诱导性质粒、用其制备治疗性外泌体的方法及应用技术

本发明专利技术公开了诱导性质粒、用其制备治疗性外泌体的方法及应用，所述诱导性质粒包括目标基因沉默核酸与模体的融合寡核苷酸，能够模体定向分拣治疗性RNA至外泌体；通过Rab系统沉默核酸实现Rab系统敲低能够提升外泌体分泌效率并促进靶细胞摄取，能够基于四环素诱导调控作用实现外泌体的定向装载、高产分泌；通过外泌体膜磷脂层修饰cRGD肽，避免共价交联对膜蛋白的破坏，能够特异性结合肿瘤细胞表面高表达的αvβ3整合素受体，实现主动靶向，解决现有技术靶向性差的缺陷，实现精准治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，具体为诱导性质粒、用其制备治疗性外泌体的方法及应用。

技术介绍

1、治疗性外泌体的发展源于对细胞间通讯机制的深入探索。20世纪80年代，外泌体首次被发现，初期被视为细胞排泄废物的载体，直至2007年其携带功能性核酸并参与细胞间信息传递的功能被证实，才开启了治疗潜力的研究。其天然来源广泛，间充质干细胞、免疫细胞、肿瘤细胞等均可分泌外泌体，分别具备抗炎修复、免疫调节、抗原呈递等特性。随着技术进步，分离纯化从超速离心升级到微流控芯片和免疫亲和捕获，功能化改造实现药物装载、靶向修饰及天然功能强化，为精准治疗奠定基础。

2、在临床应用中，治疗性外泌体展现出多领域价值：肿瘤治疗中，可作为靶向载体递送化疗药物或基因治疗成分，或通过免疫调控激活抗肿瘤反应；再生医学领域，间充质干细胞来源的外泌体促进心肌修复、神经保护及组织再生，为心血管疾病、神经退行性疾病和创伤修复提供新策略；免疫疾病治疗中，其抗炎特性可调节过度免疫反应，改善自身免疫病及移植排斥。此外，作为非病毒递送平台，外泌体规避了传统基因治疗的安全风险，与其他疗法联合可增强疗效。...

【技术保护点】

1.诱导性质粒，其特征在于，为四环素诱导性质粒，所述质粒包括目标基因沉默核酸与RNA模体的融合寡核苷酸，以及Rab4和/或Rab17a基因沉默核酸；所述RNA模体与异质性细胞核核糖蛋白A2B1特异性结合。

2.根据权利要求1所述的诱导性质粒，其特征在于，所述沉默核酸为shRNA或miRNA。

3.根据权利要求1所述的诱导性质粒，其特征在于，所述Rab4基因沉默核酸为shRNA，序列如SEQ ID NO：4所示；

4.根据权利要求1所述的诱导性质粒，其特征在于，所述目标基因选择铁死亡抑制基因中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的诱导性质粒，...

【技术特征摘要】

1.诱导性质粒，其特征在于，为四环素诱导性质粒，所述质粒包括目标基因沉默核酸与rna模体的融合寡核苷酸，以及rab4和/或rab17a基因沉默核酸；所述rna模体与异质性细胞核核糖蛋白a2b1特异性结合。

2.根据权利要求1所述的诱导性质粒，其特征在于，所述沉默核酸为shrna或mirna。

3.根据权利要求1所述的诱导性质粒，其特征在于，所述rab4基因沉默核酸为shrna，序列如seq id no：4所示；

4.根据权利要求1所述的诱导性质粒，其特征在于，所述目标基因选择铁死亡抑制基因中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的诱导性质粒...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪宏波，张家瑞，张俊，姚雨薇，董科均，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属协和医院，
类型：发明
国别省市：