氧化低密度脂蛋白衍生物治疗动脉血栓形成的活性物质制造技术

氧化低密度脂蛋白衍生物作为动脉硬化和血栓形成诱导免疫口服耐受的药物，其特征在于：其中的氧化低密度脂蛋白衍生物是一种结构为７－酮胆固醇酯的ω－ＣＯＯＨ系列衍生物，７－酮胆固醇酯的ω－ＣＯＯＨ系列衍生物单独或与β↓［２］－ＧＰＩ联合组成的药物。这些抗原决定基由于能够进行化学合成，较之ｏｘＬＤ具有性质稳定、价廉低成本易于操作和储存等优点。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种氧化低密度脂蛋白系列衍生物作为治疗动脉血栓形成的应用，还可以用于治疗自身免疫性疾病如抗磷脂综合症或动脉血栓症。进一步的涉及的活性物质为(1)、7-ketocholesteryl-9-carboxynonanoate；(oxLig-1)(2)、7-ketocholesteryl-13-carboxytridecanoate；(13-COOH-7KC)(3)、7-ketocholesteryl-12-carboxy(keto)dodecanoate(oxLig-2)技术背景免疫耐受是一种机体免疫系统对再次接触的特异性抗原呈现无应答或低应答的现象。机体对自身抗原通常呈自身耐受。机体自身免疫耐受的崩溃，产生自身抗体等自身免疫应答，形成自身免疫性疾病。在自身免疫性疾病中，口服耐受是用于描述减弱自身免疫疾病的免疫应答的免疫术语。通过给动物喂食“致病抗原”而产生的耐受，由于对免疫应答的麻痹作用，可以消除或减弱疾病的发生。口服耐受已经应用于自身免疫疾病领域中，如给与风湿性关节炎患者口服胶原蛋白II和热休克蛋白HSP-65进行口服免疫耐受治疗时，促使机体的自身免疫耐受恢复，患者的病情得到了显著的抑制和改善，此外，在糖尿病、多发性硬化症、类风湿性关节炎等疾病中，应用口服免疫耐受治疗方法也开展了人体实验。所以，对于自身免疫性疾病的治疗来说致病性自身抗原的确认是至关重要的。隶属于系统性红斑狼疮症的抗磷脂综合症(antiphospholipidsyndrome；APS)正是一种临床上十分难治的一类自身免疫性疾病，其临床的主要症状就是动脉硬化以及动静脉血栓的形成、胎盘血管的病变导致的习惯性流产和血小板减少等症状。血清学特征为大量自身抗体的存在。其中抗心磷脂抗体由于与血栓形成、血小板减少、系统性红斑狼疮、习惯性流产等凝血系统改变密切相关，所以抗心磷脂抗体可作为系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的辅助诊断指标及抗磷脂综合症诊断依据之一，也可作为临床上预测血栓形成趋势的标志。研究证实抗心磷脂抗体(aCL)的真正抗原并不是心磷脂Cardiolipin，而是存在于血清中的一种糖蛋白β2-glycoprotein I(β2-GPI)。所以抗心磷脂抗体也被称为抗β2-糖蛋白I(β2-glycoprotein I；β2-GPI)抗体。Romero(Br.J.Rheumatol.37883-888，1998.)等报告指出，抗β2-糖蛋白I(β2-GPI)抗体可能是APS患者发生动脉血栓的一种标志，抗心磷脂抗体(aCL)既抗β2-GPI抗体导致的血栓形成机理仍然不明，主要有A.凝固亢进细胞膜由磷脂双分子层构成，疏水部分朝向细胞膜内侧。血小板和血管内皮细胞的细胞膜外侧主要富含有神经磷脂(鞘磷脂)，内侧则主要由磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇等阴性磷脂组成。血小板受到活化时如果血管内皮细胞受到破坏，细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸即向着细胞膜外侧移行，血液凝固开始。β2-GPI通过与移行到细胞膜外侧的阴性磷脂酰丝氨酸的结合而与血管内皮细胞结合，产生抑制血液凝固的作用。但是，APS患者血清中存在的抗β2-GPI抗体与β2-GPI的结合消除了β2-GPI的抗血液凝固作用。所以APS患者发生血液凝固亢进。虽然多数学者倾向于这种可能的发病机制，但in vivo有关抗β2-GPI抗体与这些细胞结合的证据几乎没有，而且，从理论上讲，由于糖蛋白和糖脂的空间位阻作用及带阴离子磷脂仅限于细胞膜的胞浆内面，因而这种结合是不可能的。B.动脉硬化关于动脉硬化，虽然有血栓学说、血浆浸润学说、流体力学动脉壁代谢异常学说、脂质学说等多种假说，但任何一种单一的假说都不能解释动脉硬化的发生机理。在1976年，Ross(N.Engl.J.Med.295369-377.1976.)等提出了伤害反应学说(response-to-injuryhypothesis)，后来在1986年(N.Engl.J.Med.314488-500，1986).和1993年(Nature.362801-809，1993)Ross对这一学说又进行了修改和补充。既动脉硬化的发生是血管壁细胞与血液细胞在多种炎症性细胞因子和增殖因子作用下，发生相互作用所产生的一种动脉壁对血管损伤的炎症反应过程。单核-巨噬细胞系统是细胞防御中的主要细胞。在动脉硬化发病初期过程中，在各种炎症、细胞因子及增殖因子作用下，单核细胞分化成熟为巨噬细胞，巨噬细胞表面的Scanvenger receptor能够不受调控的识别吞噬氧化后的氧化低密度脂蛋白(oxLDL)的胆固醇酯，形成泡沫细胞，这种泡沫细胞是组成动脉硬化巢的主要成分。而LDL的氧化(oxLDL)被认为是引起粥状动脉硬化和血栓形成的独立危险因子。在动脉粥样硬化的发生发展中，众多的理论研究和实验结果证实了LDL的氧化扮演了非常重要的角色，为了探索动脉粥样硬化的发病机理，在体外研究中，几种主要的LDL的实验模型是MDA-LDL、acetylated-LDL和Cu2+-LDL，在这些实验模型中，Cu2+-LDL显示了作为体外实验模型的优势，Cu2+能够诱导LDL氧化，导致LDL结构的高度破坏，产生了多种oxLDL的氧化产物。Cu2+所导致的LDL的破坏和产生的氧化产物与几种细胞(如血管内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞等)诱导的LDL氧化以及从动脉硬化巢中所提取的oxLDL具有非常相似的性质和结果，而且在动脉硬化巢中提取出来的oxLDL展示了与Cu2+-oxLDL相似的物理和免疫学性质。而MDA是一个亲水性的短链乙醛结构，它很容易从LDL中分离和扩散，在透析之后，oxLDL的TBARS分离物减少到无法检测的低水平。所以，这已经成为一种共识，即将Cu2+-oxLDL作为一种体内外实验研究动脉硬化的自身抗原。β2-GPI是抗磷脂综合症抗心磷脂抗体的主要抗原，具有结合如心磷脂(cardiolipin)等阴性磷脂、活化血小板及雕亡细胞膜表面暴露出来的磷脂酰丝氨酸的性质。近年来，通过对β2-GPI的变异蛋白质及体外合成多肽的研究以及结晶构造体的解析，发现β2-GPI的第五个domain上，特别是C281KNKEKKC288领域存在着与脂质结合的部位，更确切地说，结晶构造体表明，在第五个domain上K317与T318的位置如果发生断裂，β2-GPI与磷脂的结合活性消失。最近，George等报告在对LDL受体缺乏小鼠进行β2-GPI免疫之后，发现β2-GPI促选了小鼠动脉壁脂肪斑的形成。还报告在人动脉硬化巢中含有丰富的β2-GPI，并且是与CD4-阳性淋巴细胞共存。Lin等报告冠心病(CAD)患者血清LDL升高的同时，HDL、apoA-1和β2-GPI显示了低于正常人的水平。越来越多的证据表明β2-GPI卷入了脂蛋白和脂质的代谢中。这些结果和现象与Ross等提倡的伤害反应学说相加在一起，表明既不仅是各种细胞因子和免疫细胞，而且β2-GPI也显示了对动脉硬化发生和发展过程中重要的调节作用。Hasunuma(Clin.Exp.Immunol.，107；569-573，1997.)等首次报告了β2-GPI和抗β2-GPI抗体与巨噬细胞介导的Cu2+-oxLDL吞噬摄取的相关性研究结果。in vitro实验中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种氧化低密度脂蛋白衍生物作为治疗动脉硬化和血栓形成诱导免疫口服耐受的活性物质，其特征在于：氧化低密度脂蛋白衍生物是一种结构为７－酮胆固醇酯的ω－ＣＯＯＨ系列衍生物，７－酮胆固醇酯的ω－ＣＯＯＨ系列衍生物单独或与β↓［２］－ＧＰＩ的组合物。

【技术特征摘要】
1.一种氧化低密度脂蛋白衍生物作为治疗动脉硬化和血栓形成诱导免疫口服耐受的活性物质，其特征在于氧化低密度脂蛋白衍生物是一种结构为7-酮胆固醇酯的ω-COOH系列衍生物，7-酮胆固醇酯的ω-COOH系列衍生物单独或与β2-GPI的组合物。2.如权利要求1所述的氧化低密度脂蛋白衍生物作为动脉硬化和血栓形成诱导免疫口服耐受的药物，其特征在于氧化低密度脂蛋白活性衍生化合物7-酮胆固醇酯的ω-COOH系列衍生物来源于Cu2+氧化的低密度脂蛋白的脂成分。3.如权利要求1所述的氧化低密度脂蛋白衍生物作为动脉硬化和血栓形成诱导免疫口服耐受的药物，其特征在于氧化低密度脂蛋白活性衍生化合物其主要活性成分7-酮胆固醇酯的ω-COOH系列衍生物来源于oxLDL脂中胆固醇亚油酸的氧化产物。4.根据权利要求1所述的氧化低密度脂蛋白衍生物作为动脉硬化和血栓形成诱导免疫口服耐受的药物，其特征在于所述7-酮胆固醇酯的ω-COOH系列衍生物组合物包括Cu2+-oxLDL活性衍生化合物7-酮胆固醇酯的一种或几种ω-COOH衍生物。5.根据权利要求1所述的氧化低密度脂蛋白衍生物作为动脉硬化...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘庆平，刘华，
申请(专利权)人：大连大学，
类型：发明
国别省市：91[中国|大连]