本发明专利技术涉及医药技术领域。核心蛋白聚糖（Ｄｅｃｏｒｉｎ）是富含亮氨酸硫酸的硫酸软骨素蛋白聚糖（ＣＳＰＧ）家族的成员，其生物学功能方面大量研究集中在其抑制肿瘤生长、防止肾小球、肺、肝等组织纤维化的作用上。本发明专利技术通过对脑缺血的整体动物实验和体外细胞实验证明，核心蛋白聚糖（Ｄｅｃｏｒｉｎ）通过降低血管通透性以及炎症反应减少由于缺血造成的血栓形成，从而发挥治疗缺血性脑血管疾病作用。因此，本发明专利技术提供的核心蛋白聚糖（Ｄｅｃｏｒｉｎ）具有在制备防治缺血性脑血管病药物中良好的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药
，是核心蛋白聚糖(decorin， DCN)在制备治疗 缺血性脑血管疾病药物中的应用。
技术介绍
Decorin是富含亮氨酸硫酸的硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPG)家族的成员， 它的核蛋白是由12个重复的序列组成，这一重复序列是由一个富含亮氨酸的24 个氨基酸残基区域构成的，这一核蛋白构成了80。/。的蛋白部分。(Cabello-Verrugio C, Brandan E. A novel modulatory mechanism of transforming growth factor- 3 signaling through Decorin and LRP-1. J Biol Chem. 2007; 282: 18842-18850)其实早在1986年已报道其蛋白序列并克隆出人源的decorin蛋白聚糖(T Krusius and E Ruoslahti. Primary structure of an extracellular matrix proteoglycan core protein deduced from cloned cDNA. Proc Natl Acad Sci USA. 1986 October; 83(20): 7683 - 7687.)。之后，在研究其生物学功能上，大量研究集中在其抑制 肿瘤生长、防止肾小球、肺、肝等组织纤维化的作用上。(ReedCC, WaterhouseA, Ki勿S, Kay P， Owens RT, McQuillan DJ, Iozzo RV. Decorin prevents metastatic spreading of breast cancer. Oncogene. 2005; 24: 1104-1110; RUhland C, Sch6nherr E， Robenek H, Hansen U， Iozzo RV, Bruckner P, Seidler DG. The glycosaminoglycan chain of decorin plays an important role in collagen fibril formation at the early stages of fibrillogenesis. FEBS J. 2007 Aug; 274(16):4246-55)此外，还有报道 decorin参与中枢神经系统损伤后的修复，实验表明，当给予外源性decorin时， 可促进损伤的神经轴突的再生。(Stichel， C.C., Kappler, J.， Junghans, U., Koops, A., Kresse， H. and Muller, H.W Differential expression of the small chondroitin/dermatan sulfate proteoglycans decorin and biglycan after injury of the adult rat brain， Brain Res， 704 (1995) 263-74.)尚未见decorin用于治疗缺血性脑血管疾病方面的文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供核心蛋白聚糖(decorin)的药学新用途。本专利技术提供了核心蛋白聚糖(decorin)在制备治疗缺血性脑血管疾病药物中 的应用。本专利技术中的核心蛋白聚糖(decorin)直接购买自Sigma生物试剂公司生产的 核心蛋白聚糖(decorin)，此核心蛋白聚糖(decorin)是从牛关节软骨提取的，浓度 为0.5 mg核心蛋白聚糖(decorin)溶于0.25 ml磷酸盐缓冲液。本专利技术通过体内动物实验表明decorin对小鼠脑缺血再灌注损伤引起的脑梗 塞有显著保护作用。本专利技术通过体外细胞实验表明decorin通过与MMP-2相互作用，降低血管 通透性，减少炎症反应及血栓的形成，从而发挥治疗缺血性脑血管疾病作用。本专利技术提供的核心蛋白聚糖(decorin)在制备治疗缺血性脑血管疾病药物中 的应用，其中的缺血性脑血管疾病是指脑梗塞、脑动脉硬化……。本专利技术的核心蛋白聚糖可以按照常规药剂学方法制备成注射液形式。附图说明图1为TTC染色后的脑切片扫描图，显示不同组别小鼠脑缺血模型中脑梗死面 积。其中A为假手术组；B为手术组；C为核心蛋白聚糖(decorin)药物组。 图2为免疫印迹图，即不同浓度的溶血性磷脂酰胆碱(LysoPC)刺激脑微血管内皮 细胞MMP-2的表达以及核心蛋白聚糖(decorin)作用于脑微血管内皮细胞被 LysoPC刺激后MMP-2的表达差异。图3为凝胶定量统计图，利用Quantity One软件分析图2中MMP-2在免疫印迹 反应中的表达差异。具体实施例方式下面结合附图及实施例对本专利技术进行详细描述。 实施例1:核心蛋白聚糖(decorin)用于治疗缺血性脑血管疾病的体内动物实验小鼠线栓法制作局灶性脑缺血模型的药理实验是验证药物具有防治缺血性 脑血管病作用常用的动物实验，因此用其验证核心蛋白聚糖(decorin)对实验性动 物脑缺血的保护作用。 1.动物ICR小鼠，25-28g,雄性，每组8只/笼群养，共分3组。购于中国科学院上 海实验动物中心(动物合格证号中科沪动管字99一003号)。词养于清洁级动 物房。2. 药物根据不同的组合，将实验小鼠进行分组假手术组(A):不给予任何药物。手术组(B):给予与药物实验组等量的生理盐水。核心蛋白聚糖(decorin)药物组(C):给予0. 2ml0. 2y。核心蛋白聚糖(decorin) (Sigma公司生产，浓度为0.5mg/0.25ml)。3. 实验方法将小鼠用10%水合氯醛(350 mg/kg)腹腔注射麻醉，颈部正中切口，逐 层分离并暴露右侧颈总动脉，小心分离右侧颈总动脉颈内动脉、颈外动脉，分 离右侧颈外动脉，用6—0号丝线结扎其远端，在右颈总动脉分叉至前一颈外动 脉结扎线之间打一松结，游离右颈内动脉并用微血管夹夹闭；用胰岛素针头挑 破颈内动脉，将拴塞线插入小鼠颈内动脉向前徐进约lcm直至感受到砠力；将 尼龙线与颈外动脉同时结扎以固定尼龙线，防止出血和栓子滑出。此时插入的 尼龙线正好封闭大脑中动脉开口，阻断大脑中动脉血流。缝合皮肤，术毕。术 后2h将尼龙线从颈内动脉中拔出，直至头端达颈总动脉分叉处。再灌注24h。 假手术组除不插线外，其余步骤同上。再灌注24h后存活的小鼠断头取脑，迅 速置-20。C冷冻箱中冷冻5 min后取出，在操作台上迅速由前向后行厚2.0 mm的 冠状切片，将切片立即置于1^的TTC磷酸盐缓冲液中，避光常温孵育30min。 每隔10min翻动脑片使均匀接触到染色液，扫描观察染色结果。4. 试验结果脑梗死体积观察由于TTC是脂溶性光敏感复合物，是呼吸链中吡啶-核 苷结构酶系统的质子受体，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织 内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白。因此，假手术组(A)脑 组织无梗塞，手术组(B)缺血侧脑组织有明显梗塞现象，脑片梗塞区占整个冠 面的百分比为32.7±3.0%。核心蛋白聚糖(decorin)治疗组(C)本文档来自技高网...
【技术保护点】
核心蛋白聚糖在制备治疗缺血性脑血管疾病药物中的应用。
【技术特征摘要】
1、核心蛋白聚糖在制备治疗缺血性脑血管疾病药物中的应用。2、 根据权利要求1所述的核心蛋白聚糖在制备治疗缺血性脑血管疾病药物中的 应用，其特征在于缺血...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨鹏远，芮耀诚，卢玲，宋旭辉，熊青卉，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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