基于CRISPR/Cas12和LAMP技术的HPV居家自测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及核酸检测技术领域，本发明专利技术公开了一种基于CRISPR/Cas12和LAMP技术的HPV居家自测试剂盒，包括：核酸提取模块；特异性扩增模块，其包括恒温扩增试剂，HPV16特异性LAMP引物组；HPV18特异性LAMP引物组；信号激活模块，其包括CRISPR/Cas12a/crRNA复合体系；ssDNA报告探针；以及检测模块，其包括侧向层析试纸条。本发明专利技术提供的基于CRISPR/Cas12a和LAMP技术的HPV居家自测试剂盒，无需复杂仪器，灵敏度较高，兼具操作极简、扩增高效、可视化直读及抗干扰强的显著优势，为现场即时检测提供高集成度的全链条解决方案。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及核酸检测，特别涉及一种基于crispr/cas12和lamp技术的hpv居家自测试剂盒。

技术介绍

1、高危型人乳头瘤病毒（hpv）持续感染是宫颈癌发生的必要病因，其中hpv16和hpv18型分别占宫颈癌病例的50%和20%。

2、现在hpv dna检测包括基于pcr的检测技术，其存在如下局限：（1）设备依赖性强：需精密温控设备（热循环仪）和荧光检测模块，设备购置成本超5万美元；（2）操作复杂度高：涉及核酸提取、扩增、电泳/荧光检测等多步骤，全程需3-5小时且需专业培训；（3）交叉污染风险：开管操作易产生气溶胶污染，实验室环境要求达到bsl-2级别；（4）分型能力受限：多重pcr最多可区分12种高危型，但引物交叉反应导致特异性下降。环介导等温扩增（lamp）技术，其存在如下局限性：（1）非特异性扩增：引物设计复杂（需6个特异性区域），易形成引物二聚体或非靶标扩增，假阳性率可达15%；（2）灵敏度波动：临床样本中抑制剂（如血红蛋白、粘蛋白）易干扰 bstdna聚合酶活性，导致检测限升高10-100倍；（3本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于CRISPR/Cas12和LAMP技术的HPV居家自测试剂盒，其特征在于，

2.如权利要求1所述的基于CRISPR/Cas12和LAMP技术的HPV居家自测试剂盒，其特征在于，采用特异性模块进行等温扩增时，分别配制HPV16特异性LAMP引物预混液和配制HPV18特异性LAMP引物预混液，备用；

3.如权利要求1所述的基于CRISPR/Cas12和LAMP技术的HPV居家自测试剂盒，其特征在于，还包括：所述核酸提取模块包括硅羟基修饰磁珠，病毒裂解液，以及磁力架或者磁铁。

4.如权利要求3所述的基于CRISPR/Cas12和LAMP技术的HP...

【技术特征摘要】

1.一种基于crispr/cas12和lamp技术的hpv居家自测试剂盒，其特征在于，

2.如权利要求1所述的基于crispr/cas12和lamp技术的hpv居家自测试剂盒，其特征在于，采用特异性模块进行等温扩增时，分别配制hpv16特异性lamp引物预混液和配制hpv18特异性lamp引物预混液，备用；

3.如权利要求1所述的基于crispr/cas12和lamp技术的hpv居...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘国奇，童贻刚，裴晓静，李梦哲，彭亚丹，王禹儿，唐赞，王瑞，左杰，
申请(专利权)人：廊坊诺道中科医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：