迷迭香酸、含迷迭香酸的夏枯草有效组分及其制备方法和其在防治癌症术后转移方面的应用技术

本发明专利技术公开了一种迷迭香酸、含迷迭香酸的夏枯草有效组分及其提取分离制备方法，此外还公开了迷迭香酸或／和含迷迭香酸的夏枯草有效组分在制备预防或治疗癌症术后转移药物中的应用，公开了含有预防或治疗癌症术后转移有效量的迷迭香酸或／和含迷迭香酸的夏枯草有效组分的药物组合物。本发明专利技术公开的迷迭香酸及含其的夏枯草有效组分是经过对夏枯草进行提取、分离得到。经药效学实验研究表明，用本发明专利技术方法制得的迷迭香酸及含其的夏枯草有效组分具有抗癌症转移的作用，可用于制备预防或治疗癌症转移的药物。

【技术实现步骤摘要】
迷迭香酸、含迷迭香酸的夏枯草有效组分及其制备方法和 其在防治癌症术后转移方面的应用
本专利技术属中医药领域，具体涉及迷迭香酸及含迷迭香酸的夏枯草有效组分及其 提取分离方法和其在制备预防或治疗癌症术后转移药物中的应用。
技术介绍
迷迭香酸(Rosmarinicacid,简称 RosA)的化学名为 R(+) 2-((3-(3，4- 二羟基苯基-1-氧代-2丙烯基)氧基)3，4-二羟基苯丙酸丨，是一种水溶性多酚类化合物，在 植物中的分布较为广泛，主要存在于唇形科、紫草科、葫芦科、椴树科、伞形科的多种 植物中，中国专利申请公开说明书CN1995007A(申请号200510131U9.7，公开日2007 年7月11日)公开了从含迷迭香酸的药材中制备迷迭香酸的方法。迷迭香酸具有抗菌、抗炎、抗过敏、护肝、抗血小板和血栓、抗抑郁、防紫外 线等作用。近年来迷迭香酸在抗肿瘤方面所表现的作用，逐渐引起广大研究者重视。 Miyako等研究结果表明迷迭香酸对Hela细胞、B16F10具有明显的抑制作用，GI5tl分别为 75 μ g/ml和16 μ g/ml，而对MK-1细胞抑制作用非常弱(GI5tl为119 μ g/ml)。Kang等、 Ahn等、Yun-Gyoung等分别报道了迷迭香酸抑制淋巴细胞的增殖的不同机理。Scheckel 等研究发现迷迭香酸可以抑制COX-2活性从而可以防治结肠癌。中国专利申请公开说明 书CN101020637A(申请号200710067381.5，公开日2007年8月22日)公开了一种从 植物肿节风制备迷迭香酸的方法和由迷迭香酸、含迷迭香酸总多酚以及迷迭香酸衍生物 制备的各种药物在抗消化道肿瘤(包括胃、胰腺、肝、食道、直肠、结肠等恶性肿瘤)及 其他肿瘤的作用，药效实验主要以肿瘤生长抑制率为指标。肿瘤的治疗是一个复杂过程，包括抗原发瘤生长、抗复发或抗转移。目前肿瘤 治疗首选手术切除。以大肠癌为例，在我国大肠癌发病率和死亡率分别位于恶性肿瘤的 第三位和第四位。在欧美发达国家其发病率和死亡率居第二位。大肠癌手术后绝大多 数病人复发于手术后2年内。50%大肠癌患者经根治手术后可出现复发或转移，其中 20%-30%患者发生局部复发，50%-80%患者远处转移。只有小于15%患者发生单一部 位且有再次根治可能。美国癌症协会的研究也发现，癌症转移是90%的癌症病人死亡的 原因，因此阻止癌细胞转移是最有效的治疗癌症手段。而肿瘤转移包括原发癌生长、肿 瘤血管形成、瘤细胞脱落并侵入基质、进入脉管系统、癌栓形成、继发组织器官定位生 长、转移癌继续扩散等过程，与原发癌相比有其独特的特点。由于肿瘤的转移是一个复 杂的连续的多步骤过程，一般来说，恶性肿瘤的转移扩散起始于肿瘤细胞穿过基底膜向 其邻近组织的侵袭浸润。在此过程中，肿瘤细胞至少有三方面的性质起着关键作用，即 肿瘤细胞间的同质粘附力、肿瘤细胞的趋化运动能力以及肿瘤细胞降解细胞外基质或基 底膜的能力，在肿瘤细胞转移过程中起着非常重要的作用。由此可见，治疗或预防癌症 术后转移的药物应具有抗肿瘤细胞粘附、移动和浸润的能力，并可有效的抑制瘤重和减 少转移灶数。夏枯草为唇形科植物夏枯草(Pmnella.VUlgariSL.)的干燥果穗，具有清火，明目，散结，消肿之功效。现代药理学研究发现夏枯草具有降压、降血糖、细胞毒、抗病 毒、抗菌、抗氧化、抗过敏、免疫活性和抗炎活性等多种作用。临床上以单味夏枯草制 得的夏枯草注射液用以治疗肺癌胸水、白血病、中晚期胃、大肠癌等疗效显著。中国专 利申请公开说明书CN101317883A(申请号200710041690.5，公开日2008年12月10日) 公开了夏枯草活性部位及其在制备药物组合物中的应用。但迄今未见有关迷迭香酸或含 有迷迭香酸的组合物治疗或预防癌症术后转移的药理作用的报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题之一是提供一种含迷迭香酸的夏枯草有效组分。本专利技术要解决的技术问题之二是提供一种迷迭香酸。本专利技术要解决的技术问题之三是提供该含迷迭香酸的夏枯草有效组分的制备方 法。本专利技术要解决的技术问题之四是提供该迷迭香酸的制备方法。本专利技术要解决的技术问题之五是提供上述迷迭香酸和/或含迷迭香酸的夏枯草 有效组分在制备防治癌症术后转移药物中的应用。本专利技术要解决的技术问题之六是提供一种防治癌症术后转移的药物组合物。中国专利申请公开说明书CN101317883A(申请号200710041690.5)公开了夏枯 草活性部位及其在制备药物组合物中的应用。本专利技术以夏枯草活性部位(HPLC图谱见图 1)的研究为基础，对夏枯草活性部位进一步分离纯化，得到含迷迭香酸的夏枯草有效组 分(HPLC图谱见图2、和迷迭香酸(HPLC图谱见图幻，其具有抗肿瘤细胞粘附、移动和 浸润的能力，并可有效的抑制瘤重和减少转移灶数。在本专利技术的一方面，提供一种含迷迭香酸的夏枯草有效组分，该有效组分是以 夏枯草药材为原料，通过提取分离而获得，其主要由迷迭香酸、迷迭香酸盐(迷迭香酸 钠)和甲酸钠组成，其中迷迭香酸含量占30% (峰面积归一化法)以上。在本专利技术的另一方面，提供一种迷迭香酸，该迷迭香酸由上述含迷迭香酸的夏 枯草有效组分进一步分离纯化而得，或对夏枯草分离纯化所得，其含量占95%以上。在本专利技术的另一方面，提供了含迷迭香酸的夏枯草有效组分的制备方法，包括 如下步骤步骤(1)、取夏枯草药材用水煎煮提取，水提液过滤，浓缩后加不同浓度的乙醇 沉淀，取上清液浓缩至一定相对密度的清膏，依次加入酸溶液、碱溶液，冷藏，滤过， 得夏枯草提取液；或取夏枯草药材用水煎煮提取，水提取液经大孔吸附树脂，用70%乙醇洗脱，收 集洗脱液，浓缩至一定相对密度的清膏，得夏枯草提取液；或取夏枯草药材用水煎煮提取，水提取液加吸附澄清剂，放置，高速离心，上清 液浓缩至一定相对密度的清膏，依次加入酸溶液、碱溶液，冷藏，抽滤，得夏枯草提取 液。所述的夏枯草药材用水煎煮提取时夏枯草与水的重量比为夏枯草水= 1 (10 16)，煎煮次数为2 4次；所述的水提取液浓缩至相对密度为1.05 1.09(60 65°C )，放至室温，加 入75% 95%乙醇，使含醇量为70%，冷藏48小时以上，回收乙醇至溶液相对密度为 1.25 1J8(80°C)，放至室温，再以乙醇调含醇量至70% 90%，优选为85%，冷藏48 小时以上，上清液浓缩至1.25 1.28 (80°C )的清膏；所述的大孔吸附树脂为非极性树脂，优选HPD100或DlOl ；所述的吸附澄清剂选自甲壳素、壳聚糖、101果汁澄清剂、ZTC1+1中的任一 种，优选壳聚糖以及ZTC1+1系列中的ZTC-II、ZTC-III ；所述的酸溶液优选PH值为2以下的浓盐酸，碱溶液优选PH值7 8的40%氢 氧化钠溶液；冷藏时间均在M小时以上。步骤O)、夏枯草提取液依次以石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取，提取 液溶剂为(1 幻1。将水饱和的正丁醇萃取部位回收溶剂，水饱和正丁醇提得的部 位即为夏枯草活性部位。步骤(3)、取夏枯草活性部位溶液，采用制备薄层色谱分离的方法，使用展开剂 展开，荧光定位，分取Rf值最小的条带装硅胶柱，甲醇洗脱，回收溶剂，残留物加少量 水溶解，干燥即得含迷本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含迷迭香酸的夏枯草有效组分，其特征在于，该有效组分是以夏枯草药材为原料，通过提取分离而获得，其主要由迷迭香酸、迷迭香酸盐和甲酸钠组成，其中迷迭香酸含量占３０％以上。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘力，徐德生，
申请(专利权)人：上海中医药大学附属曙光医院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]