一种新型定位口服药用组合物及其制备方法技术

本发明专利技术介绍了一种胸腺素α１的定位释放于肠道的微球制剂及其制备方法。采用丙烯酸树脂等肠溶材料，加入聚氧乙烯月桂醇醚及月桂氮唑酮等吸收促进剂，制备成微球。在人工胃液溶出２ｈ后，显微镜下观察外形光滑、圆整。在人工肠液１ｈ可释放９５％以上。用ＥＬＩＳＡ法测定胸腺素α１肠溶微球在健康志愿者口服情况，与原料药直接口服相比，微球制剂的胸腺素α１血浆水平可显著提高。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药领域，是的一种胸腺肽α1的新剂型——肠溶微球制剂即定位于小肠释放的制剂及其制备方法。
技术介绍
胸腺素α1(thymosin，简称Tα1)是一种具有免疫功能的多肽，临床上多用于治疗病毒性肝炎，其氨基酸序列为-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-[Glodstein AL，Low TL，McAdoo M，McClure J，et al.Thymosin alpha1isolation and sequence analysis of an immunological active thymic peptide.Proc Natl Acad SciUSA，1977，74(2)725～729]。目前Tα1只有一种剂型——注射用粉针剂，给药途径单一，为皮下注射，且因稳定性方面的原因，对贮存条件及使用过程中要求较高。由于Tα1的适应症是肝炎、恶性肿瘤、免疫缺陷疾病等，用药周期较长，这不仅给患者长期使用带来不便而且也给患者带来不必要的痛苦。因此Tα1的口服制剂是十分需要的。目前尚未见Tα1口服制剂的专利或专利申请。中国专利(专利申请号02136181.9，授权公告号CN1176718C)披露了Tα1微球制剂及其制备方法，其采用乳化剂Tween80或Span80和3～5mg Tα1乳化于10ml含5～20％PLGA的二氯甲烷溶液中，温度为15±2℃，即成Tα1乳剂；在搅拌条件下将制备好的乳剂缓慢滴入含0.5～10％的PVA的水溶液中，搅拌10min，速度为300～1000rpm，再向此体系中倾入500ml蒸馏水，继续搅拌，使有机溶剂挥干形成含药微球。该专利提出的实施例使用小白猪，建立了深II°烫伤模型，使用Tα1微球的创面愈合较未使用者更快。
技术实现思路
蛋白质与多肽类药物口服给药需解决两个问题，一是稳定性问题，因为药物在口服后首先进入胃中，蛋白质与多肽类药物很难承受胃液的强酸性环境，且胃液中还含有胃蛋白酶以及消化道中存在的其他酶对蛋白质产生降解破坏作用；本专利技术人将Tα1制成肠溶微球，在胃中不溶，进入肠道微球中的Tα1溶出，即可避免胃酸与胃蛋白酶对Tα1的破坏作用；另外，在处方中加入透明质酸酶，水解透明质酸，减少透明质酸阻止外来物在组织中的扩散性能，使粘膜的密度降低；因多肽药物的分子量较大，存在着胃肠道细胞的屏障作用，加入吸收促进剂可解决这一问题。一、试剂、材料与仪器D25-2型电动搅拌器，杭州仪表电机厂；7901型电磁台式搅拌器 上海光华仪器仪表厂丙烯酸树脂II号药用级，连云港制碘厂邻苯二甲酸羟丙甲纤维素酯药用级，日本信越(Shin-Etsu Chemical Co.，Ltd)Tα1标准品购自意大利ISFS.P.A.公司，明胶、福氏完全佐剂购自Sigma公司，生物素标记的羊抗兔IgG为Catalog公司产品透明质酸酶Sigma公司明胶青海明胶股份有限公司聚氧乙烯月桂醇醚分析纯，Ubichem公司月桂氮唑酮分析纯，湖北南星化工总厂胆酸钠药用级，四川正东制药有限责任公司卵磷脂药用级，黑龙江鑫威格药业有限公司豆磷脂药用级，上海金伴药业有限公司聚维酮系列药用级，BASF公司亚油酸药用级，哈药集团制药总厂苯甲醇药用级，徐州平光制药有限责任公司乙醇分析纯，北京化学试剂公司二、微球的制备与检测方法1.微球的基本制备方法精密称取Tα1适量溶于0.1mol/L的磷酸盐缓冲液中，精密称取丙烯酸树脂II号及其他成分适量溶于乙醇中，将两种溶液混匀，再于高速搅拌下分散于液体石蜡中，缓慢加入明胶溶液，搅拌至微球固化，离心收集沉淀，用石油醚除去表面的液体石蜡，减压干燥12h即得。对制备出的微球，采用光学显微镜观察微球的外观形态。2.微球抗酸能力的测定称取两份Tα1肠溶微球各0.1g，一份测定其含药量，另一份在37℃ 200ml人工胃液中搅拌2h，离心，取沉淀物测定其中的Tα1保留量，并在光学显微镜下观察微球的形态变化，重复3次。具体测定方法略。3.微球肠溶能力考察称取两份Tα1肠溶微球各0.1g，放射一份测定其含药量，另一份在37℃ 200ml人工肠液中搅拌1h，测定溶液中的Tα1量，计算Tα1的释放度，重复3次。具体测定方法略。4.ELISA法检测Tα1血浆水平及给药方法采用ELISA法测定志愿者血浆Tα1水平。首先测定给药前6名健康志愿者血浆Tα1水平。给予Tα1原料药粉5mg，测定Tα1水平。1周后，再分别给予6名健康志愿者实施例10制备的Tα1微球5mg，测定血浆中的Tα1水平。具体测定方法简述如下以Tα1与BSA的偶联复合体免疫新西兰大白兔制备兔抗Tα1多克隆抗体。以Tα1(200ng/ml)100μl包被酶标板，4℃孵育过夜，洗板后以3％明胶4℃封闭过夜，去除封闭液，洗板后每孔加不同浓度的标准品或待测血浆标本50μl和稀释的抗血清50μl充分混匀，37℃孵育120min，洗板后加入生物素标记的羊抗兔抗体稀释液100μl，37℃孵育60min，洗板后加入亲和素标记的辣根过氧化酶稀释液100μl，37℃孵育60min，洗板后加入OPD显色，在酶标示仪上测490nm的吸光度。所有测定以均值±标准偏差表示，组间比较采用非配对t检验。未给药的空白血浆测定在第1天的上午10:00进行；于第2天上午8:00给予原料药，第9天上午8:00给予肠溶微球，测定口服给予原料药及微球后1、2、5及8小时的血浆Tα1水平。三、实施例实施例1Tα1100mg磷酸盐缓冲液10ml丙烯酸树脂II号 5.0g乙醇适量明胶溶液50ml照以上基本制备方法制备肠溶微球，对制备的微球进行形态观察及抗酸能力与肠溶能力的测定。结果见表1。实施例2Tα1100mg磷酸盐缓冲液 10ml邻苯二甲酸羟丙甲纤维素酯 5.0g乙醇 适量明胶溶液 50ml照以上基本制备方法制备肠溶微球，对制备的微球进行形态观察及抗酸能力与肠溶能力的测定。结果见表1。实施例3Tα1100mg磷酸盐缓冲液 10ml醋酸纤维素酞酸酯 5.0g乙醇 适量明胶溶液 50ml照以上基本制备方法制备肠溶微球，对制备的微球进行形态观察及抗酸能力与肠溶能力的测定。结果见表1。实施例4Tα1100mg磷酸盐缓冲液 10ml虫胶 5g乙醇 适量明胶溶液 50ml照以上基本制备方法制备肠溶微球，对制备的微球进行形态观察及抗酸能力与肠溶能力的测定。结果见表1。实施例5Tα1100mg透明质酸酶 5mg磷酸盐缓冲液10ml丙烯酸树脂II号 5.0g乙醇适量明胶溶液50ml照以上基本制备方法制备肠溶微球，其中透明质酸酶与Tα1一同溶解于磷酸盐缓冲液；对制备的微球进行形态观察及抗酸能力与肠溶能力的测定。结果见表1。实施例6Tα1100mg透明质酸酶5mg磷酸盐缓冲液 10ml丙烯酸树脂II号5.0g聚氧乙烯月桂醇醚 2mg乙醇 适量明胶溶液 50ml制备方法同实施例5，其中聚氧乙烯月桂醇醚与其他成分一同溶解于乙醇中；对制备的微球进行形态观察及抗酸能力与肠溶能力的测定。结果见表1。实施例7Tα1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新型定位与小肠或结肠释放制剂－口服胸腺肽α↓［１］肠溶制剂，其包括胸腺肽α↓［１］，吸收促进剂，明胶和肠溶材料等。

【技术特征摘要】
1一种新型定位与小肠或结肠释放制剂——口服胸腺肽α1肠溶制剂，其包括胸腺肽α1，吸收促进剂，明胶和肠溶材料等。2.权利要求1的口服胸腺肽α1肠溶制剂，其中吸收促进剂选自聚氧乙烯月桂醇醚、月桂氮唑酮、胆酸钠、甘氨胆酸钠、牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠、癸酸、癸酸钠、油醇、油酸、β-环糊精、EDTA-Na2、羟丙基-β-环糊精、卡波姆、氧乙醇、十二烷基硫酸钠、苄泽、吐温、司盘、桉叶油醇、薄荷脑、冰片、甘草次酸、丙二醇、甘油、乙醇、甘露醇、枸橼酸、磷酸盐缓冲液、水杨酸钠、卵磷脂、豆磷脂、聚维酮、苯甲醇、亚油酸、苯甲酸苄酯、油酸乙酯及尿素，吸收促进剂可选用以上中的一种或数种。3.权利要求1的口服胸腺肽α1肠溶制剂，其中吸收促进剂最优为聚氧乙烯月桂醇醚、月桂氮唑酮合并使用。4.权利要求1的口服胸腺肽α1肠溶制剂，其中肠溶材...

【专利技术属性】
技术研发人员：王家权，徐小虎，于晓军，董红梅，王晋，吕俊耀，
申请(专利权)人：汕头大学医学院，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]