【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药用资源保护,更具体的说是涉及一种优化的雪峰虫草高效遗传转化方法。
技术介绍
1、雪峰虫草是线虫草菌科真菌雪峰虫草菌(ophiocordycepsxuefengensis)寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体,是新发现的一种虫草类真菌,具有良好的药用价值(抗炎、抗肿瘤作用等)。雪峰虫草的发现丰富了虫草资源的多样性,但野生种质资源濒临枯竭,保护与再生研究迫在眉睫。分子改良是定向培育高子实体产量与品质雪峰虫草品种的有效途径。在前期研究中,我们成功建立了peg介导的雪峰虫草原生质体转化体系,但雪峰虫草原生质体的制备及遗传转化效率有限。
2、真菌遗传转化效率的核心取决于原生质体质量与转化条件优化。高效的原生质体制备是转化成功的基础,转化过程中关键条件影响dna递送效率,后期复苏与再生培养能力同样决定转化子产出。
3、因此,建立高效稳定的peg介导的雪峰虫草原生质体遗传转化体系,可用于雪峰虫草菌株突变体库的构建,为后续研究该菌的子实体发育相关基因奠定基础,有助于深入研究发育机制,为雪峰虫草优质
...【技术保护点】
1.一种优化的雪峰虫草高效遗传转化方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述培养为将活化的雪峰虫草菌块接种到PDP液体培养基中,25℃、130rpm恒温暗培养4天;
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述裂解酶液包括1.5%的溶壁酶和1.5%蜗牛酶;
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中酶解处理的参数为:30~34℃、100~130rpm酶解3~3.5h。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)的具体操作为:
【技术特征摘要】
1.一种优化的雪峰虫草高效遗传转化方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述培养为将活化的雪峰虫草菌块接种到pdp液体培养基中,25℃、130rpm恒温暗培养4天;
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述裂解酶液包括1.5%的溶壁酶和1.5%蜗牛酶;
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中酶解处理的参数为:3...
【专利技术属性】
技术研发人员:张水寒,冯晓婷,周融融,刘君,盛欣瑶,
申请(专利权)人:湖南省中医药研究院,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。