一种检测甲氨蝶呤浓度的纳米粒子及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及检测分析技术领域，公开了一种检测甲氨蝶呤浓度的纳米粒子及其制备方法和应用。本发明专利技术公开的纳米粒子包括与金纳米颗粒连接的带有标记基团的发夹DNA和可以被甲氨蝶呤特异性识别的适体链DNA，并且适体链DNA与行走链DNA杂交为双链DNA连接在磁珠上，一方面，通过标记荧光团的DNA链，收集荧光信号来测量MTX浓度；另一方面，失去DNA保护的金纳米，加入氯化钠后在高盐条件下聚集颜色发生变化，通过收集紫外值来测量MTX浓度。本发明专利技术提供的纳米粒子，各部分之间相互作用，对信号进行放大，发挥双重检测MTX浓度的效果，为能够实时、准确掌握药物浓度，提高治疗安全性和效果提供了一种强有力的策略。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检测分析，具体涉及一种双重检测甲氨蝶呤浓度的纳米粒子及其制备方法和应用。

技术介绍

1、美国国家临床生化科学院(nacb)将即时检验(poct:point-of-care testing)定义为“在接近受试者处,由未接受临床实验室科学训练的人员或受试者本人进行的实验检验；它是在传统的中心实验室以外进行的一切检验”。poct是一种极具潜力的检测技术，快速简便、效率高、成本低，有检验周期短、标本用量少等优点。同时，其试剂稳定且便于保存和携带，已经被广泛用于临床，甚至自我检测，可以直接快速地得到可靠的结果，为医师进一步诊治赢得宝贵的时间。

2、甲氨蝶呤(mtx,2,4-二胺-n10-甲基翼酰基谷氨酸)是一种叶酸拮抗剂，已广泛用于治疗各种癌症[4]、白血病淋巴瘤和骨肉瘤；同时，低剂量mtx也被广泛应用于炎性疾病的治疗，如类风湿关节炎、牛皮癣、狼疮等。此外，mtx还用于治疗自身免疫性疾病(包括类风湿关节炎、克罗恩病和牛皮癣)、异位妊娠和药物流产。人血清中mtx浓度随时间变化，个体间差异较大。对于没有精确剂量控制的疾病治疗，低剂量的mtx可能本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种双重检测甲氨蝶呤(MTX)浓度的纳米粒子，其特征在于，所述纳米粒子包括金纳米颗粒、发夹DNA和双链DNA。

2.根据权利要求1所述的纳米粒子，其特征在于，所述双链DNA包括两条全部或部分互补配对的DNA链，优选地，所述双链DNA包括一条甲氨蝶呤适体链(AP strand)和一条行走链(Walking strand)，进一步地，所述甲氨蝶呤适体链(AP strand)至少用于与甲氨蝶呤结合，所述行走链包括DNAzyme序列、与MTX适体链互补的序列和与发夹DNA互补的序列，更优选地，所述DNAzyme序列至少用于切割发夹DNA；所述与MTX适体链互补的序列靠近所述行走链...

【技术特征摘要】

1.一种双重检测甲氨蝶呤(mtx)浓度的纳米粒子，其特征在于，所述纳米粒子包括金纳米颗粒、发夹dna和双链dna。

2.根据权利要求1所述的纳米粒子，其特征在于，所述双链dna包括两条全部或部分互补配对的dna链，优选地，所述双链dna包括一条甲氨蝶呤适体链(ap strand)和一条行走链(walking strand)，进一步地，所述甲氨蝶呤适体链(ap strand)至少用于与甲氨蝶呤结合，所述行走链包括dnazyme序列、与mtx适体链互补的序列和与发夹dna互补的序列，更优选地，所述dnazyme序列至少用于切割发夹dna；所述与mtx适体链互补的序列靠近所述行走链(walking strand)的3’端；所述与发夹dna互补的序列至少用于在行走链被释放后形成单链状态时特异性与发夹dna互补结合，更优选地，所述甲氨蝶呤适体链(ap strand)的序列如seq id no.1所示；行走链(walking strand)的序列如seq id no.2所示：

3.根据权利要求1所述的纳米粒子，其特征在于，所述发夹dna(h-(7+9)strand)包括rna的裂解位点，优选地，所述rna的裂解位点嵌在发夹dna的茎部，更优选地，所述rna的裂解位点至少含有一个腺嘌呤核糖核苷酸，更优选地，所述发夹dna还包括标记基团，更优选地，所述标记基团包括荧光基团、叠氮基团中的至少一种，更优选地，所述发夹dna(h-(7+9)strand)还包括巯基基团(-sh)，更优选地，所述金纳米颗粒与所述发夹dna通过au-s键连接，更优选地，所述标记基团和所述金纳米颗粒位于所述rna裂解位点的两侧，更优选地，所述发夹dna还包括与行走链互补配对的序列，更优选地，所述发夹dna(h-(7+...

【专利技术属性】
技术研发人员：周易，刘晓亭，邵文晴，
申请(专利权)人：山东第一医科大学附属省立医院山东省立医院，
类型：发明
国别省市：