一种化学修饰剂及其制备胃蛋白酶的方法技术

本发明专利技术涉及胃蛋白酶制备技术领域，具体为一种化学修饰剂及其制备胃蛋白酶的方法，合成新型复合修饰剂Mal‑PEG‑CMC，通过优化PEG分子量、PEG与马来酸酐摩尔比、CMC取代度及偶联比例，得到水溶性好、偶联率高的修饰剂；基于该修饰剂制备化学修饰胃蛋白酶，经胃蛋白酶纯化、DTT预处理暴露巯基、靶向修饰反应及纯化步骤，获得修饰胃蛋白酶。修饰后的胃蛋白酶性能显著提升，且适用于动物源及重组表达胃蛋白酶，有效突破了天然酶的应用瓶颈，在食品加工、医药等领域具有重要价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及胃蛋白酶制备，具体为一种化学修饰剂及其制备胃蛋白酶的方法。

技术介绍

1、胃蛋白酶作为一种重要的天冬氨酸蛋白酶，广泛应用于食品加工医药领域及生物技术。然而，天然胃蛋白酶存在以下技术瓶颈，如稳定性差，稳定性差，催化效率受环境制约等问题。

2、现有化学修饰技术多采用单功能修饰剂，如聚乙二醇peg、琥珀酸酐，虽能一定程度提高稳定性，但存在修饰位点随机、活性保留率低，通常＜60%、功能单一等问题；例如，传统peg修饰虽能提升热稳定性，但ph适用范围仍局限于ph2.0-4.0；单一羧甲基壳聚糖修饰虽能拓宽ph适应性，但会导致酶活性下降40%以上；因此开发一种兼具高活性、宽ph适应性、高热稳定性的新型化学修饰剂制备胃蛋白酶具有重要意义。

技术实现思路

1、本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种化学修饰剂及其制备胃蛋白酶的方法。

2、为实现上述目的，本专利技术提供以下技术方案：一种化学修饰剂，该修饰剂为mal-peg-cmc，mal-peg-cmc的合成方法包括以本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种化学修饰剂，其特征在于，该修饰剂为Mal-PEG-CMC，Mal-PEG-CMC合成方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种化学修饰剂，其特征在于，S1中PEG分子量为1500-3000Da，PEG与马来酸酐的摩尔比为1:1.4-1.6。

3.根据权利要求2所述的一种化学修饰剂，其特征在于，S2中CMC取代度为0.7-0.9，Mal-PEG与CMC的质量比为1.5:1-2.5:1。

4.一种根据权利要求1-3任一项所述的化学修饰剂制备胃蛋白酶的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，...

【技术特征摘要】

1.一种化学修饰剂，其特征在于，该修饰剂为mal-peg-cmc，mal-peg-cmc合成方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种化学修饰剂，其特征在于，s1中peg分子量为1500-3000da，peg与马来酸酐的摩尔比为1:1.4-1.6。

3.根据权利要求2所述的一种化学修饰剂，其特征在于，s2中cmc取代度为0.7-0.9，mal-peg与cmc的质量比为1.5:1-2.5:1。

4.一种根据权利要求1-3任一项所述的化学修饰剂制备胃蛋白酶的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤三的修饰反应采用分步修饰：第一步，按酶与修饰剂摩尔比1:3-5，在25℃、...

【专利技术属性】
技术研发人员：余美伦，宫佳欣，高巍巍，李晓，娄晶莹，
申请(专利权)人：哈尔滨瀚邦生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：