一种基于联合刺激剂的NKT细胞体外扩增方法技术

技术编号:46309901 阅读:5 留言:0更新日期:2025-09-05 18:43
本发明专利技术公开了一种基于联合刺激剂的NKT细胞体外扩增方法,属于生物技术领域。该方法先分离自体外周血中的单个核细胞,然后通过添加A群链球菌制剂、唑来膦酸制剂和细胞因子IL‑2作为联合刺激剂,在无血清培养体系中对NKT细胞进行诱导活化与扩增。本发明专利技术方法操作简单,仅需三种关键试剂即可实现NKT细胞的高效扩增,获得的NKT细胞具有数量大、纯度高、细胞毒性强等特点,能够满足临床治疗的需求。与传统方法相比,本发明专利技术显著降低了培养成本,简化了操作流程,易于规模化生产和推广应用,为NKT细胞免疫治疗提供了高效、经济的技术方案。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种基于联合刺激剂的nkt细胞体外扩增方法。


技术介绍

1、nkt细胞(自然杀伤t细胞)是一类具有独特免疫调节功能的t细胞亚群,能够通过分泌多种细胞因子和直接杀伤靶细胞,在抗肿瘤、抗感染和免疫调节中发挥重要作用。然而,nkt细胞在外周血中的含量极低,通常仅占外周血单个核细胞的0.01%-0.1%,这极大地限制了其在临床治疗中的应用。为了满足临床治疗对nkt细胞数量和质量的需求,体外扩增技术成为获取大量高纯度nkt细胞的关键手段。

2、目前,nkt细胞的体外扩增主要依赖于多种细胞因子(如il-15、il-18等)和抗原递呈细胞(如树突状细胞)的共培养。然而,这些方法存在以下局限性:(1)扩增效率低,难以获得足够数量的nkt细胞;(2)操作复杂,需要多种试剂和细胞类型,增加了培养成本和技术难度;(3)获得的nkt细胞纯度和功能稳定性不足,难以满足临床治疗的要求。

3、针对上述问题,开发一种高效、经济、易于推广的nkt细胞体外扩增方法具有重要意义。本专利技术通过优化培养体系和刺激剂组合,利用a群链球菌制剂、唑来本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于联合刺激剂的NKT细胞体外扩增方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种基于联合刺激剂的NKT细胞体外扩增方法,其特征在于,步骤A中所述的从外周血分离获得的单个核细胞的浓度为 2.0×106/ml。

3.根据权利要求1所述的一种基于联合刺激剂的NKT细胞体外扩增方法,其特征在于,步骤B中所述A群链球菌制剂的浓度为0.01~0.1KE/mL;唑来膦酸制剂的浓度为1~5μM;细胞因子IL-2的浓度为100~500IU/mL。

4.根据权利要求1所述的一种基于联合刺激剂的NKT细胞体外扩增方法,其特征在于,步骤B、C中所述自体...

【技术特征摘要】

1.一种基于联合刺激剂的nkt细胞体外扩增方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种基于联合刺激剂的nkt细胞体外扩增方法,其特征在于,步骤a中所述的从外周血分离获得的单个核细胞的浓度为 2.0×106/ml。

3.根据权利要求1所述的一种基于联合刺激剂的nkt细胞体外扩增方法,其特征在于,步骤b中所述a群链球菌制剂的浓度为0.01~0.1ke/ml;唑来膦酸制剂的浓度为1~5μm;细胞因子il-2的浓...

【专利技术属性】
技术研发人员:李春娜孟姣陈莉邓长江尚现岗
申请(专利权)人:山东赛恩福干细胞工程集团有限公司
类型:发明
国别省市:

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