【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物，更具体地说，它涉及一种纤溶酶降解产物d-二聚体抗体及其应用。
技术介绍
1、纤维蛋白原(fibrinogen，fib)是凝血级联反应的目标蛋白。纤维蛋白原是一种340kda的可溶性血浆蛋白，由三对通过二硫键连接的α、β和γ链组成，其结构如图1所示。凝血系统的激活导致凝血酶生成，凝血酶通过催化蛋白水解去除纤维蛋白肽a和纤维蛋白肽b，将纤维蛋白原转化为纤维蛋白。这些裂解暴露了纤维蛋白原e区中的两个聚合位点，形成可溶性纤维蛋白(soluble fibrin，sf)，来自纤维蛋白(原)分子的d区可以与之结合。可溶性纤维蛋白自发聚合成双链原纤维，每条链中的纤维蛋白单体以端对端的方式排列，而跨链的纤维蛋白则以半交错重叠的方式排列，如图2中a链和b链的组合所示。因子xiiia催化相邻的d区通过异肽键共价交联，形成交联稳定的纤维蛋白。
2、纤维蛋白溶解(即纤溶)的基本过程可分为两个阶段：纤溶酶原(plasminogen，plg)的激活与纤维蛋白的降解。纤溶酶降解纤维蛋白原产生x、y、d及e片段(见图1)。纤溶酶降解交联稳定的纤维蛋白时，由于酶切位点不同，产生多样化片段(见图2)，如图dd/e、dy/yd、dxy/yxd和dxd/yy，其中dd/e是降解最小片段(d-二聚体)。上述所有的片段统称为纤维蛋白(原)降解产物(fibrin(fibrinogen)degradation products，fdp)。
3、血浆d-二聚体是反映凝血及纤溶系统活化的分子标志物之一。当血管内血栓形成时产生大量交联纤维蛋白，
4、目前，血浆d-二聚体检测方法主要有胶乳凝集法、酶联免疫吸附试验、胶体金免疫渗透试验及免疫比浊法等。酶联荧光分析法如vidasd-二聚体检测法具有较高的敏感性和阴性预测值，床旁快速诊断方法目前还不成熟。市售d-二聚体大多为采用传统杂交瘤技术制备的鼠单抗。杂交瘤技术存在开发种属有限(利用杂交瘤技术生产出的单克隆抗体多为鼠源性)、制备周期长、操作步骤繁琐、易产生人抗鼠抗体(hama)反应、在人体循环系统中很快被清除等缺点。针对纤溶系统检测相关单抗，d-二聚体由纤维蛋白原经不同酶催化得到，与纤维蛋白原结构有很大相似性，给杂交瘤鼠单抗筛选造成很大困难。
5、鉴于此，亟需开发一种能够对纤溶酶降解产物d-二聚体进行有效结合，且容易筛选和获得的抗体。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本申请提供纤溶酶降解产物d-二聚体抗体及其应用。
2、本申请采用如下技术方案：
3、第一方面，本申请提供一种纤溶酶降解产物d-二聚体抗体，上述d-二聚体抗体包括第一抗体dd-1、第二抗体dd-2或第三抗体dd-3中的任一种；
4、所述第一抗体dd-1的重链h-dd-1的互补决定区cdr如下：seq id no.01所示的cdr1、seq id no.02所示的cdr2、seq id no.03所示的cdr3；所述第一抗体dd-1的轻链l-dd-1的互补决定区cdr如下：seq id no.06所示的cdr1、seq id no.07所示的cdr2、seq idno.08所示的cdr3；
5、所述第二抗体dd-2的重链h-dd-2的互补决定区cdr如下：seq id no.11所示的cdr1、seq id no.12所示的cdr2、seq id no.13所示的cdr3；所述第二抗体dd-2的重链l-dd-2的互补决定区cdr如下：seq id no.16所示的cdr1、seq id no.17所示的cdr2、seq idno.18所示的cdr3；
6、所述第三抗体dd-3的重链h-dd-3的互补决定区cdr如下：seq id no.21所示的cdr1、seq id no.22所示的cdr2、seq id no.23所示的cdr3；所述第三抗体dd-3的重链l-dd-3的互补决定区cdr如下：seq id no.26所示的cdr1、seq id no.27所示的cdr2、seq idno.28所示的cdr3。
7、第二方面，本申请提供一种纤溶酶降解产物d-二聚体抗体，所述d-二聚体抗体为第一抗体dd-1，所述第一抗体dd-1的重链可变区的氨基酸序列如seq id no.04所示，所述第一抗体dd-1的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.09所示。
8、第三方面，本申请提供一种纤溶酶降解产物d-二聚体抗体，所述d-二聚体抗体为第二抗体dd-2，所述第二抗体dd-2的重链可变区的氨基酸序列如seq id no.14所示，所述第二抗体dd-2的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.19所示。
9、第四方面，本申请提供一种纤溶酶降解产物d-二聚体抗体，所述d-二聚体抗体为第三抗体dd-3，所述第三抗体dd-3的重链可变区的氨基酸序列如seq id no.24所示，所述第三抗体dd-3的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.29所示。
10、第五方面，本申请提供一种与上述纤溶酶降解产物d-二聚体抗体相关的生物材料，该生物材料为如下任一种：
11、(a)核酸分子，编码上述所述d-二聚体抗体；
12、(b)表达盒，含有(a)中的核酸分子；
13、(c)重组载体，含有(a)中的核酸分子或(b)中的表达盒；
14、(d)重组细胞，含有(a)中的核酸分子、(b)中的表达盒或(c)中的重组载体。
15、第六方面，本申请提供一种检测d-二聚体的试剂盒，该试剂盒含有如上纤溶酶降解产物d-二聚体抗体。
16、第七方面，本申请提供一种结合物，该结合物包含与化学标记或生物标记共价连接的如上述d-二聚体抗体。
17、第八方面，本申请提供一种偶联物，该偶联物由上述d-二聚体抗体、和/或权上述结合物与固体介质或半固体介质偶联形成。
18、第九方面，本申请提供一种上述的d-二聚体抗体、结合物或偶联物在制备检测d-二聚体表达的产品中的应用。
19、第十方面，本申请提供一种检测d-二聚体的方法，其包括：
20、采用上述d-二聚体抗体、试剂盒、结合物或偶联物与待检测样本进行接触，形成免疫复合物；
21、基于所述免疫复合物的信号，确定所述待检测样本中是否含有d-二聚体或所述d-二聚体的含量。
22、综上所述，本申请具有以下有益效果：
23、1.相比于传统鼠杂交瘤细胞抗体筛选技术，本专利技术从免疫种属(兔源)、筛选方案及抗体表达多方向做出优化，首次将单个b细胞抗体制备技术和流式细胞分选法应用于纤溶系统检测抗体开发，实现精准、高通量筛选。
24、2.本申请从免疫动物组织或外周血中分离抗原特异性b细胞，通过单细胞pcr技术从单个抗体分泌本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种纤溶酶降解产物D-二聚体抗体，其特征在于，所述D-二聚体抗体包括第一抗体DD-1、第二抗体DD-2或第三抗体DD-3中的任一种；
2.一种纤溶酶降解产物D-二聚体抗体，其特征在于，所述D-二聚体抗体为第一抗体DD-1，所述第一抗体DD-1的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO .04所示，所述第一抗体DD-1的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO .09所示。
3.一种纤溶酶降解产物D-二聚体抗体，其特征在于，所述D-二聚体抗体为第二抗体DD-2，所述第二抗体DD-2的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO .14所示，所述第二抗体DD-2的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO .19所示。
4.一种纤溶酶降解产物D-二聚体抗体，其特征在于，所述D-二聚体抗体为第三抗体DD-3，所述第三抗体DD-3的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO .24所示，所述第三抗体DD-3的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO .29所示。
5.一种与权利要求1-4任一项所述的纤溶酶降解产物D-二聚体抗体相关的
6.一种检测D-二聚体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有如权利要求1-4任一项所述的纤溶酶降解产物D-二聚体抗体。
7.一种结合物，其特征在于，所述结合物包含与化学标记或生物标记共价连接的如权利要求1-4任一项所述的D-二聚体抗体。
8.一种偶联物，其特征在于，所述偶联物由权利要求1-4任一项所述的D-二聚体抗体、和/或权利要求7中所述的结合物与固体介质或半固体介质偶联形成。
9.一种如权利要求1-4任一项所述的D-二聚体抗体、权利要求7中所述的结合物或权利要求8中所述的偶联物在制备检测D-二聚体表达的产品中的应用。
10.一种检测D-二聚体的方法，其特征在于，包括：
...【技术特征摘要】
1.一种纤溶酶降解产物d-二聚体抗体，其特征在于，所述d-二聚体抗体包括第一抗体dd-1、第二抗体dd-2或第三抗体dd-3中的任一种；
2.一种纤溶酶降解产物d-二聚体抗体，其特征在于，所述d-二聚体抗体为第一抗体dd-1，所述第一抗体dd-1的重链可变区的氨基酸序列如seq id no .04所示，所述第一抗体dd-1的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no .09所示。
3.一种纤溶酶降解产物d-二聚体抗体，其特征在于，所述d-二聚体抗体为第二抗体dd-2，所述第二抗体dd-2的重链可变区的氨基酸序列如seq id no .14所示，所述第二抗体dd-2的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no .19所示。
4.一种纤溶酶降解产物d-二聚体抗体，其特征在于，所述d-二聚体抗体为第三抗体dd-3，所述第三抗体dd-3的重链可变区的氨基酸序列如seq id no .24所示，所述第三...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨娟，颜川，宋姗姗，韩玲，
申请(专利权)人：北京赛科希德科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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