脱纤因子在制备治疗和/或预防血管疾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及脱纤因子用于制备治疗和／或预防血管疾病的药物的用途，所述的脱纤因子是从哺乳动物组织中提取得到的一种单链核苷酸混合物，本发明专利技术的脱纤因子对血管疾病有明显的治疗作用。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物化学领域。具体而言，本专利技术涉及脱纤因子的新医药用途， 即脱纤因子在制备治疗和/或预防血管疾病药物中的应用。
技术介绍
血管疾病是指涉及到血管方面的疾病，包括心脑血管病、周围血管病等。血 管疾病是临床十分常见的危害人类健康的最大疾病，其死亡率高，并伴发严重并 发症，因此，展开对血管疾病的防治研究是当今医学和药学中一项重大难题。急性冠脉综合征属于心血管疾病的范畴，包括不稳定心绞痛和急性心肌梗 塞。不稳定心绞痛是心肌急剧的暂时的缺血与缺氧所引起的临床症状。急性心肌 梗塞是由于冠状动脉粥样硬化、血栓形成或冠状动脉持续痉挛，导致冠状动脉或 分枝闭塞，造成心肌因持久缺血缺氧而发生坏死。脑梗塞(又称脑卒中)是脑血管病中的一种，其是管腔狭窄，或栓塞, 甚或闭塞时出现的症状。脑梗塞包括脑血栓形成和脑栓塞，脑血栓是由于动脉粥 样硬化、动脉内膜炎以及血液粘稠度高，导致脑血管局部形成血栓，堵塞血管引 起的症状。脑栓塞是血管其他部位的栓子如心脏病的附壁血栓，主动脉、颈动脉 等的血栓呈动脉硬化斑块脱落，盆腔及下肢静脉血栓脱落，骨折时脂肪栓子等运 行到脑部引起血栓塞时出现的症状，多发生于心脏病病人。当脑部动脉管腔狭窄 或闭塞，导致急性脑供血不足，引起局部脑组织缺血、缺氧而发生坏死，出现一 系列的临床症状。外周动脉疾病和深静脉血栓形成是外围血管疾病的两种重要类 型。外周动脉疾病(Peripheral Artery Disease, PAD)是指除冠状动脉之外的主 动脉及其分支动脉的狭窄、闭塞或瘤样扩张疾病，如为下肢、足、肾和肠供血的 动脉。PAD最常见的病因是由于外周动脉的动脉粥样硬化导致动脉狭窄病变， 使得流向下肢的血流减少。PAD可导致心肌梗死、脑卒中、心血管死亡、肢端的截肢、主动脉瘤的破裂、严重髙血压、肾衰等严重疾病。深静脉血栓形成是发生于人体四肢深静脉内的病变，这些血管内的血液因某 些不良因素的影响而发生凝固，阻塞血管导致血液回流障碍，并引起相应的临床 症状。临床上多见于下肢，特别是左下肢。血栓形成原因主要有三大要素静脉 壁损伤、静脉血流滞缓和血液高凝状态。现有的心脑血管类的药物如速效救心丸、地奥心血康、硝酸甘油等，在缓解 症状、改善循环机能状态等方面有一定的疗效，但上述药物疗效单一，易产生耐 药性，不能长期持续使用药，而且对病情严重的病人如脑血栓、心肌梗塞等疗效 差。有些西药虽然有一定疗效，但副作用大，不适宜临床长期使用。总之，目前治疗血管疾病的药物虽多，但显效的少，疗效单一，副作用大， 因此，在临床上需要不断研究开发副作用小、疗效显著的治疗血管疾病的药物。
技术实现思路
本专利技术人经过认真研究和动物试验发现，从哺乳动物组织中提取的脱纤因子 对血管疾病有明显的治疗和/或预防作用，而且脱纤因子来自于天然源，对人体 无副作用，其对血管疾病的治疗和预防药效显著。因此，本专利技术的目的是提供脱纤因子在制备治疗和/或预防血管疾病药物中 的应用。本专利技术的另一目的涉及脱纤因子的制备方法。本专利技术的脱纤因子是从哺乳动物组织中提取得到的一种单链核苷酸混合物， 其平均分子量约在15 75 kDa之间，优选约在20 50kDa之间，其具有以下分 子式-P5， (dAp) 12-24， (dGp) 10_20, (dTp) 13墨26， (dCp) i0—20式中P为磷基dAp为脱氧腺苷酸的单体dGp为脱氧鸟苷酸的单体dTp为脱氧胸苷酸的单体dCp为脱氧胞苷酸的单体。 该脱纤因子具有以下物理化学性质电泳-均匀阳极的迁移率；消光系数， 在260土lnm处的Elcm1%=220±10;消光比，E23()/E26o=0.45±0.04;摩尔消光系数(以磷表示)，e (P) =7.750±0.500;旋光度[a ]D20 =53°±6;在天然DNA中以％表示的可逆增色性，h=15±5。本专利技术的脱纤因子的可逆增色性(h)可由下列公式计算OD26o (热或碱性pH)_h= - — 1OD260 (室温或中和pH)分别测定脱纤因子在260nm溶液中被加热然后冷却，或使其呈碱性然后中和使其 pH为5时的光密度(OD)值，由公式计算出可逆增色性。本专利技术的脱纤因子是从哺乳动物组织中提取得到的，特别是牛、羊、猪或 马的肺、肠、肝脏、胸腺或粘膜组织。本专利技术所述的血管疾病包括急性冠脉综合征如不稳定心绞痛、急性心肌梗 塞；脑梗塞；外周动脉疾病，即除冠状动脉之外的主动脉及其分支动脉的狭窄、 闭塞或瘤样扩张疾病；深静脉血栓等。本专利技术的脱纤因子的制备方法包括以下步骤-a) 研磨哺乳动物组织，在酸性pH条件下，加入蛋白酶，加热使其蛋白水 解；b) 将物料加热至沸腾，停止蛋白水解； C)过滤并浓縮溶解产物；d) 在浓縮液中添加能够沉淀磷酸盐的阳离子盐，调节pH值使其为酸性e) 在沉淀悬浮液的恒容条件下过滤，以分离出存在于溶液中的多糖部分；f) 在得到的核酸不溶性盐的悬浮液中加入水溶性碱金属盐，以溶解核酸， 在保持恒容的条件下，经过滤从溶液中消除不能溶解的阳离子；或者将 得到的核酸不溶性盐的悬浮液进行离子交换来除去不溶性阳离子；g) 将浓縮液在滤膜上进行切线流分离过滤，浓縮，添加水溶性碱金属盐使 核酸溶液的阳离子强度达到至少1摩尔，然后调节溶液的pH值直至分 光光度分析在260nm处显示最大可逆增色反应，即达到了最大可能的聚 合反应；h) 将溶液加热至60—90'C，进行解聚，通过测量可逆增色性的变化值h 来控制解聚过程，直到该值达到以天然DNA的百分数表示是15土5时为止；i)通过冷却，终止解聚反应，调节PH至碱性；j)在高于解聚步骤的温度条件下，加热上一步得到的溶液，维持20_60分钟，以稳定核苷酸的结构； k)热过滤，透析除去溶液中的盐杂质，并尽可能地浓縮； 1)用乙醇从浓縮液中沉淀出最终产物，用乙醇洗涤沉淀物，在真空下干燥即得。在本专利技术脱纤因子的制备方法的步骤a)中，采用蛋白水解酶例如木瓜蛋白 酶、tripsin等，将pH调整到4一6.5，在温度10—9(TC条件下，进行蛋白水解， 时间为0. 5-IO小时。在本专利技术脱纤因子的制备方法的步骤b)中，将物料加热至沸腾5 — 20分钟， 停止蛋白水解。在本专利技术脱纤因子的制备方法的步骤c)中，采用切向流膜过滤，选用的切 向流膜是截留分子量为50， 000—100， 000道尔顿的管式薄膜Romicon。在本专利技术脱纤因子的制备方法的步骤d)中，所述的阳离子盐例如钙、锌的 卤化物、硫酸盐、碳酸氢盐、乙酸盐等，采用酸调节pH至2 — 5，在该步骤中， 使核酸沉淀，从而保证多糖部分留在溶液中。在本专利技术脱纤因子的制备方法的步骤e)中，沉淀悬浮液在恒容条件下通过 孔径为0.45um或更小的如Romincon管式膜进行切向流过滤，除去多糖部分， 切向流膜过滤中，采用与d)步骤中相同的阳离子盐的水溶液，连续补充入悬浮 液中，以保持恒容过滤，直至滤液中不存在多糖物质。在本专利技术脱纤因子的制备方法的步骤f)中，所述的水溶性碱金属盐为钠、 钾的卤化物或乙酸盐，将悬浮液通过能截留分子量小于10000的滤膜Romicon进 行切向流过滤，向浓縮液中加入同样的水溶性碱金属盐溶液，以保持恒容过滤， 直至滤液中没有不溶性阳离子存在。在本专利技术脱纤因子的制备本文档来自技高网...

【技术保护点】
脱纤因子在制备治疗和／或预防血管疾病药物中的应用，该脱纤因子是从哺乳动物组织中提取得到的一种单链核苷酸混合物，其平均分子量约在１５～７５ｋＤａ之间，优选约在２０～５０ｋＤａ之间，其具有以下分子式：Ｐ↓［１－５］，（ｄＡ↓［ｐ］）↓［１２－２４］，（ｄＧ↓［ｐ］）↓［１０－２０］，（ｄＴ↓［ｐ］）↓［１３－２６］，（ｄＣ↓［ｐ］）↓［１０－２０］式中：Ｐ为磷基ｄＡ↓［ｐ］为脱氧腺苷酸的单体ｄＧ↓［ｐ］为脱氧鸟苷酸的单体ｄＴ↓［ｐ］为脱氧胸苷酸的单体ｄＣ↓［ｐ］为脱氧胞苷酸的单体。

【技术特征摘要】
1.脱纤因子在制备治疗和/或预防血管疾病药物中的应用，该脱纤因子是从哺乳动物组织中提取得到的一种单链核苷酸混合物，其平均分子量约在15～75kDa之间，优选约在20～50kDa之间，其具有以下分子式P1-5，(dAP)12-24，(dGp)10-20，(dTp)13-26，(dCp)10-20式中P为磷基dAP为脱氧腺苷酸的单体dGp为脱氧鸟苷酸的单体dTp为脱氧胸苷酸的单体dCp为脱氧胞苷酸的单体。2. 根据权利要求1所述的应用，其中脱纤因子具有以下物理化学性质电 泳=均匀阳极的迁移率；消光系数，在260土lnm处的E,C二220土10...

【专利技术属性】
技术研发人员：李德明，
申请(专利权)人：李德明，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]