一种具有ADCC效应的细胞系及应用制造技术

本发明专利技术涉及一种具有ADCC效应的细胞系及应用，所述细胞系过表达CD16蛋白，并且缺失CD3蛋白。本发明专利技术通过敲除CD3，使Jurkat细胞不表达TCR复合体，加入CD3抗体后无法激活下游信号通路，只能通过ADCC效应中FcγRIII的激活。通过CRISPR‑Cas9基因编辑技术敲除CD3并过表达FcγRIIIa，开发了ADCC FcγRIIIa(158V)Reporter CD3KO细胞系，解除TCR信号对ADCC产生的干扰，增强NK细胞介导的ADCC效应。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫细胞治疗，尤其涉及一种具有adcc效应的细胞系及应用。

技术介绍

1、adcc(antibody-dependent cellular cytotoxicity，抗体依赖的细胞介导细胞毒性)是一种免疫效应机制，通过抗体桥接效应细胞与靶细胞，激活杀伤性免疫应答。在治疗性抗体药物的抗肿瘤机制中是一项重要效应环节，也有助于清除被病毒感染的细胞。

2、cd16(cluster of differentiation 16，fcγriii)主要表达于自然杀伤(nk)细胞表面，当抗体结合到靶细胞表面的抗原时，cd16可特异性结合igg抗体的fc区域。在adcc过程中，cd16发挥着关键作用。当nk细胞的cd16与抗体的fc结合后，nk细胞被激活，释放穿孔素(perforin)和颗粒酶(granzyme)，诱导靶细胞凋亡。cd16a(fcγriiia)是adcc的主要效应受体，存在两个常见多态位点：158v和158f。fcγriiia 158v型等位基因与高亲和力结合igg fc段相关，可增强nk细胞介导的adcc活性。</p>

3、cd本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种具有ADCC效应的细胞系，其特征在于，所述细胞系过表达CD16蛋白，并且缺失CD3蛋白。

2.根据权利要求1所述的具有ADCC效应的细胞系，其特征在于，所述CD16蛋白包括F158V突变；

3.根据权利要求1或2所述的具有ADCC效应的细胞系，其特征在于，编码所述CD16蛋白的核酸序列包括SEQ ID No.2所示的序列。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的具有ADCC效应的细胞系，其特征在于，所述细胞系的细胞种类包括Jurkat细胞和/或HEK-293细胞。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的具有ADCC效应的细胞系，其特征在...

【技术特征摘要】

1.一种具有adcc效应的细胞系，其特征在于，所述细胞系过表达cd16蛋白，并且缺失cd3蛋白。

2.根据权利要求1所述的具有adcc效应的细胞系，其特征在于，所述cd16蛋白包括f158v突变；

3.根据权利要求1或2所述的具有adcc效应的细胞系，其特征在于，编码所述cd16蛋白的核酸序列包括seq id no.2所示的序列。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的具有adcc效应的细胞系，其特征在于，所述细胞系的细胞种类包括jurkat细胞和/或hek-293细胞。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的具有adcc效应的细胞系，其特征在于，所述cd3蛋白的氨基酸序列包括seq id no.3所示的序列。

6.一种权利要求1-5中任一项所述的具有adcc效应的细胞系的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括在细胞中过表达cd16蛋白，并敲除cd3蛋白制得。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵士奕，
申请(专利权)人：吉满生物科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：