储备多样性最大化的功能性人化抗体文库之构建及应用制造技术

本申请提供了一种免疫球蛋白文库。文库是由免疫球蛋白重链或轻链可变区ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３和ＦＲ４序列经任意组合而构成。文库所拥有的多样性组合储备，超过自然免疫系统，可用来表达新颖免疫球蛋白。文库可用于筛选具有感兴趣的靶标特异性的抗体。应用该文库所构建的抗体，是没有免疫原性的全人源化抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及抗体文库之构建，该文库所具有的抗体储备多样性 (r印ertoirediversity)，超过自然免疫系统和现有的组合技术。该文库可用于筛选具有令人感兴趣的特异性的抗体，由此所构建的抗体被认为是功能性全人化抗体。 背景 单克隆抗体所具有的确切临床疗效和安全特性，使其成为代表性的专类治 疗药物。出现于70年代中期的杂交瘤技术突破，为医学界带来了疾病治疗特异 魔弹的希望。不过，直到一系列抗体技术出现，例如啮齿类抗体嵌合技术(参见 美国专利USP Nos. 4， 816， 567)和人源化技术(参见美国专利USP Nos. 5， 225， 539 ; 5， 585， 089 ;5， 693， 762 ;5， 693， 761)、噬菌体展示组合文库(Clackson et al. ， Nature, 352:624-628(1991) ;Felici et al. ， J Mol. Biol. ， 223 :301-310 (1991) ;Markland et al.Gene，109 :13-19 (1991))、转基因鼠(huMab/Xeno mouse)制备人化抗体本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于构建人免疫球蛋白噬菌体展示文库的方法，所述方法包括以下步骤：制备第一组核苷酸序列，所述序列编码人免疫球蛋白轻链可变区，其中所述第一组的序列包括人轻链ｃＤＮＡ片段的序列，负责编码ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３和ＦＲ４，其中所述片段经随机选择并连接，用以编码轻链可变区，所述轻链可变区按顺序包括ＦＲ１－ＣＤＲ１－ＦＲ２－ＣＤＲ２－ＦＲ３－ＣＤＲ３－ＦＲ；制备第二组核苷酸序列，所述序列编码人免疫球蛋白重链可变区，其中所述第二组的序列包括人重链ｃＤＮＡ片段的序列，负责编码ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３和ＦＲ４，其中所述片段经随机选择并连接，用以编码重链可变...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-3-9 60/906,108用于构建人免疫球蛋白噬菌体展示文库的方法，所述方法包括以下步骤制备第一组核苷酸序列，所述序列编码人免疫球蛋白轻链可变区，其中所述第一组的序列包括人轻链cDNA片段的序列，负责编码FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4，其中所述片段经随机选择并连接，用以编码轻链可变区，所述轻链可变区按顺序包括FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR；制备第二组核苷酸序列，所述序列编码人免疫球蛋白重链可变区，其中所述第二组的序列包括人重链cDNA片段的序列，负责编码FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4，其中所述片段经随机选择并连接，用以编码重链可变区，所述重链可变区按顺序包括FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR；制备第三组核苷酸序列，所述序列编码免疫球蛋白单链Fv，其中所述第三组的序列包括所述第一组的轻链序列、连接体、和所述第二组的随机选择的重链序列，其中所述连接体将所述轻链序列和所述重链序列共价连接，构成第三组序列，用以编码免疫球蛋白单链...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁瑞安，黄佩芬，邝志威，陈业森，
申请(专利权)人：中国抗体制药有限公司，
类型：发明
国别省市：HK[中国|香港]