一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，对富含吡咯喹啉醌的发酵液采用组合滤膜过滤进行固液分离和浓缩；溶液中加入盐酸和氯化钠，调节pH搅拌后固液分离；固体中加入缓冲液溶解后加入氢氧化钠调节pH，使用活性炭脱色，然后固液分离；液体用缓冲液稀释后进行柱层析，使用pH=7.0‑8.5、梯度盐浓度的解吸剂解吸得到柱层析解吸液；加入氯化钠至产品析出，搅拌后分离；固体使用超纯水溶解，加入乙醇，加入盐酸调节至酸性，固液分离，干燥后得到固体吡咯喹啉醌。该方法无需使用大量有机试剂、绿色环保；生产成本低，分离纯化效果好，收获的吡咯喹啉醌产品HPLC纯度＞99%，各单杂含量均＜0.1%，成品质量符合美国药典的质量要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物分离纯化，具体涉及一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法。

技术介绍

1、吡咯喹啉醌（pyrroloquinoline quinone，pqq，又称4，5二氢4，5二氧化1氢吡咯（2，3f）醌2，7，9三羧酸，methaxatin），是一种人体内脱氢酶可利用的辅酶，被分类为b族维生素。pqq于1979年被研究人员发现，从甲基营养菌中被分离提纯后研究表明其为细菌体内代谢甲醇的脱氢酶的辅酶，与呼吸电子传递链耦合，起到促进细菌代谢的作用。一些研究表明pqq可以起到调控表观遗传达与细胞代谢起到抗癌和抗衰老的作用，可以通过每日适量（≤20 mg/d）摄入作为保健品使用。

2、传统的pqq生产方法以化学合成法居多，但其合成步骤多、副产物多且纯化成本大的弊端难以消除。发酵法生产pqq在近几十年迅速发展，因其成本优势逐渐取代了化学合成法，成为主流的生产方法。

3、鉴于现在的pqq生产现状，于发酵液中提取纯化pqq是pqq纯化研究不可或缺的一环。现在已经公开不少pqq得分离纯化方法，但是这些方法，要么周期长，生产成本高；要么需要使用多种有机试本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤S1中，组合滤膜过滤为依次采用孔径40-50 nm的陶瓷膜、8-10 KDa的超滤膜、400-500 Da的纳滤膜进行过滤。

3.根据权利要求1所述的一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，其特征在于，步骤S3中，缓冲液为20-50 mmol/L的磷酸二氢钠-氢氧化钠缓冲液。

4.根据权利要求1所述的一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，其特征在于，步骤S3中，活性炭用量为0.5-0.8 %w/v，脱色时间为4-5 h。

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【技术特征摘要】

1.一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤s1中，组合滤膜过滤为依次采用孔径40-50 nm的陶瓷膜、8-10 kda的超滤膜、400-500 da的纳滤膜进行过滤。

3.根据权利要求1所述的一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，其特征在于，步骤s3中，缓冲液为20-50 mmol/l的磷酸二氢钠-氢氧化钠缓冲液。

4.根据权利要求1所述的一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，其特征在于，步骤s3中，活性炭用量为0.5-0.8 %w/v，脱色时间为4-5 h。

5.根据权利要求1所述的一种吡咯喹啉醌的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤s4中，梯度盐浓度的解吸剂解吸为：依次使用3 bv 0.1-0.2 mol/l解析剂，5 bv 0.3-0.5mol/l的解析剂，8-10 bv 0.6-0.7 mol/l解...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐明，李胤直，徐钰婷，姚红，施林峰，
申请(专利权)人：核芯生物医药科技杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：