一种硝基还原酶递送质粒的构建及其在环境修复中的应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程与环境修复技术领域，具体公开了一种硝基还原酶递送质粒的构建及其在环境修复中的应用。该来源于放线菌S16功能宏基因组的硝基还原酶基因，其核苷酸和氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。以pQ‑SacB‑araC质粒为模板设计引物进行PCR；从放线菌S16功能宏基因组进行克隆作为模板，根据目标硝基还原酶基因序列设计引物进行PCR扩增；将两种扩增产物进行纯化回收，片段重组获得硝基还原酶递送质粒pQ‑NR。本发明专利技术构建了能稳定高效表达硝基还原酶的递送质粒pQ‑NR和重组菌，实现硝基还原酶基因在多种微生物中的高效递送，增强了其在实际中与硝基化合物污染相关的环境修复中的应用效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程与环境修复，尤其涉及一种硝基还原酶递送质粒的构建及其在环境修复中的应用。

技术介绍

1、在现代工业进程中，硝基化合物广泛应用于化工、医药、农药等诸多领域。然而，这些化合物在生产、使用和排放过程中，大量进入环境，对生态系统和人类健康造成了严重威胁。硝基化合物具有高毒性、潜在致癌性和生物难降解性，其在环境中的长期积累不仅破坏生态平衡，还可能通过食物链传递最终危害人类健康。传统的环境修复方法，如物理吸附、化学氧化等，虽在一定程度上能处理硝基化合物污染，但存在成本高昂、操作复杂、易产生二次污染等弊端。生物修复技术因其环境友好、高效且经济的特点，成为解决硝基化合物污染问题的研究热点。

2、硝基还原酶(nr)作为一种关键的生物催化剂，能够将硝基化合物还原为毒性较低或更易降解的产物，在硝基化合物污染的生物修复中发挥着核心作用。然而，自然界中微生物内源性硝基还原酶的表达水平通常较低，难以满足实际环境修复的需求。因此，构建高效表达硝基还原酶的递送质粒，并将其导入适宜的宿主菌中，提高硝基还原酶的表达量和活性，对于增强生物修复效果具有至关重要的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种硝基还原酶，其特征在于，所述硝基还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.编码权利要求1所述的硝基还原酶的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.一种硝基还原酶递送质粒pQ-NR，其特征在于，所述质粒携带权利要求2所述的硝基还原酶基因的核苷酸序列。

4.权利要求3所述的一种硝基还原酶递送质粒pQ-NR的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

5.根据权利要求4所述的一种硝基还原酶递送质粒pQ-NR的构建方法，其特征在于，步骤S1所述引物序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所...

【技术特征摘要】

1.一种硝基还原酶，其特征在于，所述硝基还原酶的氨基酸序列如seq id no.2所示。

2.编码权利要求1所述的硝基还原酶的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

3.一种硝基还原酶递送质粒pq-nr，其特征在于，所述质粒携带权利要求2所述的硝基还原酶基因的核苷酸序列。

4.权利要求3所述的一种硝基还原酶递送质粒pq-nr的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

5.根据权利要求4所述的一种硝基还原酶递送质粒pq-nr的构建方法，其特征在于，步骤s1所述引物序列如seq id no.3和seq id no.4所示。

6.根据权利要求4所述的一种硝基还原酶递送质粒pq-nr的构建方法，其特征在于，步骤s2所述引物...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙坚，李佳慧，周士迎，李龚，欧阳颖雯，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：