工程化半胱氨酸抗体表达细胞的细胞培养方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种工程化半胱氨酸抗体表达细胞的细胞培养方法及其应用。该培养方法包括：将工程化半胱氨酸抗体表达细胞在初始温度为35～37℃，初始pH为6.7～7.3的条件下进行细胞培养；在细胞培养的过程中，当细胞培养达到第一条件时，降低初始温度至30～33℃，并同时降低初始pH至6.6～7.2；在细胞培养的过程中添加如下一种或多种添加剂：L‑半胱氨酸和/或L‑胱氨酸。能够解决现有技术中缺少一种能够有效减少工程化半胱氨酸抗体高酸性电荷异质体的方法的问题，适用于工程化半胱氨酸抗体的细胞培养领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及工程化半胱氨酸抗体细胞培养领域，具体而言，涉及一种工程化半胱氨酸抗体表达细胞的细胞培养方法及其应用。

技术介绍

1、工程化半胱氨酸抗体是一种通过基因工程技术在抗体的特定位置精准插入半胱氨酸残基，进而利用半胱氨酸上的巯基与毒素分子进行偶联，形成位点专一的adc药物(antibody-drug conjugate，抗体药物偶联物)。这种工程化改造可以精确控制半胱氨酸残基的插入位置，实现抗体与毒素分子的精确定点偶联，从而显著提高adc药物的均一性。另外，半胱氨酸残基的引入不会干扰免疫球蛋白的折叠和组装，也不会改变抗体与抗原的结合模式，因此获得的adc药物既保留了其体内抗肿瘤活性，还提高了耐受性、降低了系统毒性。

2、细胞培养阶段工程化的半胱氨酸位点会进行半胱氨酸化或谷胱甘肽化形成盖帽封端，这种不同形式的盖帽封端改变了抗体表面的电荷分布，使iex-hplc/icief电荷异质性分析从典型的一个主峰改变为多个峰，造成主峰占比降低，酸碱性峰占比升高。作为一种经过特殊修饰的抗体，酸性电荷异质体的形成还与抗体传统蛋白翻译后修饰作用有关，包括脱酰胺本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种工程化半胱氨酸抗体表达细胞的细胞培养方法，其特征在于，所述细胞培养方法包括：

2.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述第一条件包括所述细胞培养的过程中活细胞密度为(10～16)×106cells/mL或所述细胞培养的第6天。

3.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述细胞培养中所述工程化半胱氨酸抗体表达细胞的接种密度为(0.3～0.7)×106cells/mL。

4.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述添加剂的总添加量为1～100mM。

5.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述细...

【技术特征摘要】

1.一种工程化半胱氨酸抗体表达细胞的细胞培养方法，其特征在于，所述细胞培养方法包括：

2.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述第一条件包括所述细胞培养的过程中活细胞密度为(10～16)×106cells/ml或所述细胞培养的第6天。

3.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述细胞培养中所述工程化半胱氨酸抗体表达细胞的接种密度为(0.3～0.7)×106cells/ml。

4.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述添加剂的总添加量为1～100mm。

5.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述细胞培养包括：将所述工程化半胱氨酸抗体表达细胞在基础培养基中培养；

6.根据权利要求5所述的细胞培养方法，其特征在于，所述基础培养基包括actipro、veg...

【专利技术属性】
技术研发人员：周莎莎，王振守，
申请(专利权)人：上海凯莱英生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：