【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，特别是涉及rna聚合酶变体、其制备方法及其在rna合成中的应用。
技术介绍
1、真核生物完整的mrna的5’末端有一个7-甲基鸟苷(m7g)帽，在体内通过rna三磷酸酶、mrna鸟苷转移酶、mrna甲基转移酶、mrna核苷2’-氧甲基转移酶催化形成。该5’帽结构参与阻止mrna被核酸外切酶降解、降低mrna免疫原性，调节mrna半衰期以及调控翻译等过程。在体外转录(ivt)制备mrna的过程中，研究人员通常会在制备过程中添加帽子类似物，以模拟真核细胞mrna的5’帽子结构。
2、mrna 5'端的帽子结构对mrna的稳定性、翻译效率和免疫原性等方面具有显著影响。随着研究的不断深入，帽类似物的重要性日益凸显，为此，人们不断发展新型帽子类似物应用于mrna疫苗和治疗性rna。如今，帽子类似物已经发展到了第三代，第一代帽子类似物由于存在两个游离的3’-oh，导致帽子类似物会反向掺入，因此市面上已经很少见一代帽子类似物；市面上常见的主要有二代的arca帽子类似物(式1)和三代的帽子类似物(如式2)，其主要结构式举
【技术保护点】
1.RNA聚合酶变体，其特征在于，所述变体的氨基酸序列相对于SEQ ID NO：1包含至少一个选自下述氨基酸位点的取代：K387、D388或K389。
2.如权利要求1所述的变体，其特征在于，其中：
3.如权利要求1所述的变体，其特征在于，所述变体的氨基酸序列与SEQ ID NO：2-25中任一所述的序列相比，具有至少99％或更高的序列一致性。
4.多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子编码如权利要求1-3中任一所述的变体。
5.表达载体，其特征在于，所述表达载体包含如权利要求4所述的多核苷酸分子。
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【技术特征摘要】
1.rna聚合酶变体，其特征在于，所述变体的氨基酸序列相对于seq id no：1包含至少一个选自下述氨基酸位点的取代：k387、d388或k389。
2.如权利要求1所述的变体，其特征在于，其中：
3.如权利要求1所述的变体，其特征在于，所述变体的氨基酸序列与seq id no：2-25中任一所述的序列相比，具有至少99％或更高的序列一致性。
4.多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子编码如权利要求1-3中任一所述的变体。
5.表达载体，其特征在于，所述表达载体包含如权利要求4所述的多核苷酸分子。
6.宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含如权利要求4中所述的多核苷酸分子或如权利要求5中所述的表达载体。
7.如权利要求1-3中任一所述的变体的制备方法，其特征在于，包括：(1)在适合变体表达的条件下培养如权利要求6所述的宿主细胞；...
【专利技术属性】
技术研发人员：金秋恒，徐晓昱，何伟，李季，原征，
申请(专利权)人：南京诺唯赞生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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