一种通过代谢工程改造提高嗜热厌氧乙醇杆菌生物合成乳酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种通过代谢工程改造提高嗜热厌氧乙醇杆菌生物合成乳酸的方法，属于基因工程技术领域。本发明专利技术提供了乳酸合成能力提高的嗜热厌氧乙醇杆菌，是在出发菌株的基础上，敲除了磷酸乙酰基转移酶基因和乙酸激酶基因ptaack、乙醇脱氢酶基因adhE、磷酸丁酰基转移酶基因和丁酸激酶基因ptbbtk中的一个或多个基因，提高了嗜热厌氧乙醇杆菌的乳酸生产能力，相比于出发菌株，产率可提高73％，产量可提高5.6倍。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种通过代谢工程改造提高嗜热厌氧乙醇杆菌生物合成乳酸的方法，属于基因工程。

技术介绍

1、乳酸广泛应用于食品、饮料、医药、化妆品等领域。近年来，由于全球对环境保护日趋严格，生物基聚合物尤其是可完全生物降解且健康安全的聚乳酸材料备受关注。因此，作为聚乳酸的原材料乳酸单体的市场需求增长较快。目前乳酸生产主要由玉米等粮食为原料，如果大规模生产不但会消耗大量宝贵的粮食资源，也会出现与人和动物争粮食的情况。利用非粮原料(如秸秆)生产乳酸，不但可以节省粮食资源，而且原料来源广泛、价格便宜。秸秆等原料含有葡聚糖的同时还含有大量木聚糖等五碳糖，这些多聚糖被水解成单糖后需要全部发酵转化才能经济有效地生产乳酸等产品，而目前主要的生产菌株对五碳糖的代谢能力不足。

2、嗜热厌氧乙醇杆菌(thermoanaerobacter ethanolicus)有完整的己糖和戊糖代谢系统，同时它还能分泌半纤维素酶，能很好地利用秸秆等原料中的六碳糖和五碳糖。嗜热厌氧乙醇杆菌能在78摄氏度的高温下生长，并且它在ph4.4-9.8范围内都能生长，这有利于它在工业生产应用时可本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种乳酸合成能力提高的嗜热厌氧乙醇杆菌，其特征在于，在出发菌株的基础上，抑制了磷酸乙酰基转移酶基因和乙酸激酶基因ptaack、乙醇脱氢酶基因adhE、磷酸丁酰基转移酶基因和丁酸激酶基因ptbbtk中的一个或多个基因的表达。

2.根据权利要求1所述的嗜热厌氧乙醇杆菌，其特征在于，所述嗜热厌氧乙醇杆菌敲除或缺失了磷酸乙酰基转移酶基因和乙酸激酶基因ptaack、乙醇脱氢酶基因adhE、磷酸丁酰基转移酶基因和丁酸激酶基因ptbbtk。

3.根据权利要求1或2所述的嗜热厌氧乙醇杆菌，其特征在于，所述磷酸乙酰基转移酶基因和乙酸激酶基因ptaack的核苷酸序列如SEQ ID...

【技术特征摘要】

1.一种乳酸合成能力提高的嗜热厌氧乙醇杆菌，其特征在于，在出发菌株的基础上，抑制了磷酸乙酰基转移酶基因和乙酸激酶基因ptaack、乙醇脱氢酶基因adhe、磷酸丁酰基转移酶基因和丁酸激酶基因ptbbtk中的一个或多个基因的表达。

2.根据权利要求1所述的嗜热厌氧乙醇杆菌，其特征在于，所述嗜热厌氧乙醇杆菌敲除或缺失了磷酸乙酰基转移酶基因和乙酸激酶基因ptaack、乙醇脱氢酶基因adhe、磷酸丁酰基转移酶基因和丁酸激酶基因ptbbtk。

3.根据权利要求1或2所述的嗜热厌氧乙醇杆菌，其特征在于，所述磷酸乙酰基转移酶基因和乙酸激酶基因ptaack的核苷酸序列如seq id no.1所示。

4.根据权利要求1或2所述的嗜热厌氧乙醇杆菌，其特征在于，所述乙醇脱氢酶基因adhe的核苷酸序列如seq id no.2所示。

5.根据权利要求1或2所述的嗜热厌氧乙醇杆菌，其特征在于，所述磷酸丁酰基转移...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵雄俊，张元心，王关应，杨军丽，戴东，
申请(专利权)人：宁波牛形山生物科技合伙企业有限合伙，
类型：发明
国别省市：