山羊支原体山羊肺炎亚种的TaqMan探针实时荧光定量PCR试剂盒及方法技术

本发明专利技术涉及致病菌检测技术领域，具体涉及山羊支原体山羊肺炎亚种的TaqMan探针实时荧光定量PCR试剂盒及方法。首次通过对已公开的26株山羊支原体山羊肺炎亚种及235株其他支原体的基因组进行比较基因组学分析，成功鉴定出Mccp独有的特异性基因。以该基因为检测靶点，设计了一款专门用于Mccp检测的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测试剂盒。本发明专利技术建立了针对Mccp的高效检测方法，解决了现有检测技术检测效果不理想的技术问题。本方案提高了山羊传染性胸膜肺炎诊断的速度和准确性，为早期发现、及时治疗和紧急免疫提供了可靠的技术支持，可有效降低经济损失，保障养羊业健康发展，具有重要的科学意义和经济效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及致病菌检测，具体涉及山羊支原体山羊肺炎亚种的taqman探针实时荧光定量pcr试剂盒及方法。

技术介绍

1、山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,ccpp)是世界动物卫生组织(woah)名录中必须上报的疾病，在2022年最新发布的《一、二、三类动物疫病病种名录》中新增为二类动物疫病，ccpp的发病率和死亡率最高分别可达100％和80％。该病在亚洲、非洲和中东地区造成了严重的经济损失，其主要感染山羊，绵羊也能感染，近年来调查数据显示其对野生动物如努比亚羚羊、野山羊、长颈羚、拉里斯坦盘羊、阿拉伯羚羊和藏羚羊等也造成了严重的危害。根据病程可分为慢性、急性和亚急性。急性和亚急性ccpp的典型临床症状包括发热、呼吸困难和咳嗽，病理解剖特征为胸腔内出现单侧严重胸腔积液及纤维素性胸膜肺炎。

2、该病的病原为山羊支原体山羊肺炎亚种(mycoplasma capricolum subspeciescapripneumoniae，mccp)，然而，由于mccp生长条件苛刻，生长缓慢，分离时间久且失败本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.山羊支原体山羊肺炎亚种的TaqMan探针实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：其用于检测的靶基因为SEQ ID NO.3所示的基因。

2.根据权利要求1所述的山羊支原体山羊肺炎亚种的TaqMan探针实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：其包括核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示的正向引物和核苷酸序列如SEQID NO.10所示的反向引物；以及包括核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示的探针，探针的5’端连接有荧光基团，3’端连接有荧光淬灭基团。

3.根据权利要求2所述的山羊支原体山羊肺炎亚种的TaqMan探针实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：所述荧光基团...

【技术特征摘要】

1.山羊支原体山羊肺炎亚种的taqman探针实时荧光定量pcr试剂盒，其特征在于：其用于检测的靶基因为seq id no.3所示的基因。

2.根据权利要求1所述的山羊支原体山羊肺炎亚种的taqman探针实时荧光定量pcr试剂盒，其特征在于：其包括核苷酸序列如seq id no.9所示的正向引物和核苷酸序列如seqid no.10所示的反向引物；以及包括核苷酸序列如seq id no.8所示的探针，探针的5’端连接有荧光基团，3’端连接有荧光淬灭基团。

3.根据权利要求2所述的山羊支原体山羊肺炎亚种的taqman探针实时荧光定量pcr试剂盒，其特征在于：所述荧光基团为羧基荧光素；所述荧光淬灭基团为黑洞淬灭基团。

4.根据权利要求2所述的山羊支原体山羊肺炎亚种的taqman探针实时荧光定量pcr试剂盒，其特征在于：其用于构成反应体系；所述反应体系包括0.3-0.5μl正向引物、0.3-0.5μl反向引物、0.6-1μl探针、1-3μl模板dna、0.4μl内参染料、10μl预混液，使用水将反应体系补齐至20μl；

5.根据权利要求4所述的山羊支原体山羊肺炎亚种的taqman探针实时荧光定量pcr试剂盒，其特征在于：所述反应体系包括0.4μl正向引物、0.4μl反向引物、0.8μl探针、2μl模板dna、0.4μl内参染料、10μl预混液，使用...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗永强，张素辉，闫晓阳，徐登峰，沈克飞，余远迪，付利芝，
申请(专利权)人：重庆市畜牧科学院，
类型：发明
国别省市：