金雀异黄素在生产一种治疗骨质疏松症和肥胖症的药物中的用途 ,以及含有金雀异黄素与维制造技术

本发明专利技术涉及一种控制哺乳动物血浆金雀异黄素浓度以避免激活过氧化物酶体增殖因子活化的受体γ（ＰＰＡＲγ）的方法，上述方法包括步骤：ａ．评价哺乳动物血清金雀异黄素浓度；ｂ．如果需要，给予上述哺乳动物一种金雀异黄素成分，其量足以在每天至少８个小时期间内、优选每天至少１６个小时内保持血清金雀异黄素浓度在０．０２和３μＭ之间；ｃ．在至少３０天的时间内反复进行步骤ａ和ｂ，且间隔为不超过３天。本发明专利技术的方法特别适合于预防肥胖症和有着骨组织丢失的疾病或情况。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种体内施用设定量的金雀异黄素(genistein)以保持哺乳动物的血浆金雀异黄素浓度在设定范围内的方法。更具体的，本专利技术是关于一种控制血浆金雀异黄素浓度以刺激骨发生并同时通过避免激活过氧化物酶体增殖因子活化的受体γ(peroxisome proliferator-activatedreceptorγ，PPARγ)以预防脂肪生成的方法。本专利技术特别适合于预防肥胖症以及有着骨组织丢失的疾病或情况(例如骨质疏松症、Paget病、肿瘤患者的溶骨性转移灶、肝病的骨营养障碍、肾功能衰竭或血液透析引起的骨代谢改变、骨折、骨科手术、妊娠、哺乳、神经性厌食、或制动者、非承重(non-weight bearing)者、营养不良者或减肥者)。
技术介绍
异黄酮已经被用于预防各种疾病。然而对这些异黄酮的确切功能了解的还很少。已知它们与两种已知的雌激素受体(ER)ERα和ERβ结合，并起到了雌激素样的作用(Anderson，2001)。另外，金雀异黄素也是蛋白酪氨酸激酶的抑制物。然而异黄酮也有其他抗雌激素和非ER依赖性的作用。这些作用的机制仍不清楚(Anderson，2001；Aldercreutzand Mazur，1998；Kim et al.，1998)。既然体内或体外的量效关系还没有被很好地建立，因此还没有确定出预防骨质丢失和肥胖症的最适宜剂量。相信这是因为许多已知的体外体系的重复性和/或敏感性太低。Anderson et al.，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.1998217(3)，345-350，描述了每天每kg体重6.2-19.7微摩尔金雀异黄素对卵巢切除后哺乳小鼠的保持骨量的正性作用。除了对子宫重量的负性作用外，更高的剂量(每天每kg体重61.7微摩尔金雀异黄素)中报道了更弱的反应。本研究所采用的金雀异黄素的剂量极高并超过了人正常所消耗的按体重计算的每天的金雀异黄素的量。Nuttall et al.，″Is there a therapeutic opportunity to either prevent or treatosteopenic disorders by inhibiting marrow adipogenesis″，Bone 27(2)，(2000)，177-184，是一篇综述，它探讨了基质细胞的分化可塑性和骨质疏松症以及其他代谢性骨病的关系。假定在脂肪细胞和成骨细胞的表型之间存在着相互关系。该过程所涉及的细胞传导途径被用作为治疗干预和药物设计的潜在靶点。在该文中看到体外和体内研究表明结合于PPAR、糖皮质激素、雌激素、雄激素和维生素D3受体的配体调节了骨髓基质细胞的脂肪生成和骨发生。另外，观察到属于噻唑烷二酮类(thiazolidinediones)的药物促进了骨髓基质细胞的脂肪生成并减少了骨发生。称为过氧化物酶体增殖因子活化的受体(PPAR)的转录因子家族在调节饮食脂肪的储存和代谢上起到了关键作用。PPAR被克隆还不到十年，是核受体基因家族的孤立成员，该基因家族包括类固醇、视黄醛、和甲状腺激素受体。已经建议将PPAR用作为开发治疗人代谢性疾病药物的分子靶点。有3种PPAR亚型，它们是不同基因的产物并常被表示为PPARα、PPARγ、PPARδ。和其他核受体基因家族成员一样，PPAR是配体活化的转录因子。激动剂配体和受体的结合造成PPAR靶基因编码的mRNA表达水平的改变。这个过程被称为“反式激活”，并发展出以细胞为基础的测定方法用于测定这种功能活性。通过获得的潜在的和选择性的受体配体已经揭示了PPAR大部分的生物学特点。通过使用结合和功能测定，一些小组已经报道确定和优化了3种亚型的每种亚型的配体。在“反向内分泌学(reverse endocrinology)”中使用的这些化学工具揭示了PPAR在人生理和疾病过程中的作用。PPARγ是3种PPAR亚型中至今被研究最多的亚型。PPARγ是调节脂肪细胞分化的关键转录因子。已经发现在存在弱PPARγ激动剂下成纤维细胞内PPARγ的强迫表达造成了细胞向脂肪细胞的分化。迄今为止获得的数据表明PPARγ在脂肪形成的信号链中起到了中枢性作用，同时也表明受体可以影响它本身的激动剂的生成和细胞摄取。已知天然的PPARγ配体包括噻唑烷、多种多不饱和脂肪酸、花生四烯酸衍生物和来源于PGD2的J系列前列腺素，这些配体在微摩尔浓度结合并激活受体。尽管激活PPARγ与骨发生的减少和脂肪生成的增加相关，但是PPARγ的激活也有健康益处。研究最多的PPARγ激动剂的治疗应用是治疗2型糖尿病。其他已经进行的研究表明PPARγ激动剂降低了各种脂肪异常血症的动物模型中的血浆甘油三脂、胆固醇和游离脂肪酸浓度。此外，PPARγ激动剂可以有抗高血压、抗炎症和抗肿瘤作用。Liang et al，″Suppression of inducible cyclooxygenase and nitric oxidesynthase through activation of PPARγ by flavonoids in mouse macrophages″，FEES Letters 496(2001)12-18，报道黄酮类的芹菜(甙)配基、白杨素以及山奈素可以作为能结合并激活PPARγ的变构效应物。然而该研究中10μM浓度的金雀异黄素没有激活PPARγ活性。没有进行PPARγ与金雀异黄素的结合研究。这说明这些黄酮类对炎性疾病可能有治疗作用，例如粥样硬化和类风湿关节炎。US 5,506,211(The UAB Research Foundation)描述了一种用于抑制成骨细胞活性并造成骨退化的方法，包括将成骨细胞与由一定量的黄豆中天然存在的金雀异黄素-葡糖苷共轭化合物组成的组合物接触。采用的金雀异黄素-葡糖苷共轭化合物的每天剂量在2-50mg范围。US 5,953,996(Taishi Food Company)描述了一种用于促进骨化和预防骨盐成分丢失的方法，包括给予哺乳动物它们所需要的有效剂量的组合物，该组合物含有协同有效剂量的金雀异黄素和锌盐。可以看出该本专利技术人已经发现金雀异黄素和锌能增强骨发生。所描述的组合物是优选食入的，以致食入1个小时后的血中金雀异黄素浓度可以是10-7M或更高。WO 99/66913(Sigma-Tau Healthscience)描述了一种组合物，它包括作为活性成分的丙酰基L-肉毒碱和金雀异黄素，并用于预防和/或治疗骨质疏松症和更年期综合征。WO01 74345 A(Ingram Jonathan)描述了一种抑制体重增加、引起体重丢失或造成胃部饱胀感的方法，它包括施用至少一种异黄酮，例如金雀异黄素。施用的异黄酮可以在5-500mg/天的范围内。US 6 326 366(Protein Teclmologies International)是关于一种激素替代治疗方案，它包括一起施用治疗有效剂量的哺乳动物雌激素和异黄酮(例如金雀异黄素)的混合物。采用的异黄酮的每天剂量为20-1000mg范围。EP-A 0829 261涉及一种用于脂肪细胞的脂肪降解的组合物，它包括至少一种异黄酮和/或它们的衍生物。适宜的异黄酮选自包括大豆黄素、大豆黄甙、金本文档来自技高网...

【技术保护点】
金雀异黄素成分在生产一种用于控制哺乳动物的血浆金雀异黄素浓度以避免激活过氧化物酶体增殖因子活化的受体γ（ＰＰＡＲγ）的方法的组合物中的用途，所述方法包括如下步骤：ａ．评价所述哺乳动物的血清金雀异黄素浓度；ｂ．如果需要，给所述 哺乳动物施用一种金雀异黄素成分，其量足以在每天至少８个小时内、优选在每天至少１６个小时内将血清金雀异黄素浓度维持在０．０２μＭ和３μＭ之间的水平；ｃ．在至少３０天的期间内反复进行步骤ａ和ｂ，且间隔为不超过３天。

【技术特征摘要】
EP 2002-2-15 02075611.01.金雀异黄素成分在生产一种用于控制哺乳动物的血浆金雀异黄素浓度以避免激活过氧化物酶体增殖因子活化的受体γ(PPARγ)的方法的组合物中的用途，所述方法包括如下步骤a.评价所述哺乳动物的血清金雀异黄素浓度；b.如果需要，给所述哺乳动物施用一种金雀异黄素成分，其量足以在每天至少8个小时内、优选在每天至少16个小时内将血清金雀异黄素浓度维持在0.02μM和3μM之间的水平；c.在至少30天的期间内反复进行步骤a和b，且间隔为不超过3天。2.根据权利要求1的用途，其中血清金雀异黄素浓度是根据所述哺乳动物近期的饮食而评价的。3.根据权利要求1或2的用途，如果需要，其中金雀异黄素成分以足以将血清金雀异黄素浓度提高到能刺激骨发生的水平的量施用于所述哺乳动物。4.根据权利要求1-3中任一项的用途，用于预防肥胖症或预防一些疾病或情况例如骨质疏松症、Paget病、肿瘤患者的溶骨性转移灶、肝病的骨营养障碍、肾功能衰竭或血液透析引起的骨代谢改变、骨折、骨科手术、妊娠、哺乳、神经性厌食、或制动者、非承重者、营养不良者或减肥者的骨质丢失。5.根据权利要求1-4中任一项的用途，其中金雀异黄素成分以低于能够将血清金雀异黄素浓度升高到激活PPARγ引起脂肪生成的水平的量而施用。6.根据权利要求1-5中任一项的用途，其中在至少30天的期间内，每日施用的金雀异黄素成分的量波动在最小量和最大量之间，两者相差至少3倍。7.根据权利要求1-6中任一项的用途，其中金雀异黄素成分至少每周施用一次。8.根据权利要求1-7中任一项的用途，其中金雀异黄素成分包括一种或多种以下...

【专利技术属性】
技术研发人员：伊内兹舍马克斯，党志超，克莱门丝沃特鲁斯赫拉尔杜斯玛丽亚，阿德里安努斯兰伯特斯贝特霍尔德斯范，罗伯特约翰约瑟夫哈格曼，马里安格罗斯范赫斯特，
申请(专利权)人：努特里奇亚有限公司，
类型：发明
国别省市：NL[荷兰]