【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫检测,具体涉及一种基于荧光能量共振转移的免疫检测体系及其制备和检测方法。
技术介绍
1、抗体是由b淋巴细胞在抗原刺激下,分化成为浆细胞产生的免疫球蛋白。它具有高亲和力、高特异性、高灵敏度,在诊断试剂、生物医学研究中作为关键生物材料,以及抗体药物作为新兴的免疫疗法对疾病的预防、治疗发挥越来越重要的作用。抗体研制平台有杂交瘤技术、噬菌体展示技术、抗体库技术、单细胞技术。尤其是抗体的前期发现、筛选过程,需要长时间的细胞培养过程,使细胞分泌出足够的抗体,抗体量积累至检测范围,因此非均相方法,时间长、效率低、操作复杂。针对抗体的检测方法,也以非均相为主,如有酶联免疫吸附法、免疫组化、免疫荧光等。这些检测方法需要多步的清洗步骤,多步的孵育反应时间,导致整个时间周期较长。
2、在单细胞分泌抗体的检测技术方面,流式细胞术在检测细胞膜表面抗体方面优势明显,但是对于浆细胞分泌至胞外的抗体分子,有一定的局限性。以微液滴、微阵列为主的单细胞技术,优势较为明显,单细胞技术具有高通量性,且能检测细胞分泌的产体。目前使用较多的为细胞、微
...【技术保护点】
1.一种基于荧光能量共振转移的免疫检测体系,其特征在于,包括以下组成:荧光染料供体标记的二抗体,荧光染料受体标记的亲和素,生物素标记的抗原。
2.根据权利要求1所述的免疫检测体系,其特征在于:所述荧光染料供体为异硫氰酸荧光酯、量子点或Alexa Fluor 488。
3.根据权利要求1所述的免疫检测体系,其特征在于:所述荧光染料受体为别藻蓝蛋白或Alexa Fluor 594。
4.根据权利要求1所述的免疫检测体系,其特征在于:体系中荧光染料供体标记二抗体的浓度为10-100nmol/L,荧光染料受体标记亲和素的浓度为10-500n
...【技术特征摘要】
1.一种基于荧光能量共振转移的免疫检测体系,其特征在于,包括以下组成:荧光染料供体标记的二抗体,荧光染料受体标记的亲和素,生物素标记的抗原。
2.根据权利要求1所述的免疫检测体系,其特征在于:所述荧光染料供体为异硫氰酸荧光酯、量子点或alexa fluor 488。
3.根据权利要求1所述的免疫检测体系,其特征在于:所述荧光染料受体为别藻蓝蛋白或alexa fluor 594。
4.根据权利要求1所述的免疫检测体系,其特征在于:体系中荧光染料供体标记二抗体的浓度为10-100nmol/l,荧光染料受体标记亲和素的浓度为10-500nmol/l,生...
【专利技术属性】
技术研发人员:张卫凯,张淑雅,付秀虹,高祥辉,杨少哲,张贺伟,齐存森,刘海强,李双,申绯翡,杨全中,
申请(专利权)人:洛阳职业技术学院,
类型:发明
国别省市:
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