一种视网膜变性疾病模型的构建方法及其应用和药物技术

本发明专利技术提供了一种视网膜变性疾病模型的构建方法，通过靶向敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的Flvcr1基因序列，在靶向敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的Flvcr1基因序列的实施方式上，可以是敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的Flvcr1基因长序列或者敲除Flvcr1基因的部分序列，就可以实现非人哺乳动物表现出视网膜变性疾病相应特征，即实现视网膜变性疾病模型的构建。采用本发明专利技术提供的一种采用视网膜变性疾病模型的构建方法构建的视网膜变性疾病模型在筛选用于预防或治疗视网膜变性疾病的药物中具有重要的应用价值，本发明专利技术还基于构建的视网膜变性疾病模型筛选出了含有胆碱的治疗视网膜变性疾病的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及疾病模型构建，具体涉及一种视网膜变性疾病模型的构建方法及其应用。

技术介绍

1、遗传性视网膜疾病(irds)是一组由基因突变导致的视网膜退行性病变，全球患病率约为0.07％，其中视网膜色素变性(rp)作为最常见类型，发病率约为1/4000。该疾病以进行性视力下降、夜盲及视野缺损为主要特征，部分患者晚期可致盲。当前研究面临两大挑战：一是遗传异质性高，且基因型与表型关联复杂，导致东亚人群基因诊断率仅52.2％，显著低于全球平均水平；二是现有疗法仅适用于特定突变类型，而晚期患者因视网膜细胞不可逆损伤难以获得疗效，亟需开发广谱治疗策略并优化基因检测成本效益。在临床上，仍有40％左右的irds患者即使进行了全基因组测序也依旧找不到致病原因，因此，对irds的致病模型的构建以及分子机制的深入研究显得尤为重要。因此在对遗传性视网膜疾病的研究中，急需构建有效的视网膜变性疾病模型。

2、因此，本专利技术提供了一种视网膜变性疾病模型的构建方法，以解决上述问题。

技术实现思路

1、本专利技术提供一种视网膜本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种视网膜变性疾病模型的构建方法，其特征在于，通过靶向敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的Flvcr1基因序列。

2.根据权利要求1所述的一种视网膜变性疾病模型的构建方法，其特征在于，在靶向敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的Flvcr1基因序列的实施方式上，可以是敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的Flvcr1基因长序列或者敲除Flvcr1基因的部分序列，无论敲除哪一种类型(部分或全长)序列，只要能够在视网膜中沉默Flvcr1基因的表达，就可以实现通过靶向敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的Flvcr1基因序列的目的，从而实现非人哺乳动物表现出视网膜变性疾病相应特征，即实现视网...

【技术特征摘要】

1.一种视网膜变性疾病模型的构建方法，其特征在于，通过靶向敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的flvcr1基因序列。

2.根据权利要求1所述的一种视网膜变性疾病模型的构建方法，其特征在于，在靶向敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的flvcr1基因序列的实施方式上，可以是敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的flvcr1基因长序列或者敲除flvcr1基因的部分序列，无论敲除哪一种类型(部分或全长)序列，只要能够在视网膜中沉默flvcr1基因的表达，就可以实现通过靶向敲除非人目标哺乳动物视网膜组织中的flvcr1基因序列的目的，从而实现非人哺乳动物表现出视网膜变性疾病相应特征，即实现视网膜变性疾病模型的构建。

3.根据权利要求2所述的一种视网膜变性疾病模型的构建方法，其特征在于，敲除flvcr1基因的部分序列，对于flvcr1基因的10个外显子，敲除flvcr1基因的10个外显子中的任一。

4.根据权利要求3所述的一种视网膜变性疾病模型的构建方法，其特征在于，敲除flvcr1基因的部分序列，敲除flvcr1基因的10个外显子中的外显子2，可以较好的实现非人哺乳动物表现出视网膜变性疾病相应特征，即可以较好实现视网膜变性疾病模型的构建。

5.根据权利要求1所述的一种视网膜变性疾病模型的构建方法，其特征在于，采用基因编辑的方法或动物杂交的方法均可以实现敲除非人目标哺乳动物视网膜基因组中的flvcr1基因序列；所述动物杂交的方法为：将flvcr1基因条件性敲除纯合子动物与带有six3-cre或rhodopsin-cre基因的动物交配获得flvcr1基因条件敲除的动物；所述基因编辑的方法选自crispr/cas9技术、人工核酸酶介导的锌指核酸酶技术、转录激活因子样效应物核酸酶技术和cre-loxp基因敲除技术中的至少一种；采用crispr/cas9技术和cre-loxp基因敲除技术敲除非人目标哺乳动物视网膜基因组中的flvcr1基因序列；将含非人目标哺乳动物flvcr1基因的grna载体或向导rna复合物、cas9 mrna或cas9蛋白通过转化或化学转染至非人目标哺乳动物的受精卵中，取胚胎细胞移植到假孕非人目标哺乳动物的子宫中，获得flvcr1基因条件性敲除的首建动物。

6.根据权利要求5所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：张琳，朱献军，赵晓辉，王一，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：