一种可可花瘿病菌的LAMP检测方法技术

本发明专利技术属于病原真菌的检测技术领域，提供了一种可可花瘿病菌的LAMP检测方法，建立可可花瘿病菌快速、灵敏、便捷、可视的环介导等温扩增技术检测方法。结果表明本发明专利技术的检测方法反应时间短、特异性强、灵敏度高、操作简单，且检测结果可视化，适用于可可花瘿病菌的口岸检疫及田间检测，为口岸外来有害生物的快速检测、精准防控和保护我国生态安全提供技术支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于病原真菌的检测，涉及一种可可花瘿病菌，具体涉及一种可可花瘿病菌的lamp检测方法。

技术介绍

1、可可花瘿病菌(albonectria rigidiuscula(berk.&broome)rossman&samuels)是一种检疫性植物病原真菌，其无性阶段为多隔镰刀菌(fusarium decemcellulare，brick)。该病菌寄主范围广泛，可为害可可、芒果、咖啡、番荔枝、罗汉松、玉米、豆科等多种经济作物和观赏植物，引起寄主植物根腐、堵塞维管束，在枝条上形成癌肿，造成萎蔫、畸形，影响植株生长，严重时能够造成植物绝收。病菌通过土壤、繁殖材料(种子及营养繁殖材料)传播，在病组织或土壤中可存活数年。鉴于该病原菌危害严重且防控困难，加强口岸检疫对阻断其跨境传播、保障国内生态安全具有关键性作用。

2、目前，口岸检疫对可可花瘿病菌的鉴定依据检测标准《sn/t 3284-2012》，该标准以形态学鉴定为主，存在培养周期长，近似种鉴别困难等技术局限。虽然国内已有研究利用rdna基因序列分析以及实时荧光pcr技术进行分子鉴定本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测可可花瘿病菌的LAMP引物组，其特征在于，所述LAMP引物组由1对外引物和1对内引物，以及一对环引物LF/LB组成所述外引物为Tub2-F3/Tub2-B3，所述内引物为Tub2-FIP/Tub2-BIP；

2.一种可可花瘿病菌的LAMP检测方法，其特征在于，所述LAMP检测方法的具体步骤包括：

3.根据权利要求2所述的一种可可花瘿病菌的LAMP检测方法，其特征在于，所述LAMP扩增反应的25μL反应体系：2×Reaction Mix反应液12.5μL、5μmol/L的上游外引物和5μmol/L的下游外引物各1μL、40μmol/L的上游内引物和4...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测可可花瘿病菌的lamp引物组，其特征在于，所述lamp引物组由1对外引物和1对内引物，以及一对环引物lf/lb组成所述外引物为tub2-f3/tub2-b3，所述内引物为tub2-fip/tub2-bip；

2.一种可可花瘿病菌的lamp检测方法，其特征在于，所述lamp检测方法的具体步骤包括：

3.根据权利要求2所述的一种可可花瘿病菌的lamp检测方法，其特征在于，所述lamp扩增反应的25μl反应体系：2×reaction mix反应液12.5μl、5μmol/l的上游外引物和5μmol/l的下游外引物各1μl、40μmol/l的上游内引物和40μmol/l的下游内引物各1μl、20μmol/l的上游环引物和20μmol/l的下游环引物各1μl、bst dna聚合酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：李敏，沈建国，虞赟，陈智明，
申请(专利权)人：福州海关技术中心，
类型：发明
国别省市：