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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属微生物领域,具体涉及一株消减黄曲霉毒素b1的发酵益生菌植物乳杆菌及其应用。
技术介绍
1、黄曲霉毒素主要是黄曲霉、寄生曲霉等曲霉属真菌中产生的有毒次生代谢产物,具有致畸形、致突变性、致癌性。主要常见的类型为b1、b2、m1、m2、g1、g2等。在这类毒素中,黄曲霉毒素b1(aflatoxin b1,afb1)被认为是最常见、毒性最强、危害最大的毒素,其毒性约为氰化钾的10倍、砒霜的68倍。它极易污染花生、玉米等粮食作物,严重威胁人和动物健康,并造成极大的粮油经济损失。发酵饲料是以微生物发酵为核心,将饲料原料中的抗营养因子和大分子物质进行转化和分解,产生适口性好、营养价值高的饲料原料。花生粕也是重要的发酵饲料原料,通过微生物的发酵,主要有下优势:1)降解花生粕中大分子量蛋白,得到含量丰富的小肽,提高其在动物体内的消化吸收率;2)可使花生粕中的抗原成分、胰蛋白酶抑制因子有效降低或去除;3)发酵花生粕具有独特的芳香味,能大大改善饲料风味及品质。
2、筛选对黄曲霉毒素b1具有消减作用的发酵益生菌,对黄曲霉毒素的安全、高效降解和花生粕高质化利用具有重要的意义。
技术实现思路
1、本专利技术主要针对现有技术高效、安全消减饲料中黄曲霉毒素b1发酵益生菌菌株匮乏,提供一株消减黄曲霉毒素b1的发酵益生菌植物乳杆菌及其应用。本专利技术的植物乳杆菌ys-718能有效消减黄曲霉毒素b1,对花生粕中黄曲霉毒素b1有良好消减效果。
2、为解决上述技术问题,本专利技术采用的技
3、本专利技术第一方面提供植物乳杆菌ys-718(lactobacillus plantarum),已于2023年11月15日保藏于中国典型培养物保藏中心,简称cctcc,保藏地址:中国,武汉,武汉大学,保藏编号为cctcc no.m 20232226。
4、本专利技术的植物乳杆菌ys-718从柳州传统发酵酸菜中分离获得。筛选方法:取适量的5.00g柳州传统酸菜于50ml mrs液体培养基中,在37℃、200rpm/min的摇床上振荡培养;待溶液变浑浊后,收集上清液保存。
5、取上述培养的上清液1ml,分别配制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5的稀释液,取100μl稀释液,涂布在含mrs琼脂培养基上,在37℃恒温培养12-24h(每个稀释度3个平行),观察平板上菌落的生长情况。挑选其中清晰可见的单菌落,用接种环挑出转接到含香豆素的初筛培养基中进行平板划线,挑出生长状况较好的菌株转接到mrs琼脂培养基上,多次分离纯化,一共得到10株具有消减黄曲霉毒素的纯菌株,其中3株为植物乳杆菌。通过比较它们降解毒素的效果,以及参考饲料允许添加益生菌目录,最终筛选出1株效果最好的植物乳杆菌菌株(植物乳杆菌ys-718),保藏于中国典型培养物保藏中心,简称cctcc,保藏编号为cctccno.m 20232226,分类命名为:lactobacillus plantarum ys-718。
6、利用16s rdna特异性扩增技术对其菌种鉴定,结果表明这是一株植物乳杆菌(lactobacillus plantarum),属于乳酸菌科,在国家允许饲料添加益生菌目录之内。
7、本专利技术第二方面提供一种黄曲霉毒素生物处理剂,包含上述植物乳杆菌ys-718的发酵液。
8、本专利技术第三方面提供上述植物乳杆菌ys-718在消减黄曲霉毒素的应用,具体应用方法为:将植物乳杆菌ys-718的发酵液和生物样品接触,消减生物样品中的黄曲霉毒素b1。
9、按上述方案,所述的应用方法为:取植物乳杆菌ys-718的发酵液加入到灭菌花生粕中,发酵消减黄曲霉毒素。所述的发酵条件为37±1℃下发酵48-72h。
10、按上述方案,所述的植物乳杆菌ys-718的发酵液加入到待处理样品前,经过或未经过热处理皆可。所述的热处理为置于98±1℃进行。
11、按上述方案,所述的植物乳杆菌ys-718发酵液的终浓度为(1-9)×108cfu/ml。
12、按上述方案,所述植物乳杆菌ys-718发酵液的制备方法为:植物乳杆菌ys-718在mrs琼脂中活化,在37℃培养箱中培养48h,用接种针挑取植物乳杆菌ys-718的单菌落,转移至mrs肉汤(mrs液体培养基,用于食品中乳酸菌的选择性增菌培养)中,振荡培养12h-24h,获得发酵益生菌植物乳杆菌ys-718的发酵液。
13、本专利技术的有益效果:
14、本专利技术的植物乳杆菌ys-718能有效消减黄曲霉毒素b1,对花生粕中黄曲霉毒素b1有良好的消减效果。
15、本专利技术分离的微生物植物乳杆菌属于国家允许在饲料中添加的益生菌微生物目录之内,能应用于花生粕发酵进行黄曲霉毒素b1脱毒。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.植物乳杆菌YS-718,其特征在于:于2023年11月15日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO.M 20232226。
2.一种黄曲霉毒素生物处理剂,包含权利要求1所述的植物乳杆菌YS-718的发酵液。
3.权利要求1所述的植物乳杆菌YS-718或权利要求2所述的黄曲霉毒素生物处理剂在消减黄曲霉毒素B1中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:具体的应用方法为:将植物乳杆菌YS-718发酵液与生物样品接触,减少生物样品的黄曲霉毒素污染。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:取植物乳杆菌YS-718的发酵液加入到灭菌花生粕中,发酵消减黄曲霉毒素。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:所述的发酵条件为37±1℃下发酵48-72h。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:所述的植物乳杆菌YS-718的发酵液加入到待处理样品前,经过热处理后加入到灭菌花生粕中,37±1℃下处理48-72h消减黄曲霉毒素。
8.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述的
9.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述植物乳杆菌YS-718发酵液的制备方法为:植物乳杆菌YS-718在MRS琼脂中活化,在37℃培养箱中培养48h,用接种针挑取植物乳杆菌YS-718的单菌落,转移至MRS液体培养基中,振荡培养12h-24h,获得发酵益生菌植物乳杆菌YS-718发酵液。
...【技术特征摘要】
1.植物乳杆菌ys-718,其特征在于:于2023年11月15日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为cctcc no.m 20232226。
2.一种黄曲霉毒素生物处理剂,包含权利要求1所述的植物乳杆菌ys-718的发酵液。
3.权利要求1所述的植物乳杆菌ys-718或权利要求2所述的黄曲霉毒素生物处理剂在消减黄曲霉毒素b1中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:具体的应用方法为:将植物乳杆菌ys-718发酵液与生物样品接触,减少生物样品的黄曲霉毒素污染。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:取植物乳杆菌ys-718的发酵液加入到灭菌花生粕中,发酵消减黄曲霉毒素。
6.根据权利要求5所述的应用,其...
【专利技术属性】
技术研发人员:毛劲,李培武,袁芳,张奇,喻理,程玲,杨祥龙,
申请(专利权)人:中国农业科学院油料作物研究所,
类型:发明
国别省市:
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