；但是，却没有关于枳椇的醇不溶性提取物或从中分离的多糖在保护肝脏和消除宿醉中的应用的报告。专利技术概述因此本专利技术的一个目的就是提供一种从枳椇中提取的药物活性物质，该物质显示肝脏保护和宿醉消除活性。本专利技术的另一个目的是提供一种从枳椇中分离所述物质的方法。本专利技术的另一个目的是提供一种抑制乙醇脱氢酶和乳酸脱氢酶的药物组合物，该组合物包含药用载体和上述从枳椇中分离的物质。本专利技术另一目的是提供一种用于防止或抑制肝脏相关疾病并可治疗宿醉的药物组合物，其包含药用载体和从枳椇中分离的多糖。本专利技术还有一个目的是提供一种包含所述物质和/或来源于枳椇的多糖的保健食品。依照本专利技术的一个方面，提供一种用低级醇处理干枳椇的热水提取物获得的低级醇不溶性级分。依照本专利技术的另一个方面，还提供一种从所述低级醇不溶性级分中分离的具有有效的肝脏保护活性的多糖。附图简述当结合附图时，本专利技术的上述及其它目的和特征将从本专利技术的下列描述中变得明显，这些附图分别表示附图说明图1枳椇的果梗提取物的甲醇不溶性级分和从中分离的多糖的制备流程示意图；图2甲醇不溶性级分的DSC扫描；图3甲醇不溶性级分的MALLS谱；图4甲醇不溶性级分的IR光谱；图5甲醇不溶性级分的UV光谱；图6甲醇不溶性级分的GC谱；图7甲醇不溶性多糖MALLS谱；图8甲醇不溶性级分的IR光谱；图9甲醇不溶性级分的NMR谱；图10甲醇不溶性级分对四氯化碳诱导的肝脏切片培养物的体外蛋白合成活性；图11甲醇不溶性级分对半乳糖胺/LPS诱导的肝脏切片培养物的体外蛋白合成活性；图12甲醇不溶性级分对溴苯诱导的肝脏切片培养物的体外蛋白合成活性；图13甲醇不溶性级分对溴苯诱导的肝脏切片培养物的LDH释放抑制活性；图14图7中显示的多糖对溴苯诱导的肝脏切片培养物的体外蛋白合成活性；图15甲醇不溶性级分和图7中显示的多糖降低血液中乙醇浓度的活性；和图16甲醇不溶性级分和图7中显示的多糖的乙醇脱氢酶活性。专利技术详述本专利技术中枳椇的热水提取物的不溶于低级醇的级分可以通过两步制备。首先，干枳椇的热水提取物是用高压提取方法获得的，然后不溶性级分用低级醇处理如此获得的热水提取物来获得。在第一步中，将枳椇的果梗切片并在阴凉处干燥。向枳椇果梗的干燥切片中加入适量水，所得的混合物保存在温度110-150℃，优选120-125℃，1-3atm，优选1.5atm的压力下15分钟-48小时，优选30分钟-12小时的时期。然后将混合物冷却至室温并过滤，滤液依照常规冻干方法冻干以获得热水提取物。热水提取物在室温下进一步干燥，在一个减压下如-1.5atm下蒸发，用低级醇，优选甲醇，乙醇或丁醇，最优选100％的甲醇提取，以去除其中的低级醇可溶解的级分获得想要的低级醇不溶性级分。上述枳椇选自Hovenia dulcis Thunb.var.Koreana NAKAI，Hoveniadulcis Thunb.var.tomentella Makino和Hovenia dulcis Thunb。如此得到的低级醇不溶性级分具有以下特征凝胶渗透层析(GPC)的峰值在平均分子量为1,330,000道尔顿(Da)，142,800 Da，70,540 Da和102,400 Da处；IR(KBr，nm)吸收带在1000-1300nm(醚，酚，亚砜，乙烯基的峰)；UV吸收在200-300nm(环状环的峰)处。一种具有高肝脏保护和宿醉消除活性的多糖可以通过以下步骤从低级醇不溶性级分中分离出来。将低级醇不溶性级分溶解在蒸馏水中，将所得溶液填充离子交换柱，用具有0-5M渐增NaCl浓度的溶液逐步洗脱多糖组分洗脱，透析，浓缩并冻干(见图1)。在进行离子交换的过程中，可以使用阳离子交换树脂或阴离子交换树脂。可被用作此目的的交换树脂的例子有强酸性离子交换树脂如AG50W-x8，Amberlite IR-120和Dowex 50W-x8；弱酸性离子交换树脂如Amberlite IRC-50，Bio-Rex 70和Duolite-436；弱碱性离子交换树脂如Amberlite IRA-67和Dowex 3-x4A；强碱性离子交换树脂如AG 2x8，Amberlite IRA-400和Dowex 2-x8；改性的纤维素阳离子交换树脂如CM-Cellulose和SE-Cellulose；一种改性的纤维素阴离子交换树脂如DEAE纤维素；阳离子交联葡聚糖类型的树脂如G-25和G-50珠类型的交联葡聚糖树脂；和由琼脂糖制备的改性的珠类型的离子交换树脂如CepharoseCL，Biogel A Cepharose树脂，Fractogels和Toyopearl。。优选ToyopearlDEAE类型的交换树脂，最优选Toyoprearl DEAE-650C类型的交换树脂。按照上述的分离方法可获得多种多糖级分，用0.2M NaCl溶液洗脱的一种多糖显示最高的肝脏保护活性。按照上述步骤从韩国本土的枳椇中获得的多糖表现出以下的特性它由甘露糖，葡萄糖，半乳糖，鼠李糖(rhamanose)和阿拉伯糖组成，其比例为1∶2.51∶12.53∶187∶13.43；绝对分子量为114,500 Da；IR(KBr，nm)光谱在3550-3450 Da(宽，OH)，1660-1600 Da (C＝C)，和1290-1420 Da(＝CH-OH)处显示峰；1H-NMR(600MHz，D2O)的峰值在4.4-4.8ppm(糖峰)处。此外，在中国本土的枳椇中获得的多糖表现出以下特性它由包含半乳糖，鼠李糖，葡糖醛酸，半乳糖醛酸，木糖，甘露糖和葡萄糖组成，其比例为1∶0.84∶1.05∶0.87∶0.89∶2.05。各种实验清楚地说明低级醇不溶性级分和从其中分离的多糖具有高肝脏保护和消除宿醉活性，并对预防和治疗肝病和宿醉有效。因此，本专利技术中的低级醇不溶性级分和多糖可以被用作预防或治疗肝毒性和肝病如肝炎，脂肪肝和肝硬化的保健食品和药剂。因此，本专利技术还提供了一种抑制乙醇脱氢酶和乳酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
枳椇热水提取物的低级醇不溶性级分。

【技术特征摘要】
KR 2002-1-17 2002/27721.枳椇热水提取物的低级醇不溶性级分。2.权利要求1的低级醇不溶性级分，其中所述低级醇选自甲醇，乙醇和丁醇。3.权利要求2中的低级醇不溶性级分，其中所述低级醇是甲醇。4.一种多糖，其分离自权利要求1-3的低级醇不溶性级分。5.权利要求4的多糖，其具有以下特征由甘露糖，葡萄糖，半乳糖，鼠李糖和阿拉伯糖以1∶2.51∶12.53∶187∶13.43的比例组成；绝对分子量114,500Da；IR(KBr，nm)峰3550-3450Da(宽，OH)，1660-1600Da(C＝C)和1290-1420Da(＝CH-OH)；和1H-NMR(600MHz，D2O)峰4.4-4.8ppm(糖峰)。6.权利要求4的多糖，其具有以下特征由半乳糖，鼠李糖，葡糖醛酸，半乳糖醛酸，木糖，甘露糖和葡萄糖以1∶0.84∶1.05∶0.87∶0.89∶2.05的比例组成。7.制备权利要求1-3中任何一项的低级醇不溶性级分的方法，其包含以下步骤获得干燥枳椇的热水提取物；将所述热水提取物进行低级醇提取处理以获得低级醇不溶性级分。8.制备权利要求4的多糖的方法，其包含以下...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗千洙，郑南澈，金世炫，
申请(专利权)人：株生命之树，山林厅林业研究院，
类型：发明
国别省市：KR[韩国]