一种肿瘤组织类器官的培养方法及应用技术

技术编号:45646712 阅读:17 留言:0更新日期:2025-06-27 18:51
本发明专利技术涉及细胞生物学技术领域,公开了一种肿瘤组织类器官的培养方法及应用,通过以L‑WRN细胞为饲养细胞,将饲养细胞、肿瘤组织类器官与基质胶混合后共培养,再经过组织样本预处理、机械力初步消化、细胞收集与消化处理、类器官细胞计数、基质胶3D包裹、接种与培养、维持培养等多个步骤提高多种肿瘤组织原代类器官构建的成功率。适用于不同类型和来源的肿瘤细胞,包括穿刺/较硬型样本细胞、糜烂/较软型样本细胞以及腹腔/胸腔积液细胞,显著提高了肺癌、食管癌和胃癌等多种肿瘤组织类器官的构建成功率,还简化了培养过程,降低了培养成本,缩短了培养周期。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞生物学,特别涉及一种肿瘤组织类器官的培养方法及应用


技术介绍

1、2009年,sato等利用含有egf、noggin、r-spondin的三维基质胶(matrigel)培养单个富含lgr5标记的小鼠肠干细胞,能够形成具有隐窝和绒毛样结构的小肠类器官,开创了类器官培养的时代。随着研究深入,培养体系中各因子的细微变化对培养结果影响显著。例如,添加wnt调节因子(如chir99021、gsk3β抑制剂)和notch信号通路调节因子(如丙戊酸、组蛋白去乙酰化酶抑制剂)可促进干细胞分化。完全培养基的发展使肠上皮类器官培养系统能够重现体内成熟肠道的自我更新和分化能力,成为研究肠道生物学的有力工具。

2、现有的肿瘤原代类器官建立方法主要包括以下步骤:

3、组织样本预处理:原代组织样本离体后5分钟内放入预冷的活组织保存液(2~8℃)中,低温运输至实验室;

4、基质胶和培养基准备:基质胶在4℃冰上解冻,培养基室温平衡,耗材用类器官培养防粘附润洗液润洗;

5、组织处理:样本转移至培养皿中,去除非上皮成分,用基本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:所述步骤1还包括:

3.根据权利要求1所述的肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:所述步骤3包括对穿刺或较硬型样本细胞的收集,通过以下步骤:

4.根据权利要求1所述的肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:所述步骤3包括对糜烂或较软型样本细胞的收集,通过以下步骤:

5.根据权利要求1所述的肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:所述步骤3包括对腹腔或胸腔积液细胞的收集,通过以下步骤:

6.根据权利要求1所述的肿...

【技术特征摘要】

1.一种肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:所述步骤1还包括:

3.根据权利要求1所述的肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:所述步骤3包括对穿刺或较硬型样本细胞的收集,通过以下步骤:

4.根据权利要求1所述的肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:所述步骤3包括对糜烂或较软型样本细胞的收集,通过以下步骤:

5.根据权利要求1所述的肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:所述步骤3包括对腹腔或胸腔积液细胞的收集,通过以下步骤:

6.根据权利要求1所述的肿瘤组织类器官的培养方法,其特征在于:所述步骤4的饲养细胞通过以下步骤制备:

...

【专利技术属性】
技术研发人员:仝彩玲李翠云胡珂馨曾凡伟罗海青张越华
申请(专利权)人:厦门模基生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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