一种大鼠骨钙素重组蛋白、单克隆抗体及其制备方法和应用技术

技术编号:46628218 阅读:0 留言:0更新日期:2025-10-14 21:26
本发明专利技术提供一种大鼠骨钙素重组蛋白,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,编码所述大鼠骨钙素重组蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。通过该重组蛋白作为免疫原获取针对性的单克隆抗体,并利用上述单克隆抗体筛建立一种应用于大鼠骨钙素重组蛋白的双抗体夹心免疫ELISA检测方法或试剂盒,具备较高的检测灵敏度、特异性、高回收率,可以很好应用于大鼠血清的检测,符合市场需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测,具体涉及一种大鼠骨钙素重组蛋白、单克隆抗体及其制备方法和应用


技术介绍

1、骨钙素(osteocalcin,oc)常被作为成骨细胞骨形成的血清标志物,最初被认为只是一种非胶原蛋白,参与骨基质形成和骨基质矿化调控。临床诊断中,通过检测血清中的骨钙素的升高来判断疾病,多见于骨质合成时,尤其是骨损伤后骨质合成早期,绝经后骨质疏松,甲旁亢性骨质疏松症等疾病。

2、oc也称为骨γ-羧谷氨酸(gla)蛋白,是一种含46~50个氨基酸的可分泌蛋白,主要由成骨细胞产生。牙齿的成牙本质细胞和肥大的软骨细胞也能产生少量oc。近年来研究表明,在肾和脑组织中也有oc表达。oc的成熟依赖于羧化酶对其特异位点进行羧基化反应。尚未成熟的oc在氨基酸序列的17,21和24位有3个羧化酶识别位点,与γ-谷氨酰羧化酶(gamma glutamyl carboxylase,ggcx)的单次结合,逐步对这3个位点的谷氨酸残基进行γ羧化修饰。这种羧化反应过程依赖维生素k循环提供二氧化碳,并将氧气作为辅助因子。每一个γ羧化循环将维生素k转化为环氧化物,随即又被维本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种大鼠骨钙素重组蛋白,其特征在于,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.编码权利要求1所述大鼠骨钙素重组蛋白的核苷酸序列,其特征在于,所述核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.一种权利要求1所述大鼠骨钙素重组蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:先将编码所述重组蛋白的基因连接到表达载体中,构建重组质粒;然后将重组质粒转化至感受态细胞,进行诱导表达后纯化,即得所述大鼠骨钙素重组蛋白。

4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,编码所述重组蛋白的基因经过E.coli表达系统密码子优化;

5.一种与权利...

【技术特征摘要】

1.一种大鼠骨钙素重组蛋白,其特征在于,所述重组蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.编码权利要求1所述大鼠骨钙素重组蛋白的核苷酸序列,其特征在于,所述核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.一种权利要求1所述大鼠骨钙素重组蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:先将编码所述重组蛋白的基因连接到表达载体中,构建重组质粒;然后将重组质粒转化至感受态细胞,进行诱导表达后纯化,即得所述大鼠骨钙素重组蛋白。

4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,编码所述重组蛋白的基因经过e.coli表达系统密码子优化;

5.一种与权利要求1所述大鼠骨钙素重组蛋白发生特异性反应的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体包括rat bgp-10a5或rat bgp-7g10;

6.根据权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员:胡勤芹杨飞董栩
申请(专利权)人:伊莱瑞特武汉生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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