一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法技术

本发明专利技术提供一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法，属于生物技术领域，本发明专利技术采用含有β‑巯基乙醇的EDTA‑柠檬酸缓冲液对软骨进行脱钙，采用超临界CO2萃取技术进行脱脂，采用碱性蛋白酶和胶原酶Ⅱ进行基质定向酶解，梯度消化；之后采用三相离心分离进行分离非变性Ⅱ型胶原蛋白，采用仿生H柱层析纯化，能够获得高提取率、高纯度、高结构完整性的非变性Ⅱ型胶原蛋白。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性ⅱ型胶原蛋白的制备方法。

技术介绍

1、在当今社会，骨骼健康问题日益成为人们关注的焦点。随着年龄的增长，尤其是步入中老年阶段，骨骼中的钙质流失加剧，骨密度下降，骨弹性减弱，由此引发了一系列诸如骨质疏松症、骨关节炎等病症，严重影响生活质量。

2、长久以来，传统的骨骼健康维护手段主要集中在钙与维生素d的补充。钙作为骨骼的重要无机组成部分，为骨骼提供了基本的硬度支撑；维生素d则助力肠道对钙的吸收，促进钙在骨骼中的沉积。然而，单纯依赖这两种元素的补充，在面对复杂的骨骼健康问题时，逐渐显露出局限性。骨骼并非仅仅是钙盐的简单堆积，而是一个有机成分与无机成分紧密结合的复杂结构体。在骨骼的有机成分中，胶原蛋白占据着至关重要的地位，约占骨有机质的90%以上，其重要性不容忽视。

3、胶原蛋白家族种类繁多，其中ⅱ型胶原蛋白在骨骼健康领域有着独特的意义。它主要存在于关节软骨以及一些特殊的结缔组织中，是构成关节软骨的主要蛋白质。ⅱ型胶原蛋白以其独特的三螺旋结构，交织成细密的网络，为关节软骨提供了强本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，S1中，软骨为鸡胸软骨或鲨鱼鳍软骨；软骨剪成尺寸范围为1mm～5mm的碎片；EDTA-柠檬酸缓冲液的浓度为0.5mol/L～0.6mol/L，并且含有1mmol/L～1.5mmol/Lβ-巯基乙醇，pH值为6.7～6.9；浸泡的过程进行搅拌，搅拌速度为100rpm～150rpm。

3.根据权利要求1所述的一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，S2中，脱...

【技术特征摘要】

1.一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，s1中，软骨为鸡胸软骨或鲨鱼鳍软骨；软骨剪成尺寸范围为1mm～5mm的碎片；edta-柠檬酸缓冲液的浓度为0.5mol/l～0.6mol/l，并且含有1mmol/l～1.5mmol/lβ-巯基乙醇，ph值为6.7～6.9；浸泡的过程进行搅拌，搅拌速度为100rpm～150rpm。

3.根据权利要求1所述的一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，s2中，脱脂的方法包括：将脱钙后软骨放入超临界co2萃取设备的萃取釜中，设置萃取温度为34℃～36℃，压力为10mpa～12mpa，萃取时间为30min～40min。

4.根据权利要求1所述的一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，s3中，含有碱性蛋白酶和胶原酶ⅱ的tris-hcl缓冲液中含有5mmol/l～6mmol/l cacl2、2mmol/l～3mmol/l zncl2、0.001g/ml～0.003g/ml海藻糖、0.001g/ml～0.002g/ml碱性蛋白酶和0.0005g/ml～0.0008g/ml胶原酶ⅱ，ph值为7.3～7.5。

5.根据权利要求1所述的一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，s4中，三相离心分离包括：

6.根据权利要求5所述的一种增加骨密度和提高骨弹性的非变性ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：李佳，
申请(专利权)人：湖北和格复合骨胶原生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：