一种通过代谢工程改造提高热解糖嗜热厌氧杆菌生物合成丙二醇的方法技术

本发明专利技术公开了一种通过代谢工程改造提高热解糖嗜热厌氧杆菌生物合成丙二醇的方法，属于基因工程技术领域。本发明专利技术通过敲除tdk基因、adhE基因和Ldh基因，提高了热解糖嗜热厌氧杆菌合成丙二醇的能力，进而提升的丙二醇的发酵产量，相比于出发菌株，以10g/L葡萄糖为底物驯化发酵时，野生型菌株丙二醇产量为1.07g/L，改造工程菌株丙二醇产量为3.95g/L，丙二醇产量提高了269.2％。在提高葡萄糖浓度进行发酵测试过程中，消耗29.5g/L葡萄糖丙二醇产量可达11.62g/L，葡萄糖到丙二醇转化率达到39.4％，具有工业应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种通过代谢工程改造提高热解糖嗜热厌氧杆菌生物合成丙二醇的方法，属于基因工程。

技术介绍

1、丙二醇是一种重要的平台化合物和化学中间体，是不饱和聚酯、环氧树脂、聚氨酯树脂、增塑剂、表面活性剂的重要原料。丙二醇粘性和吸湿性好，广泛应用于食品、医药、化妆品等领域，是工业需求较高的化学品。近年来，由于生物质资源的广泛、更安全的制造工艺和对环境的低影响，通过生物技术途径从生物质中生产化学品已经引起了广泛研究者的关注。目前，丙二醇生产研究方法集中于化学合成法和微生物发酵法，化学合成法利用不可再生的石油资源为原料，或高温高下的条件下用重金属作为催化剂合成1，2-丙二醇，其环境、经济成本较高。相较于化学合成法，微生物发酵法具有工艺清洁、污染小、副产物少和成本较低的优势。

2、热解糖嗜热厌氧杆菌(thermoanaerobacterium thermosaccharolyticum)是嗜热的厌氧革兰氏阳性细菌，能够在37-72摄氏度下生长，并且它在ph5.0-7.5范围内都能生长，这使得它可以很大程度上降低杂菌污染。同时热解糖嗜热厌氧杆菌有完整的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种丙二醇合成能力提高的热解糖嗜热厌氧杆菌基因工程菌，其特征在于，是抑制了热解糖嗜热厌氧杆菌的双功能乙醇/乙醛脱氢酶基因adhE、乳酸脱氢酶基因Ldh和磷酸丙糖异构酶Tim基因的表达。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述抑制是指敲除或沉默。

3.根据权利要求1或2所述的基因工程菌，其特征在于，所述双功能乙醇/乙醛脱氢酶基因adhE的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述乳酸脱氢酶基因Ldh的核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示，所述磷酸丙糖异构酶基因Tim的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

4.根据权利要求1～3任一...

【技术特征摘要】

1.一种丙二醇合成能力提高的热解糖嗜热厌氧杆菌基因工程菌，其特征在于，是抑制了热解糖嗜热厌氧杆菌的双功能乙醇/乙醛脱氢酶基因adhe、乳酸脱氢酶基因ldh和磷酸丙糖异构酶tim基因的表达。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述抑制是指敲除或沉默。

3.根据权利要求1或2所述的基因工程菌，其特征在于，所述双功能乙醇/乙醛脱氢酶基因adhe的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述乳酸脱氢酶基因ldh的核苷酸序列如seq idno.3所示，所述磷酸丙糖异构酶基因tim的核苷酸序列如seq id no.4所示。

4.根据权利要求1～3任一项所述的基因工程菌，其特征在于，所述热解糖嗜热厌氧杆菌基因工程菌的出发菌株为t.thermosaccharolyticum dsm571。

5.一种提高热解糖嗜热厌氧杆菌生物合成丙二醇能力的方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵雄俊，盛园园，戴东，
申请(专利权)人：宁波牛形山生物科技合伙企业有限合伙，
类型：发明
国别省市：