一种象草PpPDS基因VIGS沉默体系及其构建方法和应用技术

技术编号:46628295 阅读:0 留言:0更新日期:2025-10-14 21:26
本发明专利技术公开了一种象草PpPDS基因VIGS沉默体系及其构建方法和应用。本发明专利技术提供了VIGS沉默体系在如下至少一种中的应用:A1、沉默象草中目标基因;A2、制备目标基因沉默象草;A3、验证目标基因功能;A4、创制象草种质。本发明专利技术首次成功构建出象草PpPDS基因的VIGS沉默体系,并成功使象草PpPDS基因沉默。采用本发明专利技术的VIGS沉默体系能够有效降低象草PpPDS基因的表达水平,叶片出现白化表型,表明本发明专利技术成功建立了象草PpPDS基因的VIGS沉默体系。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物基因工程,特别是涉及一种象草pppds基因vigs沉默体系及其构建方法和应用。


技术介绍

1、病毒诱导基因沉默(virus-induced gene silencing, vigs)作为一种瞬时转化技术与转基因、基因敲除和反义抑制等方法相比,不需要依赖遗传转化体系就可获得基因沉默植株,具有周期短、成本低等优势,促进了许多因缺乏基因功能信息而受阻领域研究的发展。vigs通过构建一个重组病毒载体携带内源基因的片段进行沉默试验,利用植物自身免疫系统识别病毒和目的基因,同时利用植物转录后基因沉默(post-transcriptionalgenesilencing, ptgs)机制来抑制病毒感染,并下调植物内源基因的表达,使其基因功能丧失或内源mrna表达水平下降。

2、八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase)基因pds是vigs沉默体系中常用的报告基因,当该基因被沉默后,叶绿素被光化降解,导致植物的绿色部分呈现光漂白的表型。bsmv是含α、β、γ三部分基因组的ssrna病毒,其重组的沉默载体已经应用于大麦、小麦、水本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.VIGS沉默体系,其包括载体pCaBS-α、载体pCaBS-β和目标基因的VIGS重组载体;

2.权利要求1所述的VIGS沉默体系在如下至少一种中的应用:

3.一种沉默象草中目标基因的方法,包括如下步骤:

4.一种制备目标基因沉默的象草的方法,包括如下步骤:

5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于:所述侵染的时期为象草茎芽期。

6.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于:所述侵染的方式为真空渗透。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述真空渗透的时间为30-60min。

8.根据权利要...

【技术特征摘要】

1.vigs沉默体系,其包括载体pcabs-α、载体pcabs-β和目标基因的vigs重组载体;

2.权利要求1所述的vigs沉默体系在如下至少一种中的应用:

3.一种沉默象草中目标基因的方法,包括如下步骤:

4.一种制备目标基因沉默的象草的方法,包括如下步骤:

5.根据权利要求3...

【专利技术属性】
技术研发人员:王勇生唐升梅蒋旭
申请(专利权)人:中国农业科学院农业基因组研究所
类型:发明
国别省市:

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