一种重组人源胶质纤维酸性蛋白及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种重组人源胶质纤维酸性蛋白及其制备方法，涉及生物技术领域。本发明专利技术公开了一种重组人源胶质纤维酸性蛋白的制备方法，从NCBI上获取人源胶质纤维酸性的蛋白序列，根据大肠杆菌密码子偏嗜性特征，人工优化并合成胶质纤维酸性蛋白编码基因，进一步构建人源胶质纤维酸性蛋白的表达载体，并转化至大肠杆菌中进行诱导表达，然后将表达产物纯化得到纯度较高的重组蛋白。本发明专利技术表达及纯化的重组人源胶质纤维酸性蛋白与特异性抗体结合较好，可以满足检测要求。本发明专利技术优化了原核表达的重组人源胶质纤维酸性蛋白的基因序列并建立了配套的原核表达体系，使目的蛋白成可溶性表达，保留蛋白质天然结构和功能完整性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体是一种重组人源胶质纤维酸性蛋白及其制备方法。

技术介绍

1、中枢神经系统损伤可分为创伤性脑损伤、脑血管损伤及创伤性脊髓损伤，创伤性脑损伤是全世界常见的神经性残疾原因，主要发生在年轻人中。对病人护理的评估标准目前往往取决于颅部ct等放射学手段，这对长期暴露在电离辐射条件下的患者有消极的影响，研究人员通过对颅内或人体血液中胶质纤维酸性蛋白（gfap）的检测，发现血清gfap的预设临界值达到一定浓度时，能够预测头部ct上颅内损伤程度。有证据表明gfap水平对头部ct扫描不可见的亚临床颅内病变敏感。因此gfap可能是不易用ct甚至mri评估的小而弥漫性结构损伤的可靠代表，被认为可以用作颅内病理学的标志物从而用于医学诊断。因此，即时的快速的gfap检测对于头颅内病变至关重要。

2、为了解决上述问题，快速地检测头颅内病变，本专利技术提供了一种重组人源胶质纤维酸性蛋白及其制备方法。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种重组人源胶质纤维酸性蛋白及其制备方法，以解决现有技术中提出的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组人源胶质纤维酸性蛋白的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种重组人源胶质纤维酸性蛋白的制备方法，其特征在于：所述人源胶质纤维酸性蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的一种重组人源胶质纤维酸性蛋白的制备方法，其特征在于：步骤三中，对人源胶质纤维酸性蛋白重组菌进行诱导表达的具体步骤为：将人源胶质纤维酸性蛋白重组菌接种于含有卡那霉素抗性的LB液体培养基中，加入IPTG进行诱导，在220-230rpm、16-17℃下震荡培养6-12h。

4.根据权利要求3所述的一种重组人源胶质纤维酸性蛋...

【技术特征摘要】

1.一种重组人源胶质纤维酸性蛋白的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种重组人源胶质纤维酸性蛋白的制备方法，其特征在于：所述人源胶质纤维酸性蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的一种重组人源胶质纤维酸性蛋白的制备方法，其特征在于：步骤三中，对人源胶质纤维酸性蛋白重组菌进行诱导表达的具体步骤为：将人源胶质纤维酸性蛋白重组菌接种于含有卡那霉素抗性的lb液体培养基中，加入iptg进行诱导，在220-230rpm、16-17℃下震荡培养6-12h。

4.根据权利要求3所述的一种重组人源胶质纤维酸性蛋白的制备方法，其特征在于：iptg的浓度为0.2-0.22mm。

5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦万昌，周贺芙，李志萍，王媛，姚文博，裴楠楠，钟伟平，李银翅，
申请(专利权)人：博谱长春生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：