【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析检测，具体涉及一种检测遗传毒性污染物的重组发光菌及其构建方法和检测方法。
技术介绍
1、进入环境中污染物质严重危害人类健康。其中，针对遗传毒性污染物的检测备受关注。通常有毒物质一般都采用理化方法和生物学方法进行检测。理化方法基于对样品成分的仪器分析，如gc-ms或hplc。通过理化手段可以获得样品的成分数据，经过毒性数据换算从而得到样品中该物质的毒性。但理化分析方法程序多，成本高，不适于现场快速和高通量的应用，而且所得到毒性数据未考虑该物质在环境中的生物有效性，更重要的是，结果忽略了毒性物质间的拮抗、加合和协同作用。生物学检测方法操作简便、成本低，适于现场快速和高通量应用，且能反映样品中毒性物质间的拮抗、加合和协同作用，在遗传毒性检测中具有重要的意义，其中生物传感细胞是发展较快的一类检测方法。
2、目前常用的生物学检测方法主要包括生物传感细胞毒性评估，如艾姆斯鼠伤寒沙门氏菌/微粒体致突变性试验(ames试验)、sos/umu试验以及sos lux试验等，但ames试验耗时长，质粒载体无法保证稳定性，且被测化...
【技术保护点】
1.一种检测遗传毒性污染物的重组发光菌，其特征在于，所述重组发光菌以不动杆菌为基础菌，所述基础菌的基因组的目标基因间插入发光基因和抗性基因；
2.根据权利要求1所述重组发光菌，其特征在于，所述目标基因包括recA基因，所述发光基因包括luxCDABE，所述抗性基因包括卡那霉素抗性基因kmr。
3.权利要求1或2所述重组发光菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述构建方法，其特征在于，步骤(1)所述目标基因为recA时，设计的4条引物包括扩增5’部分的recA_f和recA_ir，扩增3’部分的recA_if和...
【技术特征摘要】
1.一种检测遗传毒性污染物的重组发光菌，其特征在于，所述重组发光菌以不动杆菌为基础菌，所述基础菌的基因组的目标基因间插入发光基因和抗性基因；
2.根据权利要求1所述重组发光菌，其特征在于，所述目标基因包括reca基因，所述发光基因包括luxcdabe，所述抗性基因包括卡那霉素抗性基因kmr。
3.权利要求1或2所述重组发光菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述构建方法，其特征在于，步骤(1)所述目标基因为reca时，设计的4条引物包括扩增5’部分的reca_f和reca_ir，扩增3’部分的reca_if和reca_r，其中reca_f、reca_ir、reca_if和reca_r的核苷酸序列依次如seq id no.1～seq id no.4所示。
5.根据权利要求4所述构建方法，其特征在于，在所述扩增后进行重叠pcr，所述重叠p...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡定煜，程金新，聂子轩，张晓明，蔡铭，马宁，常化仿，
申请(专利权)人：中国人民警察大学公安部国际执法合作学院，中国维和警察培训中心，
类型：发明
国别省市：
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