一种特异识别II型草鱼呼肠孤病毒VP4蛋白的兔源重组单克隆抗体、真核表达方法及应用技术

本发明专利技术属于免疫学和体外诊断技术领域，具体涉及种特异性识别II型草鱼呼肠孤病毒VP4蛋白的兔源重组单克隆抗体、真核表达方法及应用。GCRV‑II中S6基因编码VP4蛋白，本发明专利技术通过将目的基因S6转染到HEK293细胞进行表达纯化，配合弗氏佐剂免疫新西兰白兔，利用ELISA、单B细胞筛选以及真核表达技术获得特异性识别GCRV‑II VP4蛋白的兔源重组单克隆抗体。所述抗体具有较强的特异性，为进一步建立特异性II型草鱼呼肠孤病毒诊断技术提供支持，对开展GCRV‑II相关科学研究具有重大应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫学和体外诊断，具体涉及一种特异性识别ii型草鱼呼肠孤病毒vp4蛋白的兔源重组单克隆抗体、真核表达方法及应用。

技术介绍

1、草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus，gcrv)是水生呼肠孤病毒中的一员，其中gcrv-ii可在草鱼各个生长阶段暴发严重，死亡率较高，严重时可达60％～90％及以上。病死鱼根据症状可分为“红肌”、“红肠”、“红鳍、红鳃盖”三种类型，有时也表现为多种症状混合出现。其传染性高、流行广，尚无有效药物治疗。

2、gcrv-ii病毒粒子为正二十面体，是一种双链rna病毒，其基因组由11条分节段的rna组成，每个节段都分别编码不同的蛋白质。其中，s6基因编码vp4蛋白，是病毒的主要结构蛋白，具有较高的免疫原性，在不同gcrv-ii分离株上都表现出较高的保守性。

3、单克隆抗体是由单一b细胞克隆产生的仅针对某一特定抗原表位的抗体，因其特异性高、亲和力好而被广泛应用于诊断、治疗和生物学领域，因此，制备识别vp4蛋白的重组单克隆抗体有助于深入开展ii型草鱼呼肠孤病毒研究，帮助建立相应检测方法。本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种特异识别II型草鱼呼肠孤病毒VP4蛋白的兔源重组单克隆抗体，所述的所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示，重链可变区的氨基酸序列为SEQID NO.1所示。

2.权利要求1所述的单克隆抗体的轻链可变区和重链可变区的蛋白的编码基因。

3. 根据权利要求2所述的编码基因，所述的轻链可变区蛋白的编码基因为SEQ IDNO.4所示，重链可变区蛋白的编码基因为SEQI ID NO.2所示。

4.具有权利要求2所述编码基因的表达盒、重组载体、重组微生物或离体的重组细胞。

5.权利要求1所述的单克隆抗体、权利要求2所...

【技术特征摘要】

1. 一种特异识别ii型草鱼呼肠孤病毒vp4蛋白的兔源重组单克隆抗体，所述的所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列为seq id no.3所示，重链可变区的氨基酸序列为seqid no.1所示。

2.权利要求1所述的单克隆抗体的轻链可变区和重链可变区的蛋白的编码基因。

3. 根据权利要求2所述的编码基因，所述的轻链可变区蛋白的编码基因为seq idno.4所示，重链可变区蛋白的编码基因为seqi id no.2所示。

4.具有权利要求2所述编码基因的表达盒、重组载体、重组微生物或离体的重组细胞。

5.权利要求1所述的单克隆抗体、权利要求2所述的编码基因或具有权利要求2所述编码基因的表达盒、重组载体、重组微生物或离体的重组细胞在制备gcrv-ii检测试剂盒中...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐镇，孔维光，袁新婕，程高锋，
申请(专利权)人：中国科学院水生生物研究所，
类型：发明
国别省市：