一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法技术

本申请涉及生物活性肽制备技术领域，公开了一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法，包括以下步骤：（1）将黄精根茎粉碎后用乙醇溶液进行预处理，得到水提浓缩液；（2）将水提浓缩液加入缓冲液中提取黄精总蛋白；（3）将总蛋白溶液与酶进行酶解，酶解条件为酶浓度为底物质量的2%5%，pH范围为7.5‑8.5，温度为45‑55℃，时间为35小时；（4）将酶解液进行超滤去除大分子杂质后，使用金属修饰介质动态配位分离目标肽段，目标肽段通过逆流分配色谱进行纯化，冷冻干燥后制备得到黄精肽。本发明专利技术通过复配酶协同酶解、多位点动态调控和动态配位分离技术，更好的作为抗炎护肾的原料使用，用于预防和辅助治疗肾脏相关疾病。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物活性肽制备，具体为一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法。

技术介绍

1、黄精肽因其显著的抗炎护肾功能，近年来在功能性食品和药物领域备受关注。作为一种具有明确分子量范围（800~1,200da）的活性肽段，黄精肽通过调节炎症因子、抗氧化应激等机制，对肾脏细胞起到保护作用。目前，黄精肽的制备主要包括原料预处理、蛋白提取、酶解、分离和纯化等步骤。然而，这些工艺在生产实际中的效率、目标肽段生成量和最终产品纯度上尚存在较多局限性，导致黄精肽的规模化应用受限。

2、现有技术中，酶解阶段采用单一酶进行固定条件下的蛋白质降解，未能充分利用复配酶的协同性，导致目标肽段生成率偏低。同时，分离与纯化阶段多采用超滤结合常规色谱分离技术，主要依赖分子量大小或物理特性进行粗分离，对目标肽段缺乏特异性选择，最终产品纯度较低。此外，动态调控手段的缺失使得酶解效率、分离效果以及整体工艺的稳定性和效率受到严重限制。现有技术在酶解协同机制、分离精准性、工艺稳定性等方面存在不足，难以实现目标肽段的高效制备和高纯度分离。

技术实现思路<本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法，其特征在于，所述黄精根茎粉碎的粒径为80目，所用乙醇溶液的浓度为70%，预处理温度为40-50℃，时间为24小时，料液比为1:8-1:10，乙醇处理后获得的滤液需浓缩至1/51/10原体积，并去除沉淀物备用。

3.根据权利要求1所述的一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法，其特征在于，所述提取黄精总蛋白时使用的缓冲液为Tris-HCl缓冲液，缓冲液的浓度为20—50mmol/L，提取过程中料液比为1:5，提取温度为4℃，时间为23小时，提取后的液体...

【技术特征摘要】

1.一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法，其特征在于，所述黄精根茎粉碎的粒径为80目，所用乙醇溶液的浓度为70%，预处理温度为40-50℃，时间为24小时，料液比为1:8-1:10，乙醇处理后获得的滤液需浓缩至1/51/10原体积，并去除沉淀物备用。

3.根据权利要求1所述的一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法，其特征在于，所述提取黄精总蛋白时使用的缓冲液为tris-hcl缓冲液，缓冲液的浓度为20—50mmol/l，提取过程中料液比为1:5，提取温度为4℃，时间为23小时，提取后的液体需经过4,000-6,000rpm的离心1015分钟以分离上清液并去除杂质。

4.根据权利要求1所述的一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法，其特征在于，所述酶解反应中使用的酶为胰蛋白酶与木瓜蛋白酶的复配酶，胰蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比为2:1-4:1，总酶浓度为底物质量的2%～5%，酶解液中目标蛋白浓度为5—10mg/ml，酶解时间为35小时，在反应过程中需动态调整反应条件以确保ph值保持在7.5~8.5范围内。

5.根据权利要求1所述的一种用于抗炎护肾的黄精肽制备方法，其特征在于，所述酶解液灭酶操作包括升温至80-90℃并维持10～15分钟，同时加入0.1%～0.2%（w/v）的柠檬酸以稳定酶解产物，灭酶后的溶液需快速冷却至室温并过滤去除残留杂质。

6.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨士超，葛志勇，
申请(专利权)人：河南省壹零玖生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：