一种同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌制造技术

一种同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌，它涉及一种异养反硝化菌。解决了传统方法处理含硫含氮的有机废水存在运行成本高、占地面积大、一次性投资高和处理效果差的问题；而采用自养反硝化菌则存在菌的生长周期长、耐水力冲击能力差和处理能力低的问题。同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌属于假单胞菌属新种，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是中国科学院微生物研究所，保藏日期为２０１０年１月２６日，保藏编号为ＣＧＭＣＣ　Ｎｏ．３６１２；本发明专利技术的菌能够同时处理硫化物、硝酸盐和有机碳源，降低了成本、占地面积小、投资低，处理效果好且菌的生长周期短、耐水力冲击能力好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种异养反硝化菌。
技术介绍
随着石油化工、制药、食品发酵、造纸等产业的迅猛发展，含硫含氮有机废水污染 日趋严重。生物处理废水技术相比物化处理具有高效、运行成本低、无有毒副产物等优势， 故备受青睐。对于含硫含氮的有机废水的生物处理，大多数都是将脱硫和脱氮在两个分别 的反应系统将这类污染物得以去除，即含硫化物的污染物通过硫化物氧化菌的生物氧化作 用，将其氧化到单质硫从而实现硫化物的去除；而含有硝酸盐类的含氮废水，通过反硝化菌 的生物代谢，在有机碳源充足的条件下，通过反硝化过程将其转化为氮气；由此可见，传统 的处理这类废水的工艺具有运行成本高、占地面积大、一次性投资高、处理效果差等弊端。 随着近些年来一类自养反硝化菌如(Thiobacillus denitrificans)逐渐得到了生物处理 废水领域的重视，这类自养反硝化菌可以以硫化物作为电子供体，硝酸盐作为电子供体进 行反硝化作用，将硫化物氧化到单质硫，硝酸盐还原为氮气，从而实现了硫化物和硝酸盐类 污染物的同步去除，但是这类自养微生物存在生长周期长，耐水力冲击能力差，处理能力低 等缺点，从而限制了这类功能微生物在处理含硫含氮废水工艺的开发和应用潜力。因此，筛选到同步高效去除硫化物、硝酸盐和有机碳源，并且处理能力强，生长周 期短的异养微生物对于改善目前含硫含氮有机废水生物处理技术在生物脱硫脱氮理论和 工程实际应用等方面具有举足轻重的意义。
技术实现思路
本专利技术目的是为了解决传统方法处理含硫含氮的有机废水存在运行成本高、占地 面积大、一次性投资高和处理效果差的问题；而采用自养反硝化菌则存在菌的生长周期长、 耐水力冲击能力差和处理能力低的问题，而提供一种同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源 的异养反硝化菌。本专利技术一种同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌C27经鉴定属于 假单胞菌属(Pseudomonas sp.)新种，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物 中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所，保藏日 期为2010年1月26日，保藏编号为CGMCCNo. 3612 ；同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的 异养反硝化菌为杆菌，宽为0. 5 1. 0 μ m，长为1. 0 2. 0 μ m，革兰氏染色为阴性，无芽孢， 具有单极鞭毛，能运动，生长温度范围为15°C 40°C ；同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源 的异养反硝化菌在培养基上生长菌落为淡黄色，圆形，无突起，边缘规则，菌落直径为1 2mm ο本专利技术同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌接触酶试验为阳性， 接触酶阳性，可利用乙酸、乙醇、丙酸、乳酸和葡萄糖作为有机碳源进行生长。本专利技术同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌的16S rDNA序列长度为1490bp，与其最相近的种属是假单胞菌属，相似性为98. 8%。本专利技术同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌代谢硫化物、硝酸 盐和乙酸盐的最快代谢速率分别为2. ImgS2- (mg蛋白质)-l·1，1 · 5mgCH3C00__C (mg蛋白 质)Ι-1，2. Omg NO3--N (mg 蛋白质)-l·1。C27属于属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委 员会普通微生物中心中心，北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所，保藏 日期为2010年1月26日，保藏编号为CGMCC No. 3612。本专利技术同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌，能够同时处理硫化 物、硝酸盐和有机碳源，降低了成本、占地面积小、投资低，处理效果好且菌的生长周期短、 耐水力冲击能力好。附图说明图1是具体实施方式二中筛选所得同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反 硝化菌的扫描电镜照片。具体实施例方式具体实施方式一本实施方式同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化 菌C27经鉴定属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.)新种，保藏于中国微生物菌种保藏管理 委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微 生物研究所，保藏日期为2010年1月26日，保藏编号为CGMCC No. 3612 ；同步降解硫化物、 硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌为杆菌，宽为0. 5 1. 0 μ m，长为1. 0 2. 0 μ m，革兰氏 染色为阴性，无芽孢，具有单极鞭毛，能运动，生长温度范围为15°C 40°C ；同步降解硫化 物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌在培养基上生长菌落为淡黄色，圆形，无突起，边缘 规则，菌落直径为1 2mm。本专利技术同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌的16S rDNA序列长度 为1490bp，与其最相近的种属是假单胞菌属，相似性为98. 8%。参照《伯杰细菌鉴定手册》第八版和《常见细菌系统鉴定手册》对同步降解硫化物、 硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌进行生理生化鉴定同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳 源的异养反硝化菌接触酶试验为阳性，接触酶阳性，可利用乙酸、乙醇、丙酸、乳酸和葡萄糖 作为有机碳源进行生长。本实施方式同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌代谢硫化物、硝 酸盐和乙酸盐的最快代谢速率分别为2. lmgS2_(mg蛋白质Γ 1. 5mgCH3C00__C(mg蛋白 质)Ι-1，2. Omg NO3--N (mg 蛋白质)-l·1。具体实施方式二本实施方式同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化 菌从同步脱硫反硝化EGSB反应器中的颗粒污泥中筛选得到的；筛选按以下步骤进行一、 采集同步脱硫反硝化EGSB反应器中的颗粒污泥，超声波破碎后用无菌水稀释，制得浓度 为IO1 IO9个/mL的菌悬液，然后按1 10 20的体积比将菌悬液接种于液体培养基 中，富集培养48h;二、按1 10 20的体积比将富集培养后的菌悬液接种于固体分离培 养基上，在25 35°C的条件下培养24h，得单菌落；三、挑取单菌落转接于液体培养基中，在25 35°C的条件下富集培养至培养基出现混浊；四、挑取混浊的菌液接种于固体分离 培养基上，在25 35°C的条件下培养至有单菌落长成，然后挑取单菌落转接于液体培养基 中；五、重复步骤二、三和四至分离出单菌落，即为同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异 养反硝化菌；其中步骤一、三和四中所用液体培养基相同，每升液体培养基均是由1. 5g的 Na2S · 9Η20、1· 63g 的 Na (CH3COO)、0· Ig 的 MgSO4 · 7Η20、0· 5g 的 NaHCO3U. Og 的 NH4ClU. 75g 的KN03、1. 8g的KH2PO4U. 2g的K2HPO4UmL的微量元素液和余量的蒸馏水组成，液体培养 基PH值为7. 5 9. 0 ；步骤二和四中所用分离培养基相同，每升分离培养基均是由1. 5g的 Na2S · 9H20、1. 63g 的 Na (CH3COO)、0· Ig 的 MgSO4 · 7Η20、0· 5g 的 NaHCO3> 1. Og 的 NH4ClU. 75g 的ΚΝ03、1. 8g的ΚΗ2Ρ04、1. 2g的K2H本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌，其特征在于同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌Ｃ２７经鉴定属于假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｓｐ．）新种，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（ＣＧＭＣＣ），保藏地址是北京市朝阳区北辰西路１号院中国科学院微生物研究所，保藏日期为２０１０年１月２６日，保藏编号为ＣＧＭＣＣ　Ｎｏ．３６１２；同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌为杆菌，宽为０．５～１．０μｍ，长为１．０～２．０μｍ，革兰氏染色为阴性，无芽孢，具有单极鞭毛，能运动，生长温度范围为１５℃～４０℃；同步降解硫化物、硝酸盐和有机碳源的异养反硝化菌在培养基上生长菌落为淡黄色，圆形，无突起，边缘规则，菌落直径为１～２ｍｍ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：任南琪，陈川，王爱杰，何国领，张莉，徐熙俊，周旭，刘充，高灵芳，许继飞，李笃中，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]