一种来源于共生梭菌的谷氨酸脱氢酶的突变体及其在L-草铵膦合成中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种来源于共生梭菌（Clostridium symbiosum）的谷氨酸脱氢酶的突变体及其在L‑草铵膦合成中的应用。本发明专利技术通过对谷氨酸脱氢酶与底物结合口袋内的氨基酸残基、分子隧道内的几何形状以及结构域中域域的相互作用进行理性分析设计的突变改造方法，对SEQ ID NO.1所示的共生梭菌来源的野生型谷氨酸脱氢酶进行单位点或多位点突变，所得到的单位点或多位点突变体显著提高了对2‑羰基‑4‑(羟基甲基膦酰基)丁酸的催化活性，在生物催化制备L‑草铵膦中具有应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶突变体及其应用，具体涉及一种来源于共生梭菌的谷氨酸脱氢酶的突变体及其在l-草铵膦合成中的应用，属于谷氨酸脱氢酶的突变体及其应用领域。

技术介绍

1、l-草铵膦（phosphinothricin）是一类含磷生物氨基酸类除草剂，其有效成分为2-氨基-4-（羟基甲基膦酰基）丁酸，最早是由德国hoechst公司采用化学法合成，具有良好的除草活性。草铵膦毒性低，较为安全，在土壤中易于降解，对作物安全，除草谱广，用量少，环境压力小，杀草迅速，可用水做基剂，使用安全方便，这些优于其它除草剂的特点使草铵膦成为世界大吨位的农药品种。

2、生物催化法由于具有专一性强、反应条件温和、收率高、污染小等优点，是制备l-草铵膦的优势方法，其中，以2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸为原料，经l-氨基酸脱氢酶和核苷类辅酶再生酶催化制备l-草铵膦的工艺较为简单经济。l-氨基酸脱氢酶主要包括亮氨酸脱氢酶、丙氨酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶等，其中，谷氨酸脱氢酶（glutamatedehydrogenase，ec 1.4.1.2–1.4.1.4）来源丰富且多样性，在制备手本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种谷氨酸脱氢酶的突变体，其特征在于，所述突变体是将SEQ ID NO .1所示的谷氨酸脱氢酶的氨基酸序列进行A372V、V162L/A372V中的任何一种氨基酸单位点或双位点突变所获得的突变体，其中氨基酸的英文缩写含义如下：A代指丙氨酸，V代指缬氨酸，L代指亮氨酸。

2.一种如权利要求1所述的突变体的编码基因。

3.一种含有权利要求2所述的编码基因的表达盒或嵌合基因。

4.一种含有权利要求2所述的编码基因的重组表达载体。

5.一种含有权利要求4所述的重组表达载体的重组宿主细胞。

6.一种制备如权利要求1所述的突变体的方法，...

【技术特征摘要】

1.一种谷氨酸脱氢酶的突变体，其特征在于，所述突变体是将seq id no .1所示的谷氨酸脱氢酶的氨基酸序列进行a372v、v162l/a372v中的任何一种氨基酸单位点或双位点突变所获得的突变体，其中氨基酸的英文缩写含义如下：a代指丙氨酸，v代指缬氨酸，l代指亮氨酸。

2.一种如权利要求1所述的突变体的编码基因。

3.一种含有权利要求2所述的编码基因的表达盒或嵌合基因。

4.一种含有权利要求2所述的编码基因的重组表达载体。

5.一种含有权利要求4所述的重组表达载体的重组宿主细胞。

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【专利技术属性】
技术研发人员：季盛，陈建华，奚超群，
申请(专利权)人：绍兴东湖高科股份有限公司，
类型：发明
国别省市：