CsAHL15基因提高柑橘溃疡病抗性的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种CsAHL15基因提高柑橘溃疡病抗性的方法及应用，涉及农业生物基因领域。一种CsAHL15提高柑橘溃疡病抗性的方法，包括如下步骤：(1)克隆柑橘CsAHL15编码序列，所述CsAHL15编码序列如SEQ ID No.1所示；(2)构建CsAHL15过表达载体；(3)CsAHL15过表达载体转化柑橘，经鉴定得到溃疡病抗性提高的转基因植株。本发明专利技术通过克隆柑橘CsAHL15编码序列，进行过表达载体构建，然后转化柑橘，得到的转基因植株溃疡病发病程度可最大降低至现有柑橘的40.09％，能显著减轻溃疡病的发病程度，减小病斑面积。综上所述，本发明专利技术是一种有潜力的提高柑橘溃疡病抗性的生物工程技术，对柑橘抗溃疡病分子育种有较大价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及农业生物基因领域，具体涉及一种csahl15基因提高柑橘溃疡病抗性的方法及应用。

技术介绍

1、柑橘是我国南方第一大水果，也是全球重要的经济作物。然而，柑橘溃疡病严重阻碍了柑橘产业的健康发展(胡军华等，2015)。柑橘溃疡病由黄单胞杆菌柑橘致病变种(xanthomonas citrisubsp.citri，xcc)引起，起源于印度、爪哇等地(胡军华等，2015)。我国福建、湖南、广东等柑橘主产区受柑橘溃疡病侵害较为严重。溃疡病菌主要侵染柑橘叶片、枝梢、果实等，其中苗木、幼树受害较为严重(何秀玲等，2007)。病树会出现落叶、枯梢、树势衰弱以及落果等现象，严重的影响了柑橘产量和品质。受柑橘溃疡病危害的芸香科植物有几十种，其中绝大部分为经济栽培品种。有研究发现甜橙最易感病，其次是酸橙和柚类(袁承东等，1997；李敏等，2013)。

2、目前，控制柑橘溃疡病危害通常采取综合防治策略，以化学防治为主，生物防治为辅。但由于化学防治措施对环境不友好，极易对环境造成污染，且需要投入大量的人力、物力，生物防治效果差，成本高，所以亟待通过培育抗病新本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.过表达CsAHL15基因提高柑橘溃疡病抗性的应用，其特征在于，所述CsAHL15基因为一种含有DNA结合钩基核定位蛋白的转录因子。

2.根据权利要求1所述的过表达CsAHL15基因提高柑橘溃疡病抗性的应用，其特征在于，所述CsAHL15编码序列如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

3.CsAHL15提高柑橘溃疡病抗性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的CsAHL15提高柑橘溃疡病抗性的方法，其特征在于，步骤(1)中，柑橘CsAHL15编码序列的克隆方法为：提取柑橘总RNA，反转录为cDNA作为模板，利用引物OE-CsA...

【技术特征摘要】

1.过表达csahl15基因提高柑橘溃疡病抗性的应用，其特征在于，所述csahl15基因为一种含有dna结合钩基核定位蛋白的转录因子。

2.根据权利要求1所述的过表达csahl15基因提高柑橘溃疡病抗性的应用，其特征在于，所述csahl15编码序列如seq id no.1所示的核苷酸序列。

3.csahl15提高柑橘溃疡病抗性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的csahl15提高柑橘溃疡病抗性的方法，其特征在于，步骤(1)中，柑橘csahl15编码序列的克隆方法为：提取柑橘总rna，反转录为cdna作为模板，利用引物oe-csahl15-f和oe-csahl15-r进行pcr扩增并回收csahl15编码序列dna片段，其中，所述引物oe-csahl15-f和oe-csahl15-r分别如seq id no.2和seq id no.3所示的核苷酸序列。

5.根据权利要求3所述的csahl15提高柑橘溃疡病抗性的方法，其特征在于，步骤(2)中，csahl15过表达载体的构建方法为：kpni和ecori酶切回收的csahl15编码序列dna片段，再连接到kpni和ecori酶切回收的plgne载体上，构建过表达载体plgne-csahl15。

6.根据权利要求3所述的csahl15提高柑橘溃疡病抗性的方法，其特征在于，步骤(3)中，csahl15过表达载体转化柑橘的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：李强，刘一琪，何厚整，宋庆伟，林朵，杨钰芹，赵峻杰，何永睿，陈善春，雷天刚，彭爱红，邹修平，龙琴，
申请(专利权)人：西部重庆科学城种质创制大科学中心，
类型：发明
国别省市：