多道甲基化基因荧光定量PCR反应液试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了多道甲基化基因荧光定量PCR反应液试剂盒。本发明专利技术提供了一种多道甲基化基因荧光定量PCR预混液，其有效组分由KCl、Glycerol、MgCl2、dNTPs、DNA聚合酶组成，其中，所述KCl、Glycerol、MgCl2、dNTPs、DNA聚合酶的使用配比为：60‑80mmol：0.5‑1L：6‑8mmol：600‑800μmol：(0.04‑0.13)*10‑6U。本发明专利技术研发出一个通用的，适合不同基因甲基化QPCR的预混液及浓度的配制。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，涉及一种多道甲基化基因荧光定量pcr反应液试剂盒。

技术介绍

1、多道甲基化基因荧光定量pcr反应，是指dna模板在亚硫酸盐转化后在同一pcr反应液内和多个基因的甲基化引物和探针进行扩增反应，获得各自基因甲基化的产物，例如用基因甲基化作为标志物早期筛选和检测肺癌。但是要获得理想的结果，在选定多个基因的引物和探针进行扩增反应时，qpcr反应液的组成和匹配显得相当重要。

2、pcr又称为聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定dna片段的技术，其能让dna片段数目在引物核苷酸顺序的引导下以指数型扩展增长。pcr过程大致分3步，变性—退火—延伸：1、变性：(90℃-96℃)：双链dna模板在热作用下，氢键断裂，形成单链dna；2、退火：(60℃-65℃)：系统温度降低，引物与dna模板结合，形成局部双链；3、延伸：(70℃-75℃)：在taq酶(在72℃左右，活性最佳)的作用下，以dntp为原料，从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸，合成与模板互补的dna链。在经历一次变性-退火-延伸的流程之后，原本只有1条的dna双链变成本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多道甲基化基因荧光定量PCR预混液，其有效组分由KCl、Glycerol、MgCl2、dNTPs和DNA聚合酶组成。

2.根据权利要求1所述的预混液，其特征在于：所述KCl、所述Glycerol、所述MgCl2、所述dNTPs、所述DNA聚合酶的配比为：60-80mmol：0.5-1L：6-8mmol：600-800μmol：(0.04-0.13)*10-6U。

3.权利要求1或2所述预混液在制备PCR反应体系中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述PCR反应体系为荧光定量PCR反应体系；

5.一种PCR反应体系，...

【技术特征摘要】

1.一种多道甲基化基因荧光定量pcr预混液，其有效组分由kcl、glycerol、mgcl2、dntps和dna聚合酶组成。

2.根据权利要求1所述的预混液，其特征在于：所述kcl、所述glycerol、所述mgcl2、所述dntps、所述dna聚合酶的配比为：60-80mmol：0.5-1l：6-8mmol：600-800μmol：(0.04-0.13)*10-6u。

3.权利要求1或2所述预混液在制备pcr反应体系中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述pcr反应体系为荧光定量pcr反应体系；

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【专利技术属性】
技术研发人员：胡立夫，南熠郎，
申请(专利权)人：深圳泽医细胞治疗集团有限公司，
类型：发明
国别省市：